时间：2023-02-27 11:15:57
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7月中旬，据德国《明镜周刊》披露，大众汽车以80亿欧元收购保时捷跑车业务。一周以后，保时捷监事会也发表了声明：保时捷CEO文德金正式下课，原因是“如果他不再继续任职，对保时捷未来的战略发展将更加有利”。
此消息一出，全世界都为之震惊，这证实了保时捷控股陷入沉重债务危机的传闻。保时捷家族不得不以出售跑车业务给大众汽车的方式来降低保时捷高达百亿的负债。根据两个公司达成的协议，双方将组成一家新的汽车公司――“大众―保时捷”。
“汽车教父”费迪南德・保时捷
他是大众“甲壳虫”的设计者，也是保时捷的奠基人；他为希特勒设计过战车，也为老百姓设计买得起的汽车。
大众收购保时捷，对于好事者来说，已经超越了简单的商业收购范畴，隐藏在背后的家族纷争，才是真正的话题。提起这两大汽车品牌，就不得不从一个关键人物说起，这就是保时捷和大众的奠基人、“汽车教父”费迪南德・保时捷。
费迪南德・保时捷1875年出生于捷克，家中排行老三，父亲是当地一个铁匠。他年轻时就显露出对机械制造的天分和兴趣。小学毕业后，便在父亲的工场做学徒，白天帮父亲干活，晚上到维也纳技术学校上夜校，这也是他接受到的唯一的系统的工程训练。
1898年，费迪南德加入位于维也纳的Ludwig Lohner公司，并于1899年开发了名为Lohner-Porsche的电动汽车，这是第一部以“保时捷”命名的汽车，是如今大红大紫的电动汽车的雏形，一举奠定了费迪南德・保时捷“汽车教父”的地位。
1906年，费迪南德来到奥地利的戴姆勒汽车公司，并于1916年升至分公司的总裁。1926年，戴姆勒汽车与当时的奔驰汽车合并，新公司董事会决定大力开发豪华型轿车，而费迪南德的目标却是设计生产所有老百姓都买得起的汽车。这一想法自然受到了董事会的否决，1929年费迪南德离开了。1931年4月，费迪南德在德国斯图加特成立了自己的“保时捷发动机与飞机设计有限责任公司”，这便是保时捷公司的前身。
1933年1月，希特勒上台仅11天就亲自主持了柏林汽车展的开幕式，并发表演讲表示要创造一种全新的“国民轿车”。这与费迪南德的想法不谋而合，希特勒亲自点名由费迪南德主导设计，并要求他在28个月内拿出样车。1935年柏林汽车展上，希特勒宣布了“国民轿车”即将到来的消息。在这里，他第一次使用了“大众汽车”一词。1936年10月，3辆样车终于按时完成，这就是以后风靡垒球的“甲壳虫”。于是希特勒决定在德国中部沃尔夫斯堡建立工厂，新工厂命名为“大众汽车”，费迪南德出任总工程师，1939年7月开始正式生产“甲壳虫”汽车。可不到一个月生产就停止了。因为希特勒已经决心发动世界大战，汽车厂转眼变成了兵工厂，费迪南德不得不为希特勒设计军事战车，包括他为希特勒设计了威震欧洲战场的“虎式坦克”和“象式坦克歼击车”。
此时的费迪南德全身心投入在沃尔夫斯堡的大众汽车公司上，位于斯图加特的保时捷跑车设计的工作便交给了儿子费里・保时捷，父子分别掌管大众和保时捷。因为和德国纳粹的关系，二战结束后，费迪南德、他的儿子费里，以及女婿安东・皮耶希都被美国人以战争罪行逮捕，随后被交给了法国，帮助当时的雷诺开发新车。儿子费里在监狱度过3个月后被释放，费迪南德和女婿则继续被关押在法国。
此时从都灵来了一份活――意大利跑车公司Cisitalia的总经理Piero Dusio委托费里设计一款赛车。费里用设计这辆车赚来的钱将骨瘦如柴的老父亲从法国的监狱赎了回来。在给法国人免费打了20个月的工后，一家人终于又团聚了。
1947年，儿子费里正式接替父亲成为保时捷的主席。而费迪南德则在儿子的搀扶下，战旨首次回到仍在英国人占领之下的沃尔夫斯堡，回到了大众汽车。这是个让他实现毕生梦想的地方，也是让他深陷囹圄的地方。看着自己当年在一张白纸上建造起来的工厂和流水线上大量生产的“甲壳虫”，费迪南德百感交集。由于常年埋头于设计，加上法国监狱恶劣的生活条件，费迪南德的健康受到很大的损害。不久，费迪南德中风，并于1951年1月30日在沃尔夫斯堡逝世。终年77岁。
家族的分裂
费迪南德有一子一女，女儿路易丝和女婿安东・皮耶希一直打理着大众的业务，儿子费里一直专注于保时捷的跑车设计，两个二代继承人分工明确，相处和谐。但到了第三代，几个表兄弟之间争权夺势，将这个家族一分为二――“保时捷”家族和“皮耶希”家族。
费迪南德去世之前，他的女儿路易丝・皮耶希和女婿安东・皮耶希一直在奥地利全力打造大众汽车进口业务。费迪南德去世后，姐姐路易丝和弟弟费里各拥有保时捷公司50％的股份，这也就为以后保时捷和皮耶希家族之争埋下了伏笔。1952年，也就是费迪南德去世一年后，女婿安东・皮耶希也在奥地利去世。路易丝接过丈夫留下的担子，全权负责大众汽车销售业务，而费里则全身心投入到保时捷跑车设计生产上。
费里与妻子朵罗丝・雷兹共育有4子，而姐姐路易丝也有3个儿子1个女儿。随着两个家族第三代继承人逐渐加入到公司的管理层，表兄弟之间为了公司领导权的争斗也越来越激烈。首先要说的便是现任大众汽车监事会主席小费迪南德・皮耶希，他是路易丝的儿子。1963年4月大学毕业后，他开始在自己家族的跑车公司工作。他是个冲劲很足的年轻人，从最底层做起，短短几年时间，不仅掌管了赛车部，而且还管理着一个有200名汽车工程师的部门。尽管一直饱尝资金不足和人手不足的双重压力，但他仍然坚持了下来，并最终获得了成功。
皮耶希的对手是舅舅费里的大儿子，比自己大两岁的表哥亚历山大・保时捷。这个随遇而安的年轻人也跟这个家族的其他人一样爱车，他全身心投入到艺术设计中。1981年，亚历山大便完成了保时捷经典车型911的外形设计，创造了跑车史上的经典。但他对权力的追求远远不如自己的表弟，对公司政治基本上毫无兴趣，面对皮耶希的紧逼之势，保时捷一家总是落于下风。
尽管皮耶希在事业上取得了成功，但是他跋扈的风格，花钱大手大脚的习惯也惹怒了保时捷家族的一些成员。1972年，眼看着继承权的争斗即将给公司带来严重后果的严峻时刻，为了平息事态，维持公司的长远发展，费里无情地解雇了好斗的外甥，并决定保时捷公司从此将由非家族成员进行管理。
【摘要】 目的 构建铜绿假单胞菌发光菌株，建立铜绿假单胞菌生物膜(biofilm，BF)模型，研究盐酸氨溴索对铜绿假单胞菌成熟BF的影响及与环丙沙星合用是否具有协同杀菌作用。方法 将携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)的质粒转染铜绿假单胞菌，平板培养法培养铜绿假单胞菌BF，建立铜绿假单胞菌BF体外模型，经盐酸氨溴索作用后，扫描电镜(scanning electron microscope，SEM)观察盐酸氨溴索对BF形态结构的影响，荧光显微镜定性观察盐酸氨溴索对BF内活菌的作用，通过发光菌株荧光强度定量分析盐酸氨溴索单独作用以及与环丙沙星联用后BF内活菌量。结果 盐酸氨溴索作用后电镜观察可见黏液样物变稀疏，不规则。盐酸氨溴索浓度大于0.49mg/mlBF内活菌数减少(F=18，P
【关键词】 盐酸氨溴索； 环丙沙星； 铜绿假单胞菌； 生物膜
ABSTRACT Objective To establish a biofilm model of Pseudomonas aeruginosa in vitro and observe the effect of ambroxol on biofilm of Pseudomonas aeruginosa， and study the synergistic effect with ciprofloxacin on tested specimens. Method Plasmids carried with green fluorescent protein (GFP) was tansfected to the strain of Pseudomonas aeruginosa. Plate culture method was used to establish biofilm model of Pseudomonas aeruginosa in vitro. After ambroxol was added to the biofilm， the appearance of the biofilm was detected by scanning electron microscope (SEM)， and the viable counts of bacterial in biofilm after treated by ambroxol alone and together with ciprofloxacin were determined by bio-fluorescence method. Result After adding ambroxol， the biofilm was thin and abnormal compared with the control by SEM detection. Further detection with fluorescence microscope showed the viable bacteria in biofilm was reduced significantly (F=18， P
KEY WORDS Ambroxol; Ciprofloxacin; Pseudomonas aeruginosa; Biofilm
生物膜(biofilm，BF)是细菌黏附在物体表面上形成的一种具有高度结构性的膜状复合物，其主要成分是细菌分泌的胞外基质和细菌菌体［1］。BF可使细菌具有抵御宿主免疫系统和抗菌药物杀伤作用，产生对抗菌药物的高度耐药性(可达到浮游状态的10～1000倍)，导致感染难以治愈［2］。铜绿假单胞菌是常见细菌生物膜相关感染病原菌之一，铜绿假单胞菌生物膜的形成是呼吸机相关性感染难以控制的重要原因。作者曾研究氨溴索可显著促进环丙沙星对细菌生物膜的透过［3］，本研究发现盐酸氨溴索对铜绿假单胞菌BF有抑制作用，且与环丙沙星联用后具有协同作用，增强杀菌活性，现报道如下。
1 材料和方法
1.1 材料
菌株PAO1(购自四川大学微生物实验室)，Luria-Bertani培养基(LB，上海升博生物技术公司)，盐酸氨溴索标准品(德国Boehringer Ingelheim)；环丙沙星标准品(重庆市药品检定所)，比浊仪(德国Siemens公司)，多功能酶标仪(美国BIORAD UV-3350型)，荧光显微镜(德国Leica公司)，SEM(美国Amary公司)，24及96孔培养板(美国Coring公司)。
1.2 方法
(1)构建GFP标记的PAO1菌株 采取电转化对PAO1进行GFP)标记。首先制备感受态PAO1，然后进行菌株pGFPuv质粒转化和转化菌株筛选，提取转化菌株中质粒和转化菌株中质粒双酶切电泳鉴定，检测转化菌株中质粒稳定性。本实验获得较稳定遗传的GFP标记的PAO1菌株。
(2)环丙沙星最低抑菌浓度(MIC)的测定 采用微量稀释法测定环丙沙星对铜绿假单胞菌的MIC，质控菌株为铜绿假单胞菌ATCC27853。
(3)铜绿假单胞菌BF体外模型的建立 用平板法培养铜绿假单胞菌BF［4］。取隔夜培养的含有铜绿假单胞菌的LB培养液，调至1.5×108CFU/ml。分别吸取菌液1ml加入24孔板(其内放8mm×8mm玻片)，0.1ml加入96孔板。37℃培养，每48h换液一次，连续培养7d，即可形成稳定成熟的BF［5］。
(4)铜绿假单胞菌BF形态的SEM检测 本部分实验分为两组［对照组和盐酸氨溴索组(浓度3.75mg/ml)］。两组用平板法培养细菌7d，在24孔板内分别加入1ml LB培养基和盐酸氨溴索，37℃孵育24h后取出，用磷酸缓冲液(phosphate buffer solution，PBS)反复清洗，去除浮游菌。立即用2．5%戊二醛PBS溶液中固定2h，再经0.1mol PBS冲洗2次(pH7.2)，30%～100%系列浓度乙醇脱水，经50%～100%叔丁醇置换，干燥、离子溅射仪喷金，经过SEM观察铜绿假单胞菌BF微观形态。
(5)荧光显微镜定性观察细菌BF内活菌数 本部分实验分为6组［空白对照组，不同浓度的盐酸氨溴索作用组(浓度依次为3.75、1.875、0.95、0.49和0.25mg/ml)］。在24孔板加入1ml菌液，平板法培养7d，分别加入1ml上述浓度的盐酸氨溴索和LB培养基，37℃孵育24h取出，用PBS反复清洗，去除浮游菌，取出玻片，置荧光显微镜下观察。
(6)多功能酶标仪定量分析盐酸氨溴索与环丙沙星合用后细菌BF内活菌数 细菌培养7d，棋盘法在96孔板内分别加入0.1ml不同浓度的盐酸氨溴索(浓度依次为3.75、1.875、0.95、0.49、0.25和0mg/ml)和环丙沙星(浓度依次为4、2、1、1/2、1/4和0MIC)，37℃孵育24h取出，用PBS反复清洗，去除浮游菌，用多功能酶标仪检测各孔荧光强度。
(7)统计学分析 所有数据输入SPSS11.5统计软件包，并行正态性分布检验，均符合正态性分布，后进行方差分析，显著性水平α=0.05。
2 结果
2.1 环丙沙星的MIC测定
环丙沙星的MIC为1μg/ml。
2.2 SEM观察铜绿假单胞菌BF形态
经过各组处理后铜绿假单胞菌BF进行SEM观察可以看出，细菌培养7d后形成成熟的BF。对照组BF在载体表面形成片状物，周围有厚薄不均的黏液状物质连接成一大片，其内包裹大量细菌;盐酸氨溴索处理组铜绿假单胞菌BF变得稀疏，结构简单，仅见少量散在细菌。
2.3 荧光显微镜观察盐酸氨溴索对成熟BF的影响
预置8mm×8mm玻片的24孔板内接种等量的细菌，培养7d后加入不同浓度的盐酸氨溴索作用24h后取出玻片，洗去浮游菌，振荡破坏BF，使其内细菌游出，置荧光显微镜下观察(×200)，取随机视野，结果显示，随着浓度的升高，细菌减少；当浓度达到0.5mg/ml时，与生理盐水对照组大致相当。
2.4 多功能酶标仪定量检测BF内活菌荧光强度
随着盐酸氨溴索浓度的升高，培养板内细菌的荧光强度下降，说明BF内活菌减少，统计分析显示当盐酸氨溴索浓度达到0.49mg/ml时，与对照组存在差异(单因素方差分析，P
盐酸氨溴索单独以及与环丙沙星联用后BF内细菌荧光强度图1中6条曲线代表不同浓度的盐酸氨溴索作用下，在环丙沙星浓度从0～8MIC变化时荧光强度的变化趋势。从图中可以看出，盐酸氨溴索与环丙沙星存在协同作用(随着盐酸氨溴索浓度升高，在同一环丙沙星浓度所对应的荧光强度，随之降低)，且随着盐酸氨溴索浓度升高，协同作用增强。
3 讨论
近年来由呼吸机辅助通气的使用增加，导管相关性感染问题日益突出。铜绿假单胞菌是常见的形成BF菌类之一，形成BF后，由于其渗透限制作用［1］，以及其内细菌所处的微环境改变［5］等原因，导致细菌耐药性增强，难以清除。尽管国外有报道卤代呋喃唑酮［6］及藻酸盐抗体［7］等有破坏BF的作用，但尚未应用于临床治疗，因此，寻找一种有效可行抗铜绿假单胞菌BF的临床用药具有极为重要的意义。国外报道，化痰药N-乙酰半胱氨酸干扰生物膜形成［8］，盐酸氨溴索作为一种临床常用的化痰药与N-乙酰半胱氨酸作用机制上有一定的相似性，推测盐酸氨溴索可能具有抗BF作用。本文将携带GFP的质粒转染PAO1，构建铜绿假单胞菌发光菌株，采用平板培养法，7d后得到成熟的BF。SEM观察显示，在盐酸氨溴索的作用下，成熟的BF变得稀疏，不规则，说明一定浓度的盐酸氨溴索可影响BF的形态，破坏其结构的完整性。同时采用生物发光法直观地观察盐酸氨溴索对铜绿假单胞菌BF内活菌的影响，结果发现随着盐酸氨溴索浓度的升高，BF内黏附的活菌减少，说明盐酸氨溴索对铜绿假单胞菌BF有破坏作用。临床上常用抗生素如环丙沙星对BF状态的铜绿假单胞菌的杀灭作用不强。用多功能酶标仪检测不同浓度环丙沙星与盐酸氨溴索联合应用的对细菌的作用，结果显示它们具有协同抑制作用，且随着盐酸氨溴索浓度升高，协同作用增强，BF内活菌进一步减少，环丙沙星的杀菌活性增强。这可能与盐酸氨溴索破坏BF结构的完整性，增强了环丙沙星对BF的穿透能力，提高了环丙沙星对BF中细菌的杀灭能力。由此认为，盐酸氨溴索对铜绿假单胞菌BF有破坏作用，与其他抗生素联用可以提高其杀菌能力，为盐酸氨溴索的抗BF应用提供了理论基础，为新生儿难治性铜绿假单胞菌感染的临床治疗提供新的思路。对于盐酸氨溴索抗BF的作用推测可能与其对BF胞外基质的合成和结构维持的影响有关，具体机制还有待进一步研究。
参考文献
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【关键词】 人参皂苷Rb1；，，芳维甲酸乙酯；，，基质金属蛋白酶；，，成纤维细胞；，，免疫组织化学
摘要：目的通过人参皂苷Rb1与芳维甲酸乙酯对皮肤真皮体外培养光老化成纤维细胞胞质内基质金属蛋白酶表达的影响，阐明人参皂苷Rb1对光老化的防治机理，探索光老化的防治手段。方法建立体外培养真皮成纤维细胞光老化模型，用人参皂苷Rb1与芳维甲酸乙酯进行干扰，免疫组织化学技术显示基质金属蛋白酶的表达的改变。结果人参皂苷Rb1与芳维甲酸乙酯对培养成纤维细胞胞质基质金属蛋白酶的表达有显著抑制作用（P0.05)。结论人参皂苷Rb1对光老化成纤维细胞具有与芳维甲酸乙酯相似的防治作用，其机理与芳维甲酸乙酯的作用机理可能相同或者相似，及通过调节MMPs活性防治皮肤光老化。
关键词：人参皂苷Rb1； 芳维甲酸乙酯； 基质金属蛋白酶； 成纤维细胞； 免疫组织化学
Comparative Study of the Effect of the Ginsenoside Rb1 and Arotinoid Ethyl Ester on the Expression of MMPs in Sun-induced Aging Dermis Fibroblasts
Abstract：ObjectiveTo explore the methods of prevention and cure of sun-induced aging dermis， and clarify the mechanism of Ginsenoside Rb1 on sun-induced aging dermis， with the study of expression of matrix metallo preteinases in sun-induced aging dermis fibroblasts' cytoplast， which are cultured in vitro， under the effect of Ginsenoside Rb1 and arotinoid ethyl ester. MethodsBuild the dermis fibroblasts sun-induced aging model， and affect the cells with Ginsenoside Rb1 and arotinoid ethyl ester， and display the change of expression of matrix metallo preteinases with immunohistochemistry. ResultsGinsenoside Rb1 and arotinoid ethyl ester had significant inhibition effect on the expression of matrix metallo preteinases in the fibroblasts' cytoplast cultured in vitro（P0.05). ConclusionGinsenoside Rb1 has effect of prevention and cure of sun-induced aging dermis's fibroblasts like the arotinoid ethyl ester， and its mechanism is the same as or like the arotinoid ethyl ester through regulating the expression of matrix metallo preteinases.
Key words：Ginsenoside Rb1; Arotinoid ethyl ester; Matrix metallo preteinases; Fibroblast; Immunohistochemistry
皮肤老化是人体衰老的主要表现之一，也是目前人们极为关注的话题。长期反复的紫外线照射是皮肤光老化的重要因素，皱纹形成是皮肤光老化的最为重要特征。研究皱纹形成机理对防治紫外线辐射损伤及皮肤老化有重要意义。维甲酸对光老化皮肤的治疗作用已经被大量的研究所证实，并且已经应用于临床，但有研究表明维甲酸虽然已经经历了几代，仍然有许多很难克服的毒副作用［1~3］。人参具有保护机体细胞和全身免受应激的影响，降低血糖和血胆固醇，促进新陈代谢等功能，目前已经广泛应用于临床的许多方面，包括在很多皮肤保健品和化妆品内［4，5］。本研究通过用人参的有效成分之一―人参皂苷Rb1（Ginsenoside Rb1）与芳维甲酸乙酯（arotinoid ethyl ester）的对比研究，目的在于阐明人参皂苷Rb1防治光老化的可能机理，探索更为有效的皮肤光老化的防治方法。基质金属蛋白酶(matrix metallo preteinases，MMPs)在各种生理、病理条件下细胞外基质降解和重塑中起着关键作用，可以降解含或不含胶原成分的皮肤真皮细胞外基质。有研究表明，在在体实验和细胞培养实验中， MMPs在衰老皮肤真皮成纤维细胞（fibroblast；FB）的表达明显增强，说明其在衰老发生及皱纹形成过程中有重要作用，尤其是MMP1和MMP3［6，7］。在本研究中选择MMP1和MMP3作为光老化皮肤真皮的老化程度指标进行研究。
1 材料与方法
1.1 取材健康新生儿包皮真皮。
1.2 主要仪器设备与试剂芳维甲酸乙酯（购于市场），溶于吐温20 (山西省天星生化药业有限公司)；人参皂苷Rb1（中国医科大学化学教研室），溶于二甲基亚砜；MMP1和MMP3免疫组织化学试剂盒（武汉博士德生物工程有限公司）；8甲氧补骨脂素(8MOP)；四唑盐(MTT)试剂；等。紫外线功率测定仪（上海西格玛高技术公司）；二氧化碳培养箱；长波紫外线（UVA）灯管；等。
1.3 细胞培养及分组处理细胞培养、细胞复苏、细胞传代等实验方法，细胞接受紫外线照射、8MOP、芳维甲酸乙酯、人参皂苷Rb1等药物处理等实验方法，确定无毒性紫外线照射剂量、8MOP、芳维甲酸乙酯、人参皂苷Rb1等药物的最佳作用浓度、选择作用时间等实验方法，完全参照文献［8］进行。具体分组及各组处理方法：正常对照组（control group；CG）；阳性对照组（masculine group；MG）：UVA+8MOP；维甲酸实验组（arotinoid ethyl ester treatment group；AG）：UVA+8MOP+芳维甲酸乙酯；人参皂苷Rb1实验组（Ginsenoside Rb1 treatment group；GG）：UVA+8MOP+人参皂苷Rb1。人参皂苷Rb1剂量为20，50，100 μg/ml（分别为GG1，GG2，GG3三组），作用时间为48 h。
1.4 免疫组织化学实验SABC法显示各组MMP1和MMP3。步骤：中性甲醛固定培养细胞20 minTriton-100打孔3%双氧水灭活内源性酶7 min，蒸馏水洗抗原修复液修复抗原，水洗滴加正常山羊血清滴加一抗（1∶200）孵育，pH7.3、0.01M PBS洗滴加二抗（1∶100）孵育，PBS洗DAB避光显色，镜下控制显色时间蒸馏水终止显色，充分洗脱脱水，封片［8］。
1.5 结果观察与图像分析用光学显微镜对各组切片进行形态学观察，并采用盲法用IS4400图像分析仪，在400倍下进行图像分析。检测：(1)光密度（反映染色深浅）；(2)阳性反应区域与阴性反应区域比值(PNarea；PNarea与反应的强度无关，代表阳性着色颗粒的相对面积，可以反映阳性率)。均用±s表示。
1.6 统计学分析对以上结果用SPSS10.0 For Windows方差分析进行统计学检验，再用SNK q法进行组间比较。
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2 结果
在光学显微镜下观察HE染色后的各组细胞，细胞密度没有明显的差异，细胞直径约20～35 μm。细胞形态呈星形，有3~7个突起，细胞核位于细胞的中央，体积较大。在HE染色条件下，细胞胞质呈弱嗜碱性。细胞周围可以看到少量纤维。在8MOP与紫外线作用后2 h后，培养成纤维细胞逐渐出现细胞老化的形态学改变，表现为细胞体积实质性增大，胞质内出现一些颗粒，细胞核体积略为减小，染色逐渐加深。在免疫组织化学染色切片中，可以看到各组成纤维细胞内部MMP1和MMP3阳性产物，分布在细胞胞质内，呈棕黄色颗粒。其表达48 h最强，然后逐渐减弱，72 h逐渐恢复。免疫组织化学染色图像分析光密度和胶厚面积结果（表1）所示，阳性对照组MMP1和MMP3表达明显增强，与对照组之间差异有显著性（P
表1 48 h各组成纤维细胞MMP1和MMP3免疫组织化学染色光密度（略）
与MG比较， *P0.05；n=24
3 讨论
有研究表明［7］，在8MOP与UVA的共同作用下，可迅速诱导体外培养真皮成纤维细胞衰老，为研究皮肤光老化提供了很好的体外培养细胞老化的实验模型。在该实验的研究结果显示，8MOP与UVA共同作用条件下，培养真皮成纤维细胞2 h后，培养成纤维细胞逐渐出现细胞老化的形态学改变，表现为细胞体积实质性增大，胞质内出现一些颗粒，细胞核体积略为减小，染色逐渐加深。维甲酸对皮肤光老化的防治作用已被大量的研究所证实［1~3］。虽然维甲酸的发展和应用已经经历了几代，但维甲酸见光易分解、对皮肤刺激性强、起效较慢、具有导致畸形等等缺点使其应用受到了很大的限制。芳维甲酸乙酯为第三代维甲酸的重要代表，具有低有效剂量、副作用相对较少的特性，在临床上已经广泛用于皮肤光老化的防治。该研究以芳维甲酸乙酯作为对照进行研究，探索中药人参提纯品人参皂苷Rb1对皮肤真皮成纤维细胞老化的防治作用，有坚实的实验基础和理论依据。在正常生理情况下，结缔组织产生的MMPs参与组织发育中的重构和组织损伤后的部分修复过程，避免间质水解引起组织过度损伤。有研究表明，在皮肤真皮的成纤维细胞胞质内，皮肤的损伤过程中有明显的MMPs的表达，尤其是MMP1和MMP3。在该研究的中，经紫外线照射和8甲氧补骨脂素作用后，培养成纤维细胞胞质内的MMP1和MMP3的表达明显增强，也证实其它研究者的实验结果［6，7］。成纤维细胞胞质内出现了明显的MMP1、MMP3的表达，以照射后48h最强，随后逐渐减弱，72 h逐渐恢复。这和Fisher等［9］报道的自然条件下日光照射引起的改变相一致。这表明MMPs的表达增强可能是长波紫外线辐射损伤的重要机制，也提示通过研究MMPs失衡的机制并进行调控，可能为防治皮肤光老化提供新的思路。作为传统名贵中药的人参应用于临床已有两千多年的历史。其内主要含有皂苷类。人参皂苷主要有Rb1，Rb2，Rc，Rd，Re，Rf等单体，大约有18种。除单体皂苷外还含有蛋白质、酶类、多肽、氨基酸、人参多糖等。现代医学证明人参皂苷具有抗肿瘤、调节免疫功能增强人体表面细胞的活力、抑制衰老等作用。中医临床上应用人参治疗很多疾病，都有显著的疗效，但是其作用机制尚不完全清楚。国内对人参单体和化合物进行了一些基础性研究，特别是近几年有关人参皂苷的研究报道日益增多［4，5］。在该实验中，结果表明人参皂苷Rb1对体外培养的真皮成纤维细胞胞质内MMP1、MMP3的表达的调节作用与芳维甲酸乙酯的相似，提示人参皂苷Rb1对皮肤老化可能具有与维甲酸相似的预防和治疗作用，并且其作用机制与芳维甲酸乙酯的作用机制可能相同或者相似，与成纤维细胞胞质内的MMP1、MMP3有密切关系。但人参皂苷要全面应用于临床皮肤光老化的防治，还需要进行大量的实验研究，本实验仅仅为此方面的研究提供一个新的思路和实验基础。
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