时间：2022-02-11 20:25:57
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在无偿献血工作全面开展、献血队伍日益壮大的今天，血液质量与安全也成了刻不容缓的问题。血站实验室的血细胞分析仪更多的被用于机采血小板前献血者的血细胞计数以及采集的各血液成分的质量监测，因此也就成为血站实验室保证血液产品质量的关键设备之一。同一实验室往往配置多台血细胞分析仪，有的使用相同厂家不同型号，甚至是不同厂家不同型号，他们的检测方法及原理不完全相同，性能之间存在差异，对同一标本的检测结果存在着偏差就在所难免[1]。血站血细胞分析仪检测结果的准确性和一致性是对献血者献血安全以及血液成分产品质量的根本保障，为保证实验室不同仪器间检测结果的可比性和准确性，实验室常用内部比对实验来对检测结果进行质量控制。现将对比结果报告如下：
1 资料与方法
1.1 仪器与试剂 日本希森美康Sysmex XS-500i及Sysmex XE-2100血细胞分析仪各一台。均使用原厂原装配套试剂、质控品、校准品。
1.2 标本 重复性实验用BIO-RAD全血质控品；比对实验用一次性EDTA-K2真空采血管采集健康献血者新鲜血液2ml40份。
1.3 方法
1.3.1 仪器确定 Sysmex XE-2100血细胞分析仪参作为参比仪器；Sysmex XS-500i血细胞分析仪作为比对仪器。
1.3.2 重复性测定 严格按照Sysmex血细胞分析仪操作手册中的质量控制和校准对仪器进行操作，在仪器质控满意状态下，取BIO-RAD全血质控品同批号三瓶混合均匀，在两台仪器上分别连续检测20次以进行重复性测定，计算它们各自的红细胞（RBC），白细胞（WBC），血红蛋白（HGB），红细胞压积（HCT）和血小板（PLT）5个参数的均值、SD和CV值。
1.3.3 一致性比对 每日收集新鲜健康献血者血液标本8份（2ml/管），连续收集5d。在仪器质控满意状态下，分别在每台血细胞分析仪上按常规标本进行检测，按标本号18的顺序进行，然后再按81的相反顺序连续测定，2～4h 内完成，记录各自的检测结果。
1.4 统计 将结果应用SPSS10.0统计软件进行处理。
1.5 判定规则 精密度：以CLIA'88规定的允许误差的1/4作为判定规则：即CV：WBC≤3.75% 、RBC≤1.5% 、HGB≤1.75% 、HCT≤1.5% 、PLT≤6.25%。相对偏差：以CLIA'88规定的允许误差的1/2作为判定标准： WBC≤7.5% 、RBC≤3.0% 、HGB≤3.5% 、HCT≤3.0% 、PLT≤12.5%[2]。
2 结果
2.1 2台仪器重复性测定 见表1。
2.2 两台血细胞分析仪测定结果的相关性比较 见表2。
对比仪器Sysmex XS-500i测得的WBC、RBC、HGB、PLT、HCT5项检测数据为X轴，参比仪器Sysmex XE-2100检测数据为Y轴作回归和相关性分析，求出他们的相关系数和回归方程y=bx+a，r≥0.95为范围合适，直线回归统计的斜率和截距可靠。
3讨论
本次试验显示，两台血细胞分析仪的5项指标的精密度均在CLIA88规定的1/4允许误差的可接受范围内，说明同一份标本在2台仪器上测定重复性较好，精密度高。本次实验的参比仪器选用Sysmex XE-2100血细胞分析仪，参加卫生部临检中心室间质评成绩一直为优秀，其良好的性能保证了结果的溯源性，因此用其作为参比仪器。Sysmex XS-500i 血细胞分析仪作为试验仪器进行比对。比对5日共40份新鲜全血标本，WBC、RBC、HBG、HCT、PLT比对结果均呈显著性正相关，相关系数（ r） 大于0.975。通过回归方程计算的偏差在1 /2CLIA'88 能力比对检验质量的要求以内，检测结果一致性高、差异小，检测结果可接受。
需要注意的是对血细胞分析仪比对实验的分析评价应包括在整个比对实验期间对室内质控的日常监测，以及每日的保养维护，保证在仪器最满意的可控状态下来对每一项监测指标进行比对分析。一旦出现某一项指标异常，应立即查找原因，看是否是由于偶然误差所致。否则就必须对仪器进行校准甚至检修后方可继续进行实验比对。实验室做好室内质控和室间质评很大程度上可以避免偶然误差和系统误差，但却难以满足不同仪器之间的结果比对[3]。所以按CAP 认证标准中要求，试验室每年需要进行至少2 次仪器比对。比对实验是实现准确度溯源和检验结果可比性的重要途径[4]。它是对血细胞分析仪除室内质控及室间质评之外的一个重要质量监测方法。本站规定每年的6月、12月的第1w进行比对实验。在期间若出现影响检测结果的维修、保养后，应及时进行比对实验，满意后方可继续使用。
本次实验的目的是评价实验室不同血细胞分析仪检测结果的可比性和临床接受性。近年来，血细胞分析仪的校准、质量控制以及不同仪器测定结果间的比对是研究的热点，三者相辅相成，互为因果[5]。要保证实验结果的一致性，实验室必须要建立完善的质量体系，制定尽可能规范的标准操作规程作为指导性文件，随着对血细胞分析仪使用的规范化、制度化，会对不同仪器的分析比对逐步完善，确保检测结果的一致性、可靠性和可信性，使血站实验室的质量水平不断提高，为提供合格安全的血液作保障。
参考文献：
[1]朱涛，陈华英. 实验室检测结果内部比对满意度评价方法初探[J]. 现代测量与实验室管理.2008，16（ 1） ： 38.
[2] 冯仁丰. 临床检验质量管理技术基础[M]（第2 版）.上海：上海科学技术文献出版社.2007： 185-203.
[3] 沈观樵，金海勇. 不同血细胞分析仪比对分析及偏差评估[J].现代实用医学2014 .（11）：1448 - 1449.
【关键词】血常规分析仪；比对
由于具检测结果准确、精密度高、操作简便等特点，血细胞分析仪在检验医学领域的应用愈来愈广泛，但因不同品牌或同一品牌不同型号的血细胞分析仪的测定原理及方法存在相异之处，可引致测定结果出现差异。本文参考美国临床和实验室标准化协会颁布的EP9-A2文件[1]和国际血液学标准化委员会文件[2]本实验室所使用的4台血细胞分析仪测定结果执行比对试验，以确保为临床疾病诊疗提供准确、可比的血液学检验数据。
1资料和方法
1.1材料
1.1.1仪器和试剂四台血细胞分析仪分别为：sysmex XE-2100i、sysmex 1800i、sysmex800i、日本光电。所用试剂均为相应厂家配套试剂，所有试剂均在有效期内使用。
1.1.2质控物均为原装配套质控物。
1.1.3抗凝管及新鲜抗凝全血[3]乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）抗凝真空采血管购自美国BD公司，抗凝新鲜全血来自健康体检者或住院患者。
1.2方法
1.2.1实验方法
1.2.1.1检验人员熟悉每一检测系统的各个实验环节，熟悉评价方案。
1.2.1.2以sysmex 1800i血细胞分析系统为比较系统，sysmex XE-2100i、sysmex800i、日本光电血细胞分析系统为实验系统。实验系统和比较系统分别测定质控物，各项指标在控后检测实验样本。
1.2.1.3每天检测1份样本，且在抽血后2小时内完成检测，连续检测30天，共检测30份样本。
1.2.2统计学分析计算每一项目在每台仪器上双份测定的均值，以sysmex 1800i为比较仪器，采用SPSS12软件建立回归方程。依据已建立的回归方程，并求出最大偏倚。
2结果
三台比对机与标准机血细胞分析仪检测结果，经统计分析，相关性显著，r2均大于0.95，说明三台仪器在5项指标上均有非常高的优拟合度。最大偏倚结果均在美国CLIA，88能力验证分析质量要求范围内，见表1。
3讨论
目前，许多医院都有数台血细胞分析仪，同一检验项目在不同仪器上的检测结果可能存在偏差，如何保证不同检测系统间检验结果的一致性、准确性及稳定性是目前医学界关注和讨论的热点[4]。不同血细胞分析仪对同一检验结果的可比性是检验质量管理的最终目标，因此，工作中应重视实验室内检测系统的比对，确定比对方案并严格操作规程。目前许多检测系统比对试验是采用统计学t检验进行方法学比对评价，两台仪器检验结果经t检验，若差异无统计学意义，即认为2个检测系统有很好的可比性。然而，这种验证方法不够规范[5]。《检测和校准实验室能力的通用要求》（GB/T15481-2000、ISO/IEC10725-1999）和《医学实验室质量和能力的专用要求》（ISO15189-GB/T22576）这2个国际标准对检验结果的可溯源性和可比性均有明确要求，强调比对试验是实现准确度溯源和患者标本检验结果可比性的重要途径。而比对试验则要参考CLSI-EP9-A2文件，用回归统计法分析不同系统的SE%和医学决定水平处的SE%。以1/2CLIA，88TEa为标准，判断检测系统的可比性即为临床可接受水平[6]。笔者严格按照CLSI‐EP9‐A2文件要求，在保证两台仪器精密度和稳定性良好的条件下，对其进行WBC、RBC、Hb、PLT、HCT5项检测结果的方法学比对和评估，以比对方法为横坐标，试验方法为纵坐标，再进行均值散点图的离群值检查、相关回归分析以及可接受性评估。本研究结果表明，四台仪器具有良好的可比性，SE%在允许范围内，本组比对试验结果可以接受。另外，在实验中要注意方法学的比较必须与临床相结合，实验时选择的数据要围绕医学决定水平，并统计各个水平的系统误差。若某项目只有一个临床决定水平，需估计在实验数据均值附近的SE%。从r值及其与1/2CLIA′88TEa比较等方面，综合评估不同仪器检测同一项目结果间的准确性和一致性，从不同角度评估检测结果更为科学、客观。各实验室熟悉仪器的技术人员应定期对不同检测系统的结果进行分析、评价，确保检验结果稳定、准确、可靠。
参考文献
[1]National Committee for Clinical Laboratory Standarda.EP9-A2：Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Sample；Approved guideline-second edition[S].Wayne，PA：NCCLS，2002.
[2]England JM，Roman RM，Van Assendeft OW，et al.Protocol for evaluation of automated blood cell counters[J].Clin Lab Haematol，1984，（1）：69-84.
[3]彭黎明，李丽娟，彭志勇，等.几种血细胞分析仪结果的比对和质控[J].中华检验医学杂志，2000，23（2）：94-97.
[4]汪艳，朱敏，张静.同型号全自动细胞分析仪的比对试验[J].国际检验医学杂志，2010，31（2）：166-167.
血小板假性减低的因素
采血不顺利：此种情况多发生在老人，儿童及体质较差的的患者身上，因采血不顺引起组织损伤，凝血因子混入血标本造成血小板集聚［1］，产生微小的目测不到的凝块。这是引起血小板假性减低最常见的原因。这些标本涂片镜检时可见大量的血小板凝聚成团。
标本放置时间：用EDTAK2作为抗凝剂已被国际血液学标本委员会认定并广泛应用。EDTAK2会使血小板形态发生变化，其外膜形成微小管。游离端向外伸展形成伪足，这些伪足缠绕在一起形成血小板可逆聚集体若在。此时测定血小板会假性减低，直方图呈锯齿状异常。但随着时间延长可逆性聚集体会破坏［2］。因此采取室温放置30分钟可以避免这种情况的血小板假性减少［3］。
血小板EDTA依赖性聚集：一些患者血标本与EDTA抗凝剂混合后其血小板会发生EDTA依赖性聚集，有报道认为血小板EDTA依赖性聚集与血小板表面抗原（IGA、TGG、IGM）的自身抗体以及患者血清中抗心磷脂抗体有关由于全细胞分析仪对凝集体的结构不能识别，一些血小板未被计数导致血小板假性减低［4］，这种凝集可见血小板直方图异常，涂片镜检可见大量血小板凝集成团。
巨大血小板导致血小板计数假性降低：病人由于某些疾病血小板体积较大，超出了血细胞分析仪测定血小板的阈值，使血小板计数假性降低。在此种情况可见血小板直方图底部分布较宽，MPV值较高。血涂片瑞氏染色后可见血小板体积较大。
血小板卫星现象：血小板卫星现象是指EDTA抗凝血中血小板黏附于白细胞周围，这是由于白细胞表面的IGG或FC片断与血小板表面的GPⅡB/ⅢA结合所致。由于一些血小板黏附于白细胞上，细胞分析仪计数血小板时未被计入导致血小板假性减少［5］。通过血涂片镜检可见大量血小板围绕在多形核白细胞的周围，形状很象卫星。这种情况较少见，有报道称加入枸橼酸盐可消除此现象。
血小板假性增高
溶血：标本溶血后红细胞和白细胞受到破坏，破碎的红白细胞碎片体积和血小板相近，都可被细胞分析仪误计为血小板，使血小板计数假性增高。
小红细胞：如果红细胞体积过小，接近血小板体积的测定范围，由于仪器只识别颗粒大小，不识别颗粒性质，误将小红细胞计成血小板，导致血小板假性升高，此种情况可见血小板直方图尾部异常，涂片镜检可见红细胞体积较小。
总之，造成血小板误差的原因很多。这要求在实际工作中不仅要严格按照操作规程操作，还要仔细审核结果，如果发现血小板数目过高或过低、直方图分布异常、计数与临床不符时都应涂片镜检并重新计数。
参考文献
1 李永红,钟步云.血液分析仪测定血小板结果偏低的原因及纠正方法［J］.临床检验杂志,2001,19（2）:112.
2 丛玉隆.当代血液分析仪与临床［M］.北京:人民卫生出版社,1997:34.
3 李胜发,程大林.血小板可逆性聚集在全血细胞分析仪中的影响［J］.临床检验杂志,2003,21（1）:37.
【关键词】 血细胞
【摘要】 目的 探讨用新鲜血代替校准物对血液细胞分析仪进行校准。 方法 以Abbott CD-3200为校准参考仪器，用新鲜血液作为校准品，校准本室Abbott CD-1700（1）、CD-1700（2）和Act.diff（Beckman Coulter）三台血细胞分析仪。 结果 三台血细胞分析仪与校准参考仪器的各检测指标相关系数（r）均>0.90;新鲜全血的质控偏差结果显示:RDW的最大CV值为2.8%，PLT的最大CV值为4.9%，MPV的最大CV值为14.6%，余各项指标的CV值均<2.0%。 结论 新鲜血可作为校准物;每天对同一实验室不同血细胞分析仪结果进行校准，是保证分析结果的准确度和精密度的有效手段和措施。
关键词 血液 血细胞计数 质量控制
在血液细胞分析仪质量控制过程中，仪器的校正是必不可少的，新仪器安装或每次维修后都应进行仪器的校正。仪器校正液是权威部门认可的标准物质，但只能用于校正同型号的仪器，不能用于其他品牌仪器的校正。血细胞分析的检测结果只有直接或间接地溯源至参考方法，才能保证结果的准确性和不同实验室检测结果的可比性 ［1］ ，最好的校正液是经ICSH推荐参考方法定值的新鲜人体血液。（1）氰化高铁血红蛋白法测定血红蛋白（HGB）;（2）微量红细胞压积法测定红细胞比容（HCT）;（3）微量计数板手工计数RBC和WBC;（4）相差显微镜计数血小板。所有器材都要经过严格校正;该校正液能适合于各种型号的仪器校准之用。但由于血细胞分析检测系统配套校准物的价格高、进口入关手续的办理较难、效期短且难以及时获得等特点，使校准物的使用难以得到推广。此外，一些血细胞分析检测系统无配套的校准物，致使用户无法进行校准。在缺乏理想的多通道血细胞分析仪的质量控制系统的情况下，使用了不同的质量控制品，包括新鲜全血、稳定血液样品、非生物代用品等。血细胞分析是临床最常用的实验室检测指标，其结果的准确性直接影响对患者的诊断和治疗。为了对本室不同的血细胞分析仪测定结果的准确性及可靠性进行分析，我们用物理和化学成分与患者相同EDTA-K 2 抗凝的新鲜全血，代替校准物对血液细胞分析仪进行校准，探讨新的校准品。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 仪器与试剂 Abbott CD-3200血细胞分析仪及进口配套试剂;Abbott CD-1700血细胞分析仪及进口配套试剂;Act.diff（Beckman Coulter）血细胞分析仪及进口配套试剂。
1.1.2 校准物 Abbott CD-3200原装进口配套CELL- DYN系列质控品及校准物，批号R0114A。
1.1.3 标本采集 临床患者新鲜静脉抗凝血2ml（EDTA-K 2 抗凝管）。
1.2 方法 用Abbott CD-3200原装进口配套CELL-DYN系列质控品及校准品对该仪器进行本底测试和高、中、低值质控重复测定5次;校准完成后，把用作标准的新鲜血连续测定10次，计算均值，并把此均值作为新鲜血的参考值;用新鲜血代替校准品对本室Abbott CD-1700（1）、CD-1700（2）和Act.diff（Beckman Coulter）三台血细胞分析仪进行校准;然后随机选取一个正常新鲜血抗凝全标本对四台血细胞分析仪进行质控，与患者标本一起测定;以Abbott CD-3200血细胞分析仪测定的5份新鲜血标本为参考，分别在其他三台分析仪上测定5次，取其均值，计算它们与被校准仪的偏差。
1.3 统计学方法 采用电脑程序化的样本配对t检验和线性回归统计学方法进行分析。
2 结果
用新鲜血代替校准品对本室Abbott CD-1700（1）、CD-1700（2）和Act.diff（Beckman Coulter）三台血细胞分析仪进行校准;随机选取一个正常新鲜血抗凝全标本对四台血细胞分析仪与患者标本一起测定，三台血细胞分析仪与Ab-bott CD-3200各参数之间的相关系数r>0.9。特别是WBC、RBC、HGB、HCT这四项参数的符合性最好，见表1。 以Abbott CD-3200血细胞分析仪测定的5份新鲜血标本为参考分别在其他三台分析仪上测定5次，计算它们与被校准仪器的偏差，结果表明:用配套校准品校准过Ab-bott CD-3200血液细胞分析仪与用新鲜血校准过的三台仪器测定5份新鲜血的结果非常接近，只有PLT和MPV的偏差比较大，但仍在可接受范围内，见表2。
表1 被校准三台血细胞分析仪相关性分析 （略）
表2 三台血细胞新鲜血测定结果与CD-3200测定值的偏差 （略）
3 讨论
血细胞分析仪由于计数结果准确，精密度高，操作简便、快速，因而发展迅速，已逐渐取代传统的手工法，并成为临床实验室的主要检测手段。由于生产血细胞仪的厂家较多，各自使用的测定原理和方法不尽相同，导致其测定结果及参考范围有所差异。另一方面，在国内的大中型医院，同一实验室使用不同厂家和型号的血细胞计数仪已成为较普遍现象，致使在同一实验室内同一标本用不同的仪器分析，出现测定值的差异，给评估和解释结果带来一定的困难，给疾病的诊断、治疗及预后带来误解和不良的影响 ［2］ 。在血液细胞分析仪质量控制过程中，仪器的校准是不可少的。所谓自动血液细胞分析仪实际上就是一台比较器，将它实测数据与校准数据进行比较，从而得出血标本的测定结果。由此可见，标准物在仪器测定结果是否准确的问题上有决定性的作用 ［3］ 。为保证血液细胞分析仪准确性，最好使用仪器生产厂家推荐的配套校准物对仪器进行校准，但由于校准物价格昂贵且有效期特别短，可只购买一台性能较好仪器的配套校准物 ［4］ 。 血细胞分析仪是精密测量仪器，对周围环境有较高的要求。温度、相对湿度、周围电磁场及室内空气中尘埃，都会干扰仪器进行血细胞计数时的电脉冲分析，特别是对血小板计数的干扰更为突出，是导致PLT、MPV偏差较大的原 因之一;我室由于情况特殊，除Abbott CD-3200血细胞分析仪在周围环境较好的住院部专门仪器房外，余三台血细胞分析仪均集中在条件较差的门诊。而且在EDTA?K 2 抗凝血中，血小板体积不稳定，随时间的延长而增大，这也是导致PLT、MPV偏差较大的主要原因。本研究结果表明:用新鲜血校准的三台血细胞分析仪与Abbott CD-3200各参数之间的相关系数r>0.90，特别是WBC、RBC、HGB、HCT这四项参数的符合性最好;说明用新鲜血校准血液细胞分析仪可取得满意结果。每天对同一实验室不同血细胞分析仪结果进行校准，是保证分析结果准确度和精密度的有效手段和措施。用配套校准物校准一台性能最佳的血细胞分析仪，再用新鲜血在这台仪器上得出参考值后去校准其他仪器，既可节省经费，又能保证实验结果的可靠性。
参考文献
1 彭明婷，申子瑜.血细胞分析溯源体系的建立及有关问题的探讨.中华检验医学杂志，2004，27（3）:132-133.
2 彭明婷，谷小林.不同方法校准血液分析仪结果比较.中华检验 医学杂志，2000，23（1）:35-37.
关键词 血细胞分析仪 检测结果 比对试验
随着检验医学的快速发展，全自动血细胞分析仪在医学实验室得到广泛使用，但由于其品牌种类多，同一实验室可同时拥有多台不同型号、不同分析原理的血细胞分析仪，导致同一血液标本在不同仪器之间测定的结果不可避免的会存在系统误差。为了解两台血细胞分析仪的性能，并为今后的室内及室间质量控制方案做准备，保证两台血细胞分析仪测定结果的准确性和可比性，根据1984年国际血液学标准化委员会（ICSH）公布的关于全自动血细胞分析仪评价的文件［1］，使用标准全血质控品及患者新鲜全血标本在不同型号的血细胞分析仪上进行了WBC、RBC、HGB、HCT、PLT等5个主要项目的检测，对所检测的结果进行比对分析，现将比对结果报告如下。
资料与方法
标本来源：每天随机抽取本院门诊和住院患者血液标本20例，空腹静脉血1.5ml，用EDTA-K2抗凝。仪器：Sysmex XS-800i型血细胞分析仪，倍肯公司AC-920型血细胞分析仪。试剂：稀释液、溶血剂、清洗液等均采用原装进口配套试剂。质控液：全血细胞质控品，由新成生物有限公司提供。
方法：实验前首先对两台仪器进行日常维护，保证仪器的工作环境及运行状态在正常状态，再用血细胞分析仪的校准液对分析仪的主要参数进行校准，然后用质控液在Sysmex XS-800i型血细胞分析仪和瑞典倍肯公司AC-920型血细胞分析仪两台血细胞分析仪上分别进行检测，并使用患者的新鲜全血样本在两台仪器上分别进行检测，使用质控液所测定的WBC、RBC、HGB、HCT、PLT等5个项目的检测结果来评价两台血细胞分析仪的批内、批间精密度。
仪器稳定性监控：每台仪器每天以全血质控物做室内质控（批间精密度），分别计算参数WBC、RBC、PLT、HGB、HCT的均值、SD和CV。
仪器精密度测定：取正常人新鲜抗凝静脉血1份，分别在每台仪器重复测定10次，计算WBC、RBC、PLT、HGB、HCT的均值，SD和CV。
结 果
精密度测定：①批内精密度：用质控液在每台血细胞分析仪上连续测定20次。两台血细胞分析仪的测定结果和批内精密度均在质控品参考范围内，经t检验，测定结果之间的差异均无统计学意义（P＞0.05）。②批间精密度：将质控液每日随机插入常规标本中在每台血细胞分析仪上检测1次，连续20天作为每台仪器的批间精密度。两台血细胞分析仪的检测结果和批间精密度均在质控品参考范围内［2］，经t检验，两台仪器检测结果差异均无统计学意义（P＞0.05）。
随机取门诊和住院患者EDTA-K2抗凝全血标本20份，同时在两台血细胞分析仪上分别检测两次取其平均值。将两台血细胞分析仪测定的同一检测项目的结果进行配对t检验（P＞0.05），说明两台仪器检测的各项检验结果间的差异无统计学意义。
讨 论
血红蛋白含量的测定是在被稀释的血液中加入溶血剂后，使红细胞释放出血红蛋白，后者与溶血剂中有关成分结合形成血红蛋白衍生物，进入血红蛋白测试系统，在特定波长（一般在530～550nm）下比色，吸光度的变化与液体中Hb含量成比例，仪器便可显示Hb浓度。不同系列的血液分析仪配套溶血剂配方不同，形成的血红蛋白衍生物也不同，但大多数的最大吸收光谱接近540nm。近年来许多高档的分析仪上采用了激光散射法进行单个血红细胞血红蛋白的分析，以尽量减少高WBC、乳糜血、高胆红素等对HBG比色的影响。
Sysmex XS-800i型血细胞分析仪利用光检测器模块应用流式细胞计数法进行白细胞分析和五分类分析，红细胞检测器利用流体聚焦法进行红细胞和血小板计数，血红蛋白检测器利用SLS血红蛋白检测法来分析血红蛋白。分析模式可采用手动模式和毛细管模式，为保证结果的准确性，定期对仪器进行校准，并且每天用全血质控品进行室内质量控制分析，定期参加室间质量评价活动，通过长期使用发现Sysmex XS-800i型血细胞分析仪的检测结果重复性好，准确性高，具备完善的质量控制程序，仪器性能优良，室间质量评价成绩优良，可以为临床提供准确、快速、及时的血细胞分析检测数据。
AC-920型血细胞分析仪利用电阻抗法进行白细胞、红细胞和血小板的检测，用光吸收法进行血红蛋白的检测，可采用预稀释模式和抗凝全血两种模式进行检测，可对白细胞进行三分类分析，尤其对于不易采血的婴幼儿可采取末梢血稀释后进行检测，用血量少，非常方便。
对于同一实验室的不同类型的血细胞分析仪，定期进行比对试验是保证其检测结果准确性的重要手段，正确评价和合理使用血细胞分析仪，对提高临床检验质量和工作效率起着积极作用。
参考文献
【关键词】 血细胞分析仪;血小板检测异常;影响因素
作者单位：030012 山西省人民医院检验科 血细胞分析仪［1］由于具有较为良好的重复性、准确性、快速方便特性，使临床检验工作得到大幅度上升，显著提高了工作效率；由于血小板体积较小,容易受到干扰发生粘附、聚集和变性等情况，使得血小板检测难以准确计数，其检测结果变化、且很不稳定，计数结果与实际值出现显著的差异，为了能够提高血细胞分析仪对血小板检测的精确度，我们对血细胞分析仪血小板检测异常影响因素进行分析，具体报告如下。
1 资料与方法
11 仪器 血细胞分析仪采取Sysmex KX21 型(日产)及相应配套试剂；显微镜使用CX31光学显微镜(日本奥林巴斯公司生产)。
12 检测方法 ①血细胞分析仪检测：采静脉血20 ml于EDTAK2真空抗凝管，充分摇匀上机进行检测。②显微镜检测：采取手工显微镜检测计数按照“全国临床检验操作规程”(草酸铵法: 血液20 μl加入038 ml血小板稀释液，进行充分混匀、充液、进行镜检)对每个样本进行3次计数, 取血小板计数的平均值；取经抗凝血样进行血片推制,采取瑞士染色，推制血膜符合标准具有显著的舌状, 头、体、尾,经瑞氏染色,后在显微镜下观察血小板的大小、形态、有无凝集, 以及血片中白细胞及红细胞的大小、形态和碎片。③观察内容：对4862标本进行血细胞分析仪检测发现412例标本出现血小板检测异常，并进行手工显微镜检测，血小板无异常，对血细胞分析仪检测血小板发生异常情况影响因素进行总结。
2 结果
4862标本进行血细胞分析仪检测发现412例标本出现血小板检测异常，并进行手工显微镜检测，血小板无异常，对血细胞分析仪检测血小板发生异常情况影响因素进行总结，影响因素具有较为多的情况，具体见表1。
表1 412例检测血小板发生异常影响因素(例,%)
3 讨论
在外周血细胞中血小板是体积最小的细胞，它具有较多的功能的细胞，主要参与机体自行止血整个过程，在内外凝血系统中具有较为重要的作用，由于其具有特性容易被破坏和发生附、聚集、变性等其他因素的干扰。
采血因素占影响因素中很大份额，老人、儿童、严重营养不良及体质较差患者由于静脉血管不明显常常发生采血困难，经过多次反复穿刺使得局部组织发生水肿及皮下出血，引起血小板发生聚集［2］、使得血小板消耗以及引起的组织凝血因子进入采集的血样标本，形成微小凝血块，进一步消耗血小板，是导致血细胞分析仪产生的结果偏低最长见到的因素。
溶血剂在血细胞分析仪试剂中非常重要，可以对血样标本中红细胞进行破坏达到溶解效果［3］，并且使白细胞体积变化更有规律性，便于血细胞分析仪检测，但溶血不充分，对红细胞碎片不能够彻底进行冲洗，使得血细胞分析仪检测出现假阳性，导致对血小板计数值假性增高。
EDTA 抗凝是临床上采血最常用的抗凝剂，文献报道在室温条件下EDTA 抗凝血, 血小板会出现EDTA 依赖性凝集［4］，发生血小板EDTA 依赖性凝集可能与血清中抗心磷脂抗体的滴度，血小板表面相关抗原的自身抗体有关，发生EDTA 依赖性凝集后血细胞分析仪不能够对凝集体的结构确认，导致血小板计数值假性减少。
经混合后的标本放置较长时间，由于溶解试剂具有渗透压，对血小板具有破坏作用，血小板的体积随时间的延长而发生变化，血小板的数量随时间的延长而降低。
血液分析仪是利用电阻抗原理计数血小板［5］, 血小板的数量变化与体积变化密切相关；红细胞和血小板的计数是在同一通道中进行, 它们之间仅以体积大小来区别, 因此, 血小板的计数易受小红细胞数量或红细胞碎片的影响［6］；大体积血小板导致血小板计数减少，由于分析仪不能对巨大血小板进行识别, 将大体积血小板误计入红细胞, 而导致血小板假性减少。
参 考 文 献
［1］ 李辉.血细胞分析仪对血小板的影响因素.中华临床医学研究杂志，2005，11(17) :2557.
［2］ 鲁力浅谈血细胞分析仪计数血小板的影响因素及其质量控制.现代医药卫生，2008，24(5):751.
［3］ 李莉玲探讨血细胞分析仪测量血小板异常的因素. 实用医技杂志，2008，15(18):2370.
［4］ 陈梦珍 血细胞分析仪测定血小板影响因素的探讨 江西医学学报, 2005, 23(3):243 244.
关键词：检验科 血细胞分析仪 管理对策
在现代化的医院中，医疗仪器设备不仅是开展医疗、教学、科研的必备条件，而且是提高医疗质量的物质基础和先决条件，随着医学科学的飞速发展，现代化的检测技术大量运用于医学检验工作中，血细胞分析仪最近几年来已被广泛运用于医学检验技术中。检验科全面质量管理体系的建立是保证工作质量，提高检测水平的关键，是检验科全面管理的需要，是实际工作的需要。血细胞分析仪在使用过程中，我们坚持树立全面质量管理的观念，认真做好质量控制和仪器的维护与保养工作，使用效果非常满意。由于长时间的使用和管理血细胞分析仪，我们积累了较为丰富的经验，为此，下面谈一点我们粗浅的见解。
1 树立全面质量管理的观念
纵观医学检验事业的发展，核心问题就是质量管理的问题，质量管理是医学检验之本，没有检验结果的高质量就谈不上学术的高水平，没有准确可靠的检验结果作为依据，临床诊断治疗工作就受到很大的制约，而且检验质量又是检验科的核心问题，质量得不到保证，再先进的仪器和方法也得不到可信任的结果[1]。围绕检验质量这一核心工作，首先，我们应该树立全面质量管理的观念，所谓全面质量管理是指在实验的过程中所有影响实验结果的因素和环节都要处于受控的状态，保证每一个环节的协调统一，确保实验结果真实可靠[2]，我们把这一过程划分为检验前的质量管理工作、检验过程中的质量管理工作和检验后的质量管理工作。
2 检验前的质量管理工作
检验前阶段是检验过程的第一阶段，也是整个检验过程中很重要但又容易被忽略的环节，包括从临床医师开出的检验申请单开始，检验单的填写，患者准备，标本采集，标本储存，运送直至接收等几个具体环节，而这些环节都是由医生和护士等在实验室外部完成的，我们需要与其加强沟通，协作并监督他们完成这一过程的工作，针对每个环节的质量保证，要求的具体做法如下。
2.1 检验申请的内容要求
清晰准确，并有准确的临床信息，包括患者姓名、性别、年龄、住院号、门诊号、有条件的话我们建议使用ID号，申请人姓名、明确的检验项目，标本采集时间、采集的部位等内容，并要求检验工作人员审查确保其完整。
2.2 患者的准备
患者的准备很重要，由于患者自身的差异以及在诊疗过程中的动态影响，必须要求其规范标本采集前的一切行为，我们的要求是：患者在标本采集前应处于情绪稳定的平静状态，避免剧烈的运动以及紧张、恐惧心理，并主张在清晨固定的时间采集，最好空腹采血，匆忙起床等情况下应嘱其先休息后再采集，采血前应该禁烟、禁酒等，最好禁食。
2.3 正确采集标本
首先确保采集管的干燥清洁，并有EDTA-K2抗凝剂，1ml血液要求10～15μl抗凝剂，建议统一采用坐姿采血，并保证采血过程合乎规范，标本采集结束后轻轻混匀，有相关文献报道，在大量静脉滴注的患者存在血液稀释使某些项目结果较真实值偏低[3]，应避免在输血输液部位采集，尽可能在输血输液等操作之前或有效休息后采集，尽可能排除可能造成标本溶血的操作，熟练掌握穿刺术，确保操作合乎规范，例如穿刺次数、时间等因素，采集完成后要在标本管上标记采样时间及患者信息。
2.4 标本的储存、运送及接收
标本采集后应该存放于专用密闭容器内，由专人立即送至检验科，接收标本时要严格观察标本是否符合要求，包括标本类型与申请类型统一，标本外观完好情况，病人信息完整情况等。
3 加强检验科与临床科室交流
检验工作和临床是密切相关的，许多工作是需要双方有效合作，通过有效合作可以对检验前运行情况进行了解，对检验结果进行有效分析，并应用于临床，我们建议作好以下3个方面的工作：第一，加强双方的沟通交流，互相配合。第二，在临床医护人员中进行检验知识培训，有效督促其标本采集等检验前工作合理进行，使其对影响因素进行关注，如清楚剧烈运动、药物等对检验结果的影响，对病人执行情况进行有效监督，确保前期工作无误。第三，提高临床医护人员标本采集技术，了解标本容器质量，抗凝剂种类以及操作对结果的影响，保证标本合格。总之，加强与临床交流是提高检验医学水平的重要环节，检验工作质量取决于标本留取送检，到报告发出每个细节，严格遵守以上环节，构筑一个完整质量管理体系，才能保证实验的科学性、准确性，为病患的治疗提供有效诊疗依据。
4 医学检验血细胞分析仪操作的规范化、标准化整个检验过程
从申请单开出到报告单发出，是一个多人参与的过程，影响因素较多，严格遵守检验工作流程是确保检验质量的重要举措。我们建议使用条形码管理，通过条形码管理标本以减少人为误差，以适应新形势下的医院管理模式。（1）抗凝剂使用，EDTA-K2，1ml血液需要加10～15μl抗凝剂。（2）标本采集操作，坐姿采集标本，并严格保证采集时间限制。（3）标本有效存放时间标本采集后，尽可能快的在1h内检测完毕，时间越短越好。（4）试剂的质量，保证试剂特别是溶血剂的使用很重要，建议使用进口配套试剂。（5）仪器的校准，仪器使用后必须进行校准，建议使用进口配套校准物定期校准。（6）室内质控与室间质评的分析，持每天质量控制的结果进行，出现失控要及时查找原因，采取措施进行纠正，积极参与室间质评活动，对失控的项目要进行分析，查找原因，及时纠正。（7）仪器检测后，对检测结果有异常信息警示的，要进行手工镜检复查。
参考文献：
[1]《应重视与临床交流》，张美和、宋文琪，《中华检验杂志》，2004年第27期。
为了解我室几台血细胞分析仪的性能，并为今后的室内及室间质量控制方案做准备，笔者采用新鲜血对本室几台血细胞分析仪做了比对实验，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂：血细胞分析仪共3台，其中Pentra-60 1台
（ABX公司），ACT-diff2 1台（BECKMAN公司），F-820 1台（Sysmex公司），所有仪器都使用配套试剂，全血质控物（四川迈克公司批号090515F）。
1.2 标本收集
1.2.1 每天随机选取临床病人新鲜静脉抗凝血小板（EDTA-K2抗凝）。
1.2.2 选取我院体检正常者新鲜抗凝血标本（EDTA-K2抗凝）。
1.3 方法
1.3.1 仪器稳定性监控：每台仪器每日以全血质控物做室内质控（批间精密度），并依据室内质控做随程监控。分别计算参数WBC、RBC、PLT、HGB、HCT的均值、SD和CV。
1.3.2 仪器精密度测定：取正常人新鲜抗凝静脉血1份，分别在每台仪器重复测定10次，计算WBC、RBC、PLT、HGB、HCT的均值，SD和CV。
1.3.3 比对仪器的确定：根据我室的具体情况，依据室内质控，选定Pentra-60（ABX）为参考比对仪器，其他2台为测试仪器。
1.3.4 比对实验：每日用2.1所采集的标本4份，在3台仪器上分别进行测试，连续26天，比较测试仪器和参考比对仪器的测定结果，包括WBC、RBC、PLT、HGB、HCT。
1.4 统计处理
1.4.1 对各个仪器与参考比仪器结果做回归和相关分析，求其相关系数r及回归方程y=bx+a，然后根据回归方程求x在允许误差内的取值范围，即有效检测范围，查阅相关文献后，参考美国CLIA’88能力比对检验质量要求和国际血液学标准化委员会及NCCLS制定的标准设定允许误差为：WBC：±5%，RBC：±2%，PLT：±9%，HGB：2%，HCT：±2%。
1.4.2 以参考范围为界限（RBC为3.5～5.5×109/L，WBC为4～10×109/L，HGB为110～160 g/L，HCT为0.37～0.55L/L,PLT为100～300×109/L）[2]，低于参考值为低值，高于正常参考范围为高值，在参考范围内为中间值，以参考比对仪器高中低值区段均值为测定值，计算各测试仪器相对参考比对仪器的变异百分率%=│测定值-正确值│正确值×100。
2 结果
2.1 从各仪器试验期间室内质控结果可知CV%不大于5%，见表1，显示各仪器在实验期间性能稳定。
2.2 各仪器分析项目的批间精密度都在厂家规范范围内，见表2。
2.3 比对仪器与其他2台仪器相关分析见表3，回归方程经方差分析推断直线关系成立，P>0.05。
2.4 根据回归方程Y=bx+a和设定的允许误差范围计算的有效测试范围见表4。
2.5 两台测试仪器与对比仪器测定值间的变异百分率见表5。
3 讨论
3.1 从各比对项目来看，我室ACT和F820两台测试仪器中，ACT和比对仪器有较好的符合性，一般在临床应用上可以相互替换，但是在某些较低值时，见表4，WBC
3.2 F820的实验结果就不尽人意了，可能是年代久远的缘故（使用了8年），WBC在高于5.39×109/L时结果就会超过允许误差，分区段计算的结果，见表5，也显示在高值时的变异百分率8.87也超过5%，此外HCT和PLT也存在着较大偏差，需检测一下F820的WBC、PLT、HCT的检测系统，其中HCT有一定的影响，PLT在
3.3 在做相关分析时，相关系数R均大于0.99，见表3，但是利用回归方程计算有效检测范围和高中低区段计算时仍有超出允许误差的现象出现，此前有相关报道只利用相关系数来判定两仪器的测定结果是否可以互换使用，这是不行的。所以在此次实验中选用了这种方法来比较结果，可能会更准确一些。
【关键词】全血细胞分析仪；精密度；线性；携带污染率；稳定性
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2012）12-0037-02
1.1 材料 日本希森美康公司生产的SYSMEX XS-800i五分类自动血细胞分析仪；EDTA-K2抗凝管（瑞奇公司）；四川迈克公司的全血质控品（批号为061214B）；静脉采集的新鲜全血标本。
1.2 方法
1.2.1 精密度试验 取CBC质控、患者（高值、低值）健康人全血各一份在仪器上连续测定11次。去除第一个结果后，计算WBC的SD、CV值。
1.2.2 线性 取2个WBC绝对数大于25×109/L的标本，依次用稀释液稀释混匀成80%、、70%、50%、30%、10%的标本，然后上机检测WBC2次，取均值。
1.2.3 携带污染率 取高值（WBC绝对数大于25×109/L）和低值样本（WBC绝对数小于10×109/L）各一份，在自动进样模式下，先测定高值3次（H1、H2、H3），再测定3次低次（L1、L2、L3）；再在手动进样模式下，同样先测定高值3次（H1、H2、H3），再测定3次低次（L1、L2、L3）。按公式：CV%=[（L1-L3）/（H3-L3）]×100计算携带污染率。比较2种模式下WBC%、WBC#的携带污染率的差异。
1.2.4 稳定性 取6个标本，包括2个正常标本、2个高值标本（WBC绝对数大于25×109/L）和2个低值样本（WBC绝对数小于10×109/L），上机检测，然后在24h后，48h后，72h时后再分别上机检测WBC两次，取平均值，计算各组数据的变异系数CV值。
2 结果
2.1 精密度 患者标本重复检测12次各参数结果的SD值和CV值见表1。
从上表可以看出各组数据的CV值均小于2%，表明XS-800I 仪器仪器在检测WBC各参数的重复性良好。
2.2 线性 两个样本分别检测两次的WBC#平均值结果见表2。
经计算两个样本的线性回归系数r=0.99，表明仪器的线性良好。
2.3 携带污染率 根据公式CV%=[（L1-L3）/（H3-L3）]×100计算携带污染率
全血模式下WBC#CV%=0.68%
全血模式下WBC%CV%=2.7%
从以上数据表明XS-800IWBC携带污染率CV值均小于3%，结果良好。
2.4 稳定性
高、低及正常值标本分别在0h，24h，48h，72h所测定的WBC值的CV，见表3
标本在72小时内结果CV%小于2%，结果良好
综上所述，XS-800i检验结果的精密度，线性、携带污染、稳定性好，结果稳定可靠。
参考文献：
[1] 丛玉隆.血液分析仪进展及临床应用.全军临床检验专修班实用教材，1989，49.
