时间：2023-02-27 11:14:55
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尊敬的各位评委、各位老师、亲爱的同学们：
大家好！很高兴和大家相聚在这个美丽的一天，也非常感谢大家给我这个上台的机会，谢谢！我今天演讲的题目是。
天平是衡量权利义务的信物；法槌是惩恶扬善的利器；法官是社会主义的保障；法律是天下之公器。
“法律，是由立法机关制定、颁布的强制各种行为的规律的总称。”这是上对法律的解释，但它对于我来说，那是太抽象太模糊了。是儿时的游戏让我懂得了规则的制订和遵守；是让我接触了真正的法律条文；是学校的普法教育让我学到了许多法律常识，渐渐地我知道了学法，守法的重要性。
其实，法律无处不在，在社会、在学校，就在我身边。
人们常说，家庭是我们的第一课堂，父母是我们的第一任老师。记得班里曾做过一次试验。老师问：如果有人欺负你，你怎么办？竟然有半数以上的同学回答：打他，跟他拼了。老师接着问：为什么？那些同学便说：“爸爸妈妈告诉我，人在社会上要厉害一些，不能受窝囊气。”我庆幸，我没有生活在那样的家庭里，我庆幸，爸爸妈妈从没用这样不正确的思想教育我。但是，那些同龄人的话仍让我震惊。大人们是怎样言传身教的啊！难怪因早恋而怀孕的少年犯刘美娜对着她的父亲大声指责道：“你成天在家看那些，你有什么资格管我！”家庭教育的影响，难道还不足以引以为戒吗？
有一天，我到四中附近的一个商店买东西，看到一个初一模样的学生也在，因为个子比较小。过了一会儿，来了几个稍大点儿的学生，看到那个小个子学生，一起围上去。其中一个长头发的男生伸出一只手拍他的肩：“哎，小弟弟，请客吧！”那个学生看了他们一眼，露出害怕又为难的表情，好像有想：“如果我不请，他们一定会打我的，唉，好汉不吃眼前亏，还是乖一点吧！他不情愿的掏出钱给他们买了一大堆好吃的，然后那几个大点儿的学生扬长而去。有第一回就有第二回，连续几天，那几个学生都在找那个小个子混吃混喝，把他当作取之不尽、用之不竭的钱包。我知道事情发展不妙，就把这事告诉给四中贾校长，最后经过各方努力，那个小个子终于脱离了他们的魔爪。
人们都说法律无情，难道法律真的无情吗？有人说，东边日出西边雨，。某位女老师，在感情方面曾经与一位有妇之夫发生纠葛。某日再碰面时，俩人在街道上发生争执，男方剥掉女方的衣服，当众对其污辱。事发后，女老师多方讨告，却因证据不足，未曾受理。女老师备受精神压力。最后，女老师想到了刑事诉讼，刑事法庭经过多方走访，调查和取证，但仍未能拿出充分证据。后法官多次对男方进行教育，法律感化，最后男方当事人同意赔偿一万元。女老师才得以保护。从此看出，法律的终极目标是人性关怀，法外有情亦是法律应有之义。
虽然，法律公正、严明，但青少年的犯罪越来越多。我国未成年人的犯罪已成为全部刑事案件的10﹪，这是一个多么痛心的数据呀！
这样的案例让人触目惊心！同样也是皆是。某校的宿舍墙上挂着“星级文明宿舍”的牌子，然而马某因被诬陷偷东西而被十多名同校学生打残后至死的暴力事件就发生在这样的屋檐下。16岁的妈妈在洗漱室里生子后，便将其子顺楼抛下。12岁的赵某向一女童索要方便面遭拒绝后，便将她推入水池溺死。高一新生杨某，只因与另一名同学发生口角，就纠集校外两名男子用棒子打伤该同学，而拿出3万多元的医药费。事后他竟还无知的说：“是他先骂我的，难道我错了吗？” 无数事实说明自身的道德品质和法制观念起着决定性的作用。
类似事件举不胜举，数不胜数。小至抢劫行凶，大到贪污受贿。哥儿们义气，为了给同班同学出口气，放学时与其他班同学大打出手。行凶冒险抢劫，最后断送自己的一生；有的人放学后比武论高低，打得不是你死就是我活。一位，把自己打扮得花枝招展的，用自己的青春骗取钱财享乐……可悲的享受主义，拜金主义。社会上的一切污垢、阴暗，在不断侵蚀着稚嫩的心灵，缔造着一件件人生的惨剧。
法律对于我们学生来说，还只有模糊的印象，有时候违犯小车了还毫不知情。那些犯罪的人为什么犯了罪，罪在哪里都不知道，这是对小车的意识太小看了，所以走上违法的道路。 我们青少年更要对小车有强烈的激情国。首先要懂法、知法、守法，还要爱护法，多看一些小车方面的书籍道路，为自己的人生道路撑上一把健康的雨伞。而道德又是一双手，推开封锁在心里的窗；道德是一扇窗，窗外是美好的天空；道德是一片天空，它孕育着无数纯洁的心灵。
在日常生活中处处都离不开法律和道德。对于我们青少年来说，我们不需要做这些大事，我们先要从小事做起，从一点一滴做起。在拥挤的公车上，我们让一让座位；在红灯面前，我们停一停脚步；在道路两旁，我们弯腰捡起一片废纸；在家里，我们替父母分担一些烦恼。这都是遵守法律和道德表现，如果我们每个人都做到的话，那么，中国就会变的更美好。现代社会交通发达了，车辆也很多，如果没有法律是很难想象的，来往的车辆肯定要碰头发生爆炸事故。所以，有交通规则，交通井然有序，来往的车辆通过绿灯行，穿梭有序，畅通无阻。交通很少出事。相反，如果没有交通规则，人们不遵守交通规则，南来北往，东行西去的各做各的，各不相让，汽车、自行车、小车及行人挤成一团，那么，谁也别想顺利的通过。所以，有交通规则还是有好处，社会生活离不开法律。
我国有句古话“没有规矩不成方圆”。就是说，无论做什么事都要有一个规矩否则就什么也做不成。对国家，对社会来说这规矩就是法。作为国家公民和社会成员，人人都要遵守法律，维护法律。我们小学生作为国家的小公民，社会的小主人，同样应该学法、懂法、守法，以保护我们自己的权益，不损害他人和社会的利益。只有从小养成遵纪守法的好习惯长大后才能成为对社会有用的遵纪守法的好公民。
我们国家的希望，今天的青少年是明天的建设者。现在不仅要学好知识，练好身体，养成良好的习惯，也要树立法律意识和养成良好德道德修养。懂法、知法、守法，法律是我们健康成长的保护神，也是做为一个小公民必须遵守的行为准则，我们每个人都要认真学法，做一个遵纪守法的好孩子。
小学科学教师开学演讲稿一
金秋时节，丹桂飘香，经过一个愉快的暑假，今天，我们迎来了新的学年，美丽的校园因为你们的到来而更加充满生机。
借此学年开学典礼之际，我代表全校老师，欢迎一年级的新同学加入我们叉干小学这个温暖的大家庭，欢迎其他同学重返校园。
新学期，对于同学们来说，就像是你们手中刚刚拿到的新书一样，散发着油墨的清香，崭新崭新的。虽然现在还不知道这本奇特的书里面讲述什么神奇有趣的故事，但在那整洁的封面上，却已经写满了我们老师对你们的祝福。为了帮助你们读好这本神秘而又奇特的书，开学前，学校里的老师们一直在做着精心的准备。就像以往一样，我们每一位老师都怀着巨大的企盼期待着你们健康地成长希望你们长得更高、变得更懂事。
叉干小学是我们共同的家，在这个家中，我们每位老师都有责任来共同管理好这个由四面八方赶来的你们所组成的特殊大家庭。一句富有哲理的名言说过：“爱是教育的前提，爱是教师的天职。”所以作为叉干小学的每位教师都会努力做到关心爱护每一位学生，在今后的工作中，我们会一如既往地把人民教师对学生的爱均匀地洒向每位学生的心田!努力做到爱与严的结合。对学生严格要求，以严导其行，以爱温其心，不断改进教学方法，力争在新的学期里取得更大的成绩。为建设一流的校风，一流的学风，一流的班风，作出努力。亲爱的同学们，在这样一个充满朝气的新学期里，希望你们与我们的学校共同成长进步，用我们的实际行动来证明吧!
最后祝愿同学们在新的学期里有新的目标、新的发展、新的收获。最后，祝同学们学习进步，心想事成!谢谢!
小学科学教师开学演讲稿二
老师们、同学们：
经过近三个星期的休整，大家又回到安静的校园，虽然此时天气还有点寒冷，但有3700多年轻的心一起跳动，学校顿时温暖了起来。
上学期放假的时候，我与高三一位同学交谈了一次，她的成绩波动特别大，有时可能上一本，有时连二本都不能上，当我问起她对这次xx一调考试的自我评价时，她说感觉自己好失败哟。她接着说，自己做了那么多题，每天都是好晚才睡觉，但最终才考了这个分数，真的很郁闷。
其实，我们每一个人都不希望自己的付出没有收成，更不希望自己失败。在我们的文化传统中有一种英雄崇拜的情结，“成者为王，败者为寇”，成功者，人们往往顶礼膜拜，我们都羡慕英雄。但是，我们自己为什么就不能成为英雄呢?如果不能成为别人的英雄，那我们为什么不成为自己的英雄?战胜自己就是自己的英雄。只有成为自己的英雄才能最终成就人生，成为别人的英雄。
大家知道，XX年1月10日，国际足联年度颁奖典礼在瑞士隆重举行。在最具分量的fifa金球奖评选中，阿根廷球星梅西击败哈维和c罗，夺得XX年度fifa金球奖。算上XX年的世界足球先生(即fifa金球奖前身)和XX年“金球奖”称号，梅西已经连续3年获得这一称号。然而，大家可能还没有忘记，就在前不久，阿根廷意外的0：1输给委内瑞拉，爆出世界杯美洲区开赛以来的最大冷门，这也是阿根廷队历史上首次输给委内瑞拉。赛后，阿根廷国内开始对梅西进行大肆抨击，甚至很多球迷认为梅西踢得太臭导致球队输球。对于这些批评，梅西表示球迷的这番言论让自己很委屈。但是只要到了赛场，为球队拼到最后一刻的依然是梅西，梅西有一颗永不言败的心，他战胜了自己，成为了自己的英雄，也成了别人的英雄。最终才有机会获得连续3年的金球奖。还有加拿大唯一连任两届的让.克雷蒂安，小时候的他，相貌丑陋，说话口吃，残疾导致他左脸局部麻痹，嘴巴总是歪向一边，还有一只耳朵失聪。
他为矫正自己的口吃，模仿古代一位有名的演说家，嘴里含着石子练习讲话。他母亲看到儿子的嘴巴被磨烂，特别心疼，而懂事的儿子却说道：“每一只美丽的蝴蝶，都是自己冲出束缚它的茧才变成的，我要做一只美丽的蝴蝶!”1993年10月，他参加加拿大竞选时提出“使国家和人民变成一只美丽蝴蝶”的口号，让他以高票当选。1997年，他再次获胜连任。他战胜了自己，他成了自己的英雄，也最终成了别人的英雄!
霍金18岁考取牛津大学，21岁却换上严重的萎缩性脊髓硬化症，医生说他最多能活两年半，可他以顽强的毅力与病魔作斗争，几个两年半过去了，他还坚强的活着。脚不行了，手不行了，嘴也不行了，他干什么都要别人或机器帮忙，但他仍旧没有气馁，他用他的大脑不断努力，他是我们心中的英雄，但，他首先是自己的英雄。眼瞎的弥尔顿、耳聋的贝多芬、哑巴帕格尼尼又何尝不是战胜自己成为自己的英雄?
要想成为自己的英雄，必须要自信，必须要付出，必须要努力，必须要经受得了挫折，必须要有坚韧的毅力，必须要有一往无前的勇气。同学们，一次考试的不利，一次小小的失利，老师或者家长的一次批评，同学的一句不恰当的话都不能承受，还何谈成为英雄?在年轻人的词典里永远也不能有失败。我喜欢孙楠演唱的那首《做自己的英雄》，我希望大家也能喜欢。“我不怕身上的痛/我眼中有泪光闪动
我不怕迎面的风/一步一步向着前方的梦
我喜欢平凡的面孔/我看到自己灿烂的笑容
我喜欢向天空呐喊/我知道我一定会与众不同
做自己的英雄/在我心中有热情涌动/我的舞台我自己来掌控
做自己的英雄/当你们的双手在我身后舞动/我一定会站在最高峰”
小学科学教师开学演讲稿三
尊敬的老师们，亲爱的同学们：
大家上午好!
踏着轻快地步伐，迎着灿烂的阳光，我们又回到了美丽的校园，开始了新学期的学习与生活。
回首过去的一学期，学校在主管部门的关心和支持下，全体师生同心协力，锐意进取，不断进步，我们在校园建设、办学质量、办学特色等方面均有进步，得到了社会与家长的好评，教育教学、文艺等工作均取得了不俗的成绩，这是我们全体师生不懈努力的结果，更是对我们全体教师辛勤耕耘的褒奖。在此，我向大家表示衷心的感谢和崇高的敬意!
回首过去的一学期，我们的教学成绩各有千秋，比如：今年考上普通高中的学生人数由上年的28人上升到37人;七年级政治在***老师和***老师的努力下，平均分位列全市第一;七年级语文在***老师、***老师和***老师的努力下，平均分位列全市第三;七年级数学在***老师、***老师和***老师的努力下，平均分位列全市第三，其中183班的***同学考得了100分的满分;七年级地理在***老师和***老师的努力下，平均分位列全市第三;八年级语文在***老师、***老师和许艳云老师的努力下，平均分位列全市第三。
过去一年的工作，离不开全体教职工的共同努力，离不开各位科任教师的辛苦工作，也离不开所有班主任的苦口婆心，更离不开全体同学们的努力。
同学们，学生时代，是人生的黄金时代，而起始年级又是我们成长阶段的重要转折点，“良好的开端是成功的一半”，因此成功地迈好这一步尤为重要。一寸光阴一寸金，寸金难买寸光阴。同学们要珍惜这美好时光，勤奋学习，莫等闲，白了少年头，空悲切!
七年级的同学们，走进**中学，你就走进了团结和友爱，也走进了拼搏和奋斗。愿我们的每一位新同学，从开学的第一天起就百尺竿头更进一步。我相信：经过你们坚持不懈的努力和奋斗，就一定能拥有最后的收获和喜悦。
九年级的同学们，此时的你们，汇集了老师们更多的目光，倾注了家长更多的心血，你们将担负着希望，开始最后的冲刺，人生能有几回搏，这是你们人生的关键一搏。九年级的同学们，你们已经为实现你们的理想付出了宝贵的时间和心血，我希望你们在最关键的一年里，制定好计划，明确目标、增强信心、虚心求教、刻苦学习，科学安排时间，坚持不懈地努力下去，跨进理想的学府!
八年级的同学们，更要珍惜每一天，从今天起，你们已经来到了知识高峰的半山腰。是再接再厉，勇攀高峰;还是心满意足，畏难却步;你们每一个人都会受到一次次的考验。尤其是面对前进征途中的困难和挫折要经得起风吹浪打。“有信心的人，可以化渺小为伟大，化平庸为神奇”。愿你们都能做一个珍惜时间，再接再厉，勇攀高峰的人。要知道：奋力攀登，绝顶风光无限美;固步自封，前功尽弃徒伤悲。
新的学期，新的开始，带来了新的挑战，也孕育新的希望与憧憬，面对这一更为紧张和富有挑战的学习与工作，我们每一位教师、学生都应站在新的起跑线上认真审视自己，以满腔的热情投入到新学年的工作与学习中去，为实现自身的目标而奋斗、拼搏!在此，我祝愿并相信我们每一位师生都能以自己的勤奋与智慧书写新学年学习与工作的满意答卷。
“潜龙在渊，蓄势腾飞”——我们坚信：有着追求无限光荣与梦想的**中学的人必将迎来更加美好的明天。
有这么一句话：一个人从摇篮到坟墓，这过程时刻都离不开法律。没错，法律和我们每个人的工作于生活息息相关，无论是个人的衣食住行、还是生老病死，或是企业的生产运营、国家的政治经济、社会生活，都离不开法律。从长远和整体的角度来讲，法律给整个社会带来了毋庸置疑的益处。正如交通公益广告中说的那样：“没有红灯的制约，便没有绿灯的畅通。”
法律是一部生活的百科全书，告诉我们处世之方、待人接物之法、安身立命之道。作为一个普通的公民，唯有知法才能守法，唯有让守法成为一种习惯，社会才能更和谐，人生才能更平安！
法律首先应该被理解为是一个公约，一个关于人们在共同生活中如何进行合作、如何解决纠纷、如何建立秩序的社会公约，是一个规定公民可以做什么和不能做什么的社会公约。既然任何人都不得以任何理由废法行事，那么，即使为了追求良好的目的，即使位高权重，也不能违反法律。
我们敬爱的是守法的典范。有一次，总理去开会，在路上，司机违反了交通规则，交警批评司机却耽误了总理开会的时间。同车去的干部想和交警交涉，总理严厉制止说：“这怎么行？交通规则是政府颁布的，政府总理应该带头遵守。总理不遵守，就是带头破坏制度”。直到交警放行，总理一行才离开。守法必先严于自律，这是一种行为操守，更是一种道德修养。
许衡是我国古代著名的理学家。宋元之际，世道纷乱，许衡外出，因天气炎热，口渴难忍。路边恰有梨树，行人都去摘梨，唯有许衡不摘。有人问“何不摘梨解渴？”他回答：“不是自己的梨，哪能去摘？”那人说：“世道这样乱，管他是谁的梨呢。”许衡正色道：“梨虽无主，我心有主。”
我们国家多年的普法教育取得了累累硕果，原来很多对法律一无所知的人，如今都能运用法律来寻求一个说法，就像电影《秋菊打官司》里的秋菊一样，普通人法律意识的觉醒当然值得欣喜，但让守法成为一种习惯，确实还有相当漫长的道路要走。
讲奉献、有作为是党员的责任担当。“天行健，君子以自强不息”、“士不可以不弘毅，任重而道远”、“为官避事平生耻”，高度概括了担当精神。。当前，在国家各级机关中存在着不讲责任担的“为官不为”现象，由过去的“门难进”、“脸难看”、“事难办”变成了现在的“门好进”、“脸好看”、“事不办”消极不作为的懒政、怠政。
做合格党员要带头讲奉献、有作为，牢固树立核心意识、大局意识、责任意识、看齐意识，不辱使命。具体来说，讲奉献、有作为，必须要有全身心投入的精神、追求完美的“工匠精神”、废寝忘食吃苦耐劳的奉献精神。只有这样，讲奉献、有作为在工作中能够得到践行和升华，心系党、心系国家、心系群众。
讲奉献、有作为，要做到敢吃亏、能吃苦、会吃气。雷锋无私奉献，乐于吃亏，有人说他是“傻子”。他把帮助别人当作人生的最大快乐。其精神实质是敢“吃亏”。雷锋的“傻”是一个心眼向着党、向着国家、向着事业的“傻”，是不计较个人名利、不计较个人得失、不计较个人辛苦的“傻”，是以服务人民为最大幸福、帮助他人为最大快乐的“傻”，是把方便让给别人、把辛苦留给自己的“傻”，是把有限的生命投入到无限的为人民服务之中的“傻”。这样的“傻”，尽管有人讥笑、有人置疑，但却是社会最需要的；乐于为人的“傻”，让人信服，让人敬佩，让人尊重。乐于“吃亏”的人，就有人跟随，就会有作为，人们也不会亏待他。
本学期推普活动以“迎世博盛会,展魅力汉语”为主题.大家知道,语言文字是人们的交际工具,是信息的载体.加强语言文字的规范化、标准化,对社会的发展,科技的进步与交流和文化水平的提高,都有重要的意义.我们伟大的祖国是由56个民族组成的大家庭,使用通用的语言文字,不仅是现代经济、科技和社会发展的需要,不仅有利于促进地区间民族间的交流,有利于普及文化教育,发展科学技术,更促进着我国物质文明和精神文明建设的进程.
今天,我们身处的21世纪是高科技知识经济时代,网络信息在社会经济和人民生活的地位越来越重要,如果没有统一的语言文字,便会带来许多不便,甚至直接影响信息的传送.一个城市语言文字规范化程序,是衡量其文明程度的重要标志.sh要建成真正的国际大都市,要吸引和留住全国甚至世界各地的优秀人才,就必须营造一个能够顺畅交流的语言环境,培育各地人才对sh的认同感和归属感.sh要在明年代表中国举办一届成功的世博会,为预计突破7000万的参观人群提供优良的语言服务,就必须增强全体市民的语言文字规范意识.但由于各方面的原因,我们有些人在一定的场合中还不习惯说普通话,汉字规范使用的整体水平较低,一些商店的招牌,所出售的货品滥用繁体字,乱造简体字,随意写错别字,滥用网络语汇.所以,我们一定要规范语言文字,积极推广普通话,并从我做起.
为迎接世博盛会,近一步提升我校语言文字工作的整体水平,提高学生的语言文字应用能力,在本学期推普工作中,我校在认真贯彻《cn区第十二届全国推普宣传活动方案》精神的同时,结合我校创建学校课堂文化活动,将开展一系列活动:举行一次主题升旗仪式,出一期专题黑板报,订阅一份语言文字刊物,组织各班推普小报制作比赛,学魅汉用魅汉知识竞赛,部分同学参加“迎世博,学双语”普通话和英语口语能力考试,组织部分教师参加中华诵--中华经典诵读活动.
学校是传播文化的场所,是培养人才的基地,是精神文明建设的摇篮.校园的美,不是校园外表的漂亮,而是我们全体师生的精神状态,最美的声音应该是我们规范标准的普通话.说文明话,行文明路,是我们师生素质的体现.因此,我们每一位学生在校一定要坚持讲普通话,写规范字.
[关键词] 柱前衍生反相高效液相色谱法；谷胱甘肽
[Abstract] Objective Establish a pre-column derivatization RP-HPLC with plasma glutathione （glutath ione, GSH） method.Method With tris-（2-carboxy lethy l）-phosphine （TCEP） as reductant,7-fluorbenzo-2-oxa-1 ,3-diazole-4-sulfonate （SBD-F） as a derivative agent, N-acetyl cysteine acid （N-ace tylcystine, NAC） as an internal standard, C8 column separation. Mobile phase was methanol - phosphate buffer, gradient elution, the excitation wavelength （λex） 380nm, emission wavelength （λem） 510nm, internal standard quantification standard curve. Conclusion This method is accurate, sensitive, rapid, specific, suitable for laboratory research and clinical practice GSH detection.
[Keywords] Pre-column derivatization RP-HPLC; Glutathione
1.材料和方法
1.1仪器与试剂：Ag ilent LC-1100高效液相色谱仪，附紫外检测器和荧光检测器；BOS-RYPERS IL-C8（150.0mm×4.6mm，5µm），保护柱及C18柱芯；GSH、Cys、CysGly、GSH、TCEP、N-乙酰半胱氨酸（N-acetlycysteine，NAC）、SBD-F。甲醇、EDTA・2K、磷酸二氢钾、硼砂、氢氧化钠、三氯乙酸、正磷酸等其他试剂均为国产分析纯。
1.2色谱条件：流动相：A相：25mmol/L，pH3.0的磷酸盐缓冲液；B相：甲醇；梯度洗脱程序：B相的体积变化分数为0～9min，5%～10%；9～10min，5%；柱温：30℃；流速：1ml/min；激发波长（λex）：380nm，发射波长（λem）：510nm。
1.3样品预处理与测定：还原：取标准溶液或血浆样品60µl加入10µl内标（NAC）液（800µmol/L）、10µlTCEP（120g/L）和20µl磷酸盐缓冲溶液（25mmol/L，pH7.4），（37.0±0.3） ℃水浴10min。蛋白沉淀：在还原后的溶液中加入90µl三氯乙酸（100g/L，含4mmol/LEDTA・2K），漩涡振荡混匀，4℃13000r/min离心10min。取上清液用于衍生。衍生及测定：在50µlSBD-F（1g/L，用0.125mol/L，pH9.5硼酸盐缓冲液配制，含4mmol/LEDTA・2K）中加入10µlNaOH溶液（1.5mmol/L），125µl硼酸盐缓冲液（0.125mol/L，pH9.5）和60µl经处理后的样品液，（70.0±0.5）℃水浴80min，立即置于碎冰上冷却10min，取25µl进样分析。
2.结果
2.1样品预处理条件的确定
2.1.1衍生剂量的确定：选择0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.5g/L不同浓度SBD-F进行衍生化反应。结果表明，SBD-F浓度为0.8g/L时，衍生化反应基本完全，高于此浓度的各衍生物峰面积变化趋于稳定。选择衍生剂的浓度为1g/L。
2.1.2衍生化时间的确定：固定其他条件，取同一浓度标准品混合液分别衍生0、15、30、45、60、75、90、100min。结果表明，在0～60min内GSH和其他硫醇物衍生物峰面积随时间的延长而增加，60min后峰面积趋于稳定，反应基本完全。选择衍生化时间为80min。
2.1.3衍生化温度的确定：取同一浓度的混合标准溶液在25、37、50、60、70、80℃不同温度下进行衍生化反应。结果表明，衍生化反应温度对衍生物的产率有显著影响，衍生物峰面积随温度的升高而增加，超过60℃趋于稳定。选择衍生化温度为70℃。
2.1.4还原剂量的确定：取健康正常人混合血浆，在40、60、80、100、120、180g/L不同TCEP浓度下进行还原反应。结果表明， GSH衍生物与内标峰面积比值随TCEP的浓度增加而升高，120g/L时达到较高峰值。选择TCEP的浓度为120g/L。
2.1.5还原时间的确定：取健康人混合血浆各进行5、10、15、30、45、60min还原反应。结果表明，37.0℃水浴10min，GSH等硫醇衍生物与内标峰面积比值达到最大，其后趋于稳定。确定还原时间为10min。
2.2方法学评价
2.2.1精密度：取健康人混合血浆，加入不同体积的标准品混合液。经“样品预处理及测定”项下操作。日内重复测定5次，连续测定5d，见表1。结果表明本方法具有较好的精密度。
2.2.2回收率：对高、中、低不同浓度的血浆样品进行加标回收试验，相对回收率%=（血浆标准溶液浓度-未加标准液血浆浓度）/加入标准液浓度×100%。结果显示，各物质在不同浓度下均获得满意的回收率，CV均小于4.5%。
2.2.3标准曲线及最低检测限：配制一系列不同浓度的标准溶液。以标准品与内标峰面积之比对标准品的浓度绘制标准曲线，求得回归方程。以3倍信噪比（S/N=3）时样品浓度为最低检测限，见表2。
2.2.4稳定性：本研究结果表明，SBD-GSH、SBD-Cys、SBD2CysGly、SBD2GSH置于冷藏条件下至少可稳定1d；光照情况下可降低衍生物的荧光强度，因而衍生样品应避光保存。
【关键词】散痰宁糖浆；高效液相色谱法；盐酸麻黄碱
散痰宁糖浆是《卫生部药品标准》中药成方制剂第七册收载的品种，处方为桔梗、远志（制）、桑白皮、氯化铵、盐酸麻黄碱、薄荷脑。[1]是临床用于支气管炎，咳嗽痰多等呼吸道疾病治疗的常用药品。但是标准中没有对处方中的盐酸麻黄碱进行含量测定，《中国药典》2010年版一部对麻黄药材用高效液相色谱法测定盐酸麻黄碱的含量[2]，笔者参考该法测定散痰宁糖浆中盐酸麻黄碱的含量，结果专属性强、耐用性好、精密度高，认为此法可以测定散痰宁糖浆中盐酸麻黄碱的含量。具体实验方法如下：1仪器与试药
SHIMADZU SPD-10AVP型高效液相色谱仪，UV762型双光束紫外分光光度计，FA2004电子分析天平。乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯。2检测波长
取盐酸麻黄碱对照品的甲醇溶液，在200-600nm波长处进行扫描测定，最大吸收波长为207nm，所以选择检测波长为207nm。3测定条件
以乙腈0.1%磷酸溶液（9：87）为流动相，色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流速为1.0ml/min，柱温为23℃。4专属性考察
取缺盐酸麻黄碱的全处方量的阴性样品，按上述的含量测定方法进行测定，阴性无干扰。5供试溶液的制备
5.1对照品溶液的制备精密称取置五氧化二磷干燥器中减压干燥12小时的盐酸麻黄碱对照品9.9mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密量取2ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中含盐酸麻黄碱7.92μg）。
5.2提取溶剂的考察精密量取样品（批号100901）10ml（共三份），分置50ml量瓶中，加50%甲醇、甲醇、乙醇各40ml，超声处理20分钟，分别加50%甲醇、甲醇、乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液2ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。按上述色谱条件进行测定，计算，结果以甲醇为提取溶剂，提取效率优于50%甲醇、乙醇，因此选用甲醇为提取溶剂。
5.3提取方法的考察精密量取样品（批号100901）10ml，置50ml量瓶中，加甲醇40ml，一份超声处理（功率120W，频率59KHZ）20分钟；另一份置水浴中加热回流20分钟，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，精密量取续滤液2ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。按上述色谱条件进行测定，计算，结果两种方法提取含量测定结果几无差异，因此以上选用方便简单的超声处理进行提取。
5.4提取时间的考察精密量取样品（批号100901）10ml（共三份），分置50ml量瓶中，加入甲醇各40ml，分别超声处理（功率120W，频率59KHZ）20分钟、30分钟、40分钟，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，再精密量取续滤液2ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。按上述色谱条件进行测定，计算，结果几种提取时间均能较完全提取，含量测定的结果几无差异，因此提取时间选择为20分钟。
综上所述，供试品溶液的制备方法为：精密量取样品10ml，置50ml量瓶中，加入甲醇40ml，超声处理（功率120W，频率59KHZ）20分钟，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，精密量取续滤液2ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。6耐用性试验
6.1稳定性试验精密量取样品（批号100901）10ml，按以上拟定的供试液的制备方法制备，室温下保存，取对照品溶液及供试品溶液分别于0小时、2小时、4小时、6小时、8小时、10小时，按以上拟定的含量测定方法，分别进样10μl，并以含量计算其RSD值，结果为0.22，可见对照品溶液与供试品溶液在配制后10小时内测定，结果稳定。
6.2不同比例的流动相实验曾以乙腈-0.1%磷酸溶液（9：87）、乙腈-0.1%磷酸溶液（10∶90）、乙腈-0.1%磷酸溶液（15∶85）为流动相，流速：1.0ml/min，以SHIMADZUC18柱（5μm，4.6×250mm）为分析柱，柱温22℃，进行试验研究，均能达到满意的分离，测定结果分别为0.504、0.508、0.509，RSD为0.39%。
6.3不同的色谱分析柱实验曾用ZIVCHROMI柱（5μm，4.6×150mm）、SHIMADZU C18柱（5μm，4.6×250mm）与Kromsil C18柱（5μm，4.6×150mm）为分析柱，以乙腈-0.1%磷酸溶液（9：87）为流动相，测定结果分别为0.505、0.509、0.510，RSD为0.39%。
综合以上试验，该方法的耐用性较好。
流动相的比例略作变化，盐酸麻黄碱与其他组分均能达到基线分离，系统适应性较好。分别用ZIVCHROMI、SHIMADZU和Kromsil三种品牌的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，盐酸麻黄碱与其他组分均能达到基线分离，系统适应性好。7含量测定方法学研究
7.1标准曲线与线性范围精密称取盐酸麻黄碱对照品11.98mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密量取该溶液1ml、3ml、5ml、7ml、9ml，置50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。每1ml含盐酸麻黄碱分别为2.396ug、7.188ug、11.980ug、16.772ug、21.564ug，作为供试品溶液。分别精密吸取上述供试品溶液各10μl，按以上色谱条件进行分析，测定峰面积，结果盐酸麻黄碱浓度在2.396-21.564μg/ml范围内与峰面积呈很好的线性关系，回归方程及相关系数：A=5075872C-7919，γ=0.9997（C为盐酸麻黄碱浓度，单位μg/ml，A为峰面积）。
7.2重复性试验按以上拟定的含量测定方法，取样品（批号为100901）共6份，精密量取10ml，分别制备供试品溶液，按上述色谱条件测定，结果RSD=0.59%，表明重复性良好。
7.3精密度从同一瓶散痰宁糖浆样品（批号100901）中，同时取样5份，按以上拟定的方法，分别制备样品供试液测定。结果各样含量的RSD为0.75%，表明精密度较好。
7.4加样回收率试验分别精密量取批号为100901（已知含量为0.5102mg/ml）的样品5ml，置6个100ml的量瓶中，再分别精密加入盐酸麻黄碱对照品溶液（浓度为3.7568mg/ml）各1.0ml，按以上拟定的供试品溶液制备方法和色谱条件，制备加样回收供试品溶液，并精密量取10μl，注入高效液相色谱仪中，测定含量，计算回收率，结果回收率在96.88%-101.89%之间，加样回收良好。
注：限于版面，数据及图表略。
参考文献
【摘要】 目的 建立测定人血浆中依诺沙星浓度的高效液相色谱方法。方法 血浆样品经甲醇沉淀蛋白后，以乙腈∶0.05mol/L柠檬酸缓冲液(15∶85，pH3.5)为流动相，经HypersilBDS C18(4.6mm×150mm，5μm)色谱柱分离，345nm波长检测。结果 依诺沙星在0.05～5.0μg/ml浓度范围内线性关系良好，低、中、高三个浓度的提取回收率为44.8%～51.1%，日内、日间相对标准差为3.15%～6.61%。结论 本方法准确、快速，可满足临床药动学研究的要求。
【关键词】 依诺沙星 高效液相色谱法 药动学
Determination of enoxacin in human plasma by
ABSTRACT Objective An HPLC method was established for determination of enoxacin in human serum. Methods Serum protein was precipitated with methanol. The analysis was conducted with a HypersilBDS C18 (4.6 mm×150 mm， 5μm) column， acetonitrile∶0.05 mol/L citric buffer (15∶85， pH3.5) as mobile phase， and the detecting wavelengh was at 345 nm. Results The linear range enoxacin was 0.05～5.0 μg/ml and the recoveries were in the range of 44.8%～51.1% at three different concentrations. The RSD of intra and interday were in the range of 3.15%～6.61%. Conclusion This method is suitable for the pharmacokinetic study of enoxacin.
KEY WORDS Enoxacin; HPLC; Pharmacokinetics
依诺沙星又名氟啶酸，是第三代喹诺酮类广谱抗生素，通过作用于细菌DNA螺旋酶，抑制细菌DNA的合成和复制而导致细菌死亡。临床上用于敏感菌所致的急性呼吸系统、泌尿系统、消化道及皮肤软组织等感染的治疗［1］。有关依诺沙星浓度测定的方法国内、外都有报道，有采用LC/MS/MS法［2］、荧光法［3］、微生物法［4］、微透析法［5］，常用HPLC紫外检测［6，7］。本文建立了测定血浆中依诺沙星的高效液相色谱法，该方法简便，快捷，并研究了该药的体内药动学行为，为临床研究提供方法和依据。
1 仪器与试药
HP1100系列高效液相色谱仪(Agilent公司)，GL20GII高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂)。依诺沙星对照品(含量99.7%，山东罗欣药业股份有限公司提供)；依诺沙星片(山东新华制药股份有限产品，规格为每片200mg，批号0501084)。甲硝唑对照品(内标物，中国药品生物制品检定所)；乙腈、甲醇为色谱纯；柠檬酸和三乙胺均为分析纯。空白血浆由中国医科大学附属二院输血科提供。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为HypersilBDS C18柱(4.6mm×150mm，5μm)；流动相为乙腈∶柠檬酸缓冲液(15∶85，pH3.5)(缓冲盐为每1000ml溶液加三乙胺6ml调至pH3.5)；流速1.0ml/min；检测波长345nm；柱温30℃。
2.2 血浆样品处理
取血浆样品0.5ml，于具塞塑料离心管中，补加50μl甲醇，加入内标(10μg/ml甲硝唑甲醇溶液)50μl，加甲醇1.0ml涡旋混合1min，10000r/min离心10min，移取上清液于另一洁净试管中，55℃氮气吹干上清，200μl甲醇溶解残渣，取20μl上清液进样，记录色谱图。
2.3 标准曲线
取0.5ml空白血浆，依次加入浓度为0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、25.0和50.0μg/ml的依诺沙星标准系列的甲醇溶液50μl，配制相当于0.05、0.10、0.25、0.50、1.0、2.5和5.0μg/ml的血浆样品，按“2.2”项下的方法操作，制备标准曲线。以待测物浓度C为横坐标，待测物与内标物的峰面积比(Y)为纵坐标，用加权最小二乘法进行回归运算，得直线回归方程：
Y=0.8612C-0.00047 r=0.9977(n=3)
2.4 方法专属性考察
在上述色谱条件下测得空白血浆、空白血浆加入标准品及实测血浆样品的谱图(Fig.1)。在本实验条件下依诺沙星的保留时间约为3.05min，内标甲硝唑保留时间约为4.48min，血浆内源性物质对依诺沙星及甲硝唑无干扰。
2.5 方法精密度和回收率
制备浓度分别为0.1、0.5和2.5μg/ml的依诺沙星标准血浆样品作为质控(QC)样品，按“2.2”项下依法操作，每个浓度6个样本，连续测定3d，以当日的标准曲线计算样品的测得浓度，与配制的浓度对照，求得本法的精密度与准确度。另取相当于0.1、0.5和2.5μg/ml的标准品稀释液，进样20μl，记录峰面积，考察提取回收率。结果见Tab.1。
2.6 稳定性考察
按“2.5”项下方法分别配制低、中、高三个浓度QC样品，每个浓度进行6样本分析经提取，室温放置24h测定，结果RSD＜3%，表明血浆样品室温放置24h稳定。同法配制低、中、高三个浓度的QC样品，经反复三次-20℃冰冻，室温融化后测定样品浓度，结果RSD＜5%，表明血浆样品在冻融条件下稳定。
2.7 药动学研究
A: Blank plasma; B: Plasma with standard material (2.5 μg/ml);
C: Plasma sample 1.5h after a single dose 1: Enoxacin; 2: IS
经医学伦理委员会批准，选择健康男性志愿者20名，平均年龄(22.4±0.8)岁，平均身高(1.73±0.05)m，平均体重(65.4±4.57)kg，试验前体格检查心电图、肝、肾功能等各项指标均为正常。由本人签署知情同意书。试验日晨空腹服用依诺沙星片400mg，分别于给药前和给药后0.33、0.67、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、6.0、9.0、12.0和24.0h取静脉血4ml，置肝素离心管中，离心、分离血浆，按“2.2”项下方法操作，测定血浆中依诺沙星的浓度，主要药动学参数tmax、cmax、t1/2和AUC分别为(1.29±0.59)h、(3.47±0.84)μg/ml、(7.23±1.20)h和(21.5±4.23)μg·h/ml。平均药时曲线见Fig.2。
3 讨论
依诺沙星的标准品溶液经紫外扫描，最大吸收波长分别在274和345nm，在实际测定中我们采用345nm，虽然没有274nm处响应值高，在实验条件下血浆内源性杂质对样品和内标无干扰，且可满足体内样品分析测定的需要。
本试验优化了不同提取液、流动相，发现流动相在pH3.5的条件下分析依诺沙星和内标可得到很好的分离，且峰形对称。采用有机溶剂提取、酸沉的方法均有内源性干扰，而采用甲醇和乙腈直接沉淀蛋白的方法无内源性干扰，用甲醇提取回收率相对要高，虽然回收率仅为50%左右，但高、中、低三个浓度下的提取回收率非常一致，提取物室温放置稳定，且无内源性杂质干扰，重现性好。每个样品的分析时间仅为5min，适合
本文所获得的药动学参数与国内外文献［8，9］报道一致，为该药临床安全有效的应用及个体化给药提供了参考依据。本文所用的方法准确、灵敏、快速，适用于药动学研究。
参考文献
［1］ Henwood J M， Monk J P. Enoxacin. A review of its antibacterial activity， pharmacokinetic properties and therapeutic use ［J］. Drugs，1988，36(1):32
［2］ 周虹. LC/MS/MS法同时测定食品中喹诺酮类药物［J］. 口岸卫生控制，2005，10(3)：40
［3］ EspinosaMansilla A， Pena A M， Gomez D G， et al. HPLC determination of enoxacin， ciprofloxacin， norfloxacin and ofloxacin with photoinduced fluorimetric (PIF) detection and multiemission scanning application to urine and serum ［J］. J Chromatogr B，2005，822:185
［4］ 张莉蓉，乔海灵，王海学. 依诺沙星胶囊在健康人体的药物动力学及相对生物利用度［J］. 中国临床药学杂志，2002，11(2)：89
［5］ 刘志东，李佳玮，张立波. 微渗析技术研究依诺沙星眼用缓释凝胶剂兔眼内药动学［J］. 中国新药杂志，2005，14(7)：867
［6］ 李彬，王海意，吴鸿范. 高效液相色谱法测定血清中依诺沙星浓度［J］. 天津医科大学学报，1995，1(1)：30
［7］ Davis J D， Aarons L， Houston J B. Simultaneous assay of fluoroquinolones and theophylline in plasma by highperformance liquid chromatography ［J］. J Chromatogr，1993，621(1):105
