时间：2023-03-10 15:04:47
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专业的邀请函发放应该包括6个步骤：1、拜访计划2、引导交谈3、炒作会议讲者及讲课内容4、处理异议5、到会的确认6、跟进。下面笔者就用一个实例来加以说明。背景是XX公司要举办一次关于偏头痛的治疗与预防以及该公司产品某药品在偏头痛中的治疗经验交流的学术会议，大会主席是XX医院的W教授，邀请的讲者是山东XX医院A教授，时间是下周六下午两点。邀请对象是市级某三甲医院神经内科主任。
1，首先是炒作会议主题，这是需要做访前计划的，这个计划应该是围绕此次的学术会议主题所准备的，比如我们此次举办的是偏头痛的规范治疗学术会议，所以我们应当去了解目前医生是否有比较系统规范的治疗指南及流程。初步判定他所感兴趣的话题，来炒作会议主题，让他看到此次学术会议所能带给他的利益。这是价值利益销售的关键。其次请记住主任的时间是很宝贵的，所以你要在见面后最短的并且最合适的时间内将自己的拜访目的表述清楚，以至于不会让客户觉得你是在浪费他的时间。
“主任，您好！我是XX公司的小左，负责XX产品的，不知道您还有印象没？”
“哦，知道的，你有什么事吗？”
“我刚看门诊上患者还挺多的，偏头痛患者占了不少。您看您是这方面的专家，您一定在偏头痛的治疗上有自己很多经验，我今天是想就偏头痛的规范治疗和您做个探讨，耽误您5分钟您看可以吗？”
“偏头痛是吧？行，你坐。”
2，因为这里所用的是一个相关疾病问题所做的开场白，所以80%是可以得到允许的，接着就要开始引导交谈，探寻。我们可以运用引导交谈探寻技巧识别客户的需求，并通过开放式及封闭式提问漏斗般的得出真正的需求，并放大及确认引起他的重视。
“谢谢主任，您所遇到的偏头痛的患者应该是不计其数了吧，那么偏头痛对患者的生活，家庭造成了怎样的困扰呢？”
“偏头痛是一种常见病，多发病，对社会经济和患者生活都造成比较严重的影响，发病轻重不一啊，轻则影响正常工作生活，重则生活不能自理，并且最近两年确实有调查说偏头痛患者在逐渐增加，可能跟环境和压力也有很大关系。”
“那偏头痛就患者本身而言会导致什么样的后果呢？”
“那并发症多哦，像什么小脑梗死，脑白质病变，并且还有增加发生脑卒中及不稳定心绞痛的风险。”
“也就是说偏头痛不仅仅只是头痛，而是可以带来那么多不堪设想的隐患及后果，是吗？“
“确实是这样的。”
“如果有很好的治疗方案为患者进行系统的规范的治疗，能够缓解乃至改善症状，那么对患者来说可是对工作，生活，家庭都有了很大的帮助。那么您在这方面是专家，您是如何治疗偏头痛的呢？”
“偏头痛的治愈确实能为患者带来很大的变化，但是现在并没有一个系统的规范治疗方案，大家都是经验性治疗，根据偏头痛的类型啊，症状啊进行对症治疗，也很复杂，所以治愈率也不是很高。”
“也就是说，我们现在是缺乏一套规范的系统的治疗方案，如果有的话是对您和患者来说是能帮助解决当前很多问题的，是非常有价值的，对吗？”
“是的。”
3，上面已经确认出客户的真正需求，“一个系统的规范的治疗偏头痛方案”。这时候时机成熟，我们就可以立马亮剑----亮出我们能满足他需求的学术会议的邀请函。
“像您刚说到的这个问题，其他医院的老师确实也都存在，也令很多老师真的是头疼。我们为了推动湖北地区在治疗偏头痛领域发展，更好的加强学术交流，所以特别邀请了XX医院的A教授来做偏头痛的报告，交流偏头痛的诊断与防治专家共识，这是会议邀请函，刚好能为您在偏头痛治疗上带来一些新的学术信息。”
“哦，邀请的A教授是吧？”
“是的，A教授是中华医学会神经内科专业委员会的副主任委员，曾经还在美国XXX医院神经内科工作过，是《中华内科杂志》《临床神经病学杂志》等多本医学杂志的编委，也主编了多本著作。您应该知道他吧？”
4，当你做好了铺垫工作已经递上了邀请函时，客户多半会抛出异议，这个异议可能是客户真实担心的问题，也可能只是拒绝的托辞，所以我们应该按照处理异议的4步法则来进行处理。澄清--回答--核实--延续
“恩，A教授我知道，看过他的一些文章，还不错，是什么时候？”
“是的，A教授发表的很多关于神经内科学的文章都得了不少奖项。会议时间是下周六下午2点，因为考虑到各位老师周六一般下午有时间，所以特意安排在这个时候，并且提前一周来邀请，您也好安排时间。”
“那好吧，到时候有时间没有别的安排我会去的。”
5，其实到这里事情还没有敲定，他并没有和你达成协议，只是敷衍的说没别的安排是会去的。所以接下来我们的到会确认是非常重要的。
“不知道您对会议还有没有什么其他的担忧？”
“A教授的会以前我没有参加过，文章写的可以，但不知道讲的怎么样，本来这段时间医院就比较忙！”
“我理解您的担心，毕竟您的时间是很宝贵的，如果在一场毫无意义的会议上浪费几个小时是非常不值得的。而且主任您放心，公司特别注重此次会议，我们还特别邀请了湖北XX医院的W教授做大会主席，我们去邀请的时候，W教授听说是请A教授来讲，立马就答应了，因为他听过A教授的课，讲的非常好。加上我们所邀请的嘉宾全部是湖北地区神经内科的主任专家，是绝对保证会议质量的。您在神经内科界也是很有声誉的，您也可以将您在这方面的治疗经验分享给其他老师。所以说这次会议对您和对其他专家都是很有价值的。”
“下周六下午2点半是吧？好的。我会去的。”
“那您看我下周五早上再给您打个电话提醒下，怕您到时候事情一多给忘了时间，周六中午1点30我到您家楼下接您。您看可以吗？”
“那行，你直接到医院来接我吧，我早上还在医院上班。”
“好的，那我就不耽误您了，主任再见！”
“再见！”
6，邀请函是很成功的发送出去了，接下来所承诺的跟进也是不可缺少的环节。
定于XX年5月11日上午举行教学开放日活动。主题是:“共同学习，快乐体验”，现邀请您走进校园、走进教室，与孩子一起上课、一起参与活动，了解课堂管理、学校要求，体验孩子在校的学习生活，以此为契机探索教育孩子的方法，以便共同教育孩子。现把相关事项通知以下：
一、活动内容
1、听课。了解孩子上课表现、状态，了解上课常规及要求。
2、参观。参观学校、班级文化氛围建设，观摩课堂、课间活动，了解学校教育教学的要求和情况。
3、观看表演。观看学校跳绳队表演，了解学校特色教育，体验孩子丰富的学习活动。
4、参与活动。学校举行大课间毽绳体育活动，家长可以自带器材，与自己的孩子共同参与跳绳、踢毽球活动。
二、上课地点及时间安排
附1：家长开放日上课安排表
节次
课程
班级
第二节（9:15-9:55）
第三节(10:05-11:00)
科目
任教教师
上课地点
科目
主持教师
活动地点
一（1）班
音乐
xx
音乐室
读书主题活动
xx
一（1）课室
一（2）班
数学
xx
一（2）课室
xx
一（2）课室
二（1）班
数学
xx
二（1）课室
xx
二（1）课室
二（2）班
体育
x
足球场
xx
二（2）课室
三（1）班
电脑
科学
xx
xx
电脑室
自然室
xx
三（1）课室
三（2）班
数学
xx
三（2）课室
xx
三（2）课室
四（1）班
体育
xx
篮球场
xx
四(1)课室
四（2）班
英语美术
xx
xx
语音室
美术室
xx
四（2）课室
五（1）班
数学
xx
五(1)课室
xx
五（1）课室
五（2）班
数学
xx
五（2）课室
高芬芳
五（2）课室
六（1）班
英语
体育
xx
xx
电教室
羽毛球场
中小衔接主题班会
xx
六（1）课室
六（2）班
英语
xx
六(2)班
xx
六（2）课室
附2：家长开放日活动安排时间表
时间
活动安排
8：45—9：10
家长到校:参观学校、班级文化建设等
9：15—9：55
家长随堂听课。地点：子女所在班级
9：55—10：05
家长签到（各班主任处），课间休息
10：05－11：00
1---5年级读书主题活动。6年级中小衔接主题班会
11：00－11：10
课间休息
11：10－11：35
参与大课间活动。地点：学校操场
11:35—11:45
观看学校跳绳队表演。地点：学校篮球场
11：45－11：55
校长致辞
11：55－12：00
家长及学生退场，结束本次开放日活动
三、注意事项
1、因是正常上课时间，学校现有场地要用于学生活动，故不能提供停车位，请家长自行解决停车问题。
2、为了给学生一个榜样作用，请家长不要穿拖鞋、背心等参加活动，做到衣着整洁、大方。
3、学校安排了家长休息室，内设有吸烟区、饮水处。课间家长可以自行前往休息，校园内除休息室其余地方请不要吸烟。
4、为了不影响孩子们上课，请家长准时参加，在打预备铃后快速进入课室并保持安静。
您好！
碧桂花城学校真诚感谢您一直以来对我们各项工作的关心、支持、理解与信任。我们深知：学校一切成绩的取得都离不开您的关注与付出；学校的发展离不开您的关心和支持；孩子的成长更加离不开家长、学校的共同教育。
伴着您始终如一的信任与支持，花城学校凭借着鲜明的办学特色、突显的教育教学质量在佛山地区已步入名校之列，各项荣誉接踵而来，获奖喜讯频频不断，这是社会以及各级教育主管部门对我们工作的认可，更是鼓励和鞭策！
为进一步做好孩子的教育工作，加强学校和家长之间的沟通和交流，我们拟定于 XX年5月17日（星期五）下午举行家长会暨教学开放日活动。
本次活动，我们秉承一贯的做法，课堂将全面对外开放，届时将有54位老师的54节公开课对外展示。展示课结束之后，全校将举行体育大课间活动，充分展示孩子们良好的精神面貌，全面体现孩子们在学校的每一天都是开心的，每一天都是进步的！
我们期盼您的到来！真诚希望您对我们的工作提出宝贵意见！让我们家校联手，共育英才！
最后，祝您和您的家人身体健康，阖家欢乐！
此致
一年之计在于春，岁岁青草踏青生。美丽的****学校隐于**湖畔，山水与姹紫千红互辉映，花鸟与书香学子相映红，一副绝妙的春日山水画卷随山涧溪流掠影惊鸿。不可否认，这里不仅仅是蕴含春意的绝境，更是学子为学的圣境。对于孩子将要进入的中学，这样的景物绝佳处是否曾进入过您的眼里心里?在此，我们诚挚地邀请您及您的孩子在这山花烂漫时节光临****学校，参加“****学校开放日活动”，感受春日里那一抹学子书香!
活动时间：
**月**日 13:30—16:20
地址：******区**路***号
网址：
(具体线路详见网站首页“交通线路”)
活动流程：
13:30—14:30 聆听讲座 了解办学理念
14:50—15:50 欣赏表演 领略学生风采
16:00—16:30 参观校园 感受学校氛围
我们相信：
来访时，您一定会将车辆有序停放在校门外以维护校园安全;
参观时，您的一言一行一定会与****学校的校园氛围默契合拍;
离开前，您一定乐于为****学校留下宝贵的意见和建议。
请您发短信致手机号码***********进行预约，发送格式为:孩子姓名+毕业小学名称+参加人数。为保证“****学校开放日活动”安全有序，请您务必携带此邀请函参加活动!
春天里，期待与您相约在美丽的**湖畔!
【关键词】 复方中药； NCI-H460细胞； 血清药理学
随着环境污染的增加及人们各种不良的生活习惯，癌症的发病率正在不断上升[1]。癌症是一大类恶性肿瘤的统称，是目前严重危害人类健康的一大顽症，严重威胁着人类的生活质量，被称为人类健康的第一杀手[2]。肺癌属于中医学肺积、咳嗽、咯血、胸痛等范畴，一般认为肺癌的发生是由于人体正气不足，阴阳气血失调，使脏腑经络的功能发生障碍，机体抗病能力降低，邪气乘虚而入，滞留于肺，日久形成肿块而成肺癌[3]。目前，癌症的预防和治疗方法已经有很多，虽然疗效显著，但是毒副作用大的问题使很多药的临床应用受到了限制[4]。中草药以其毒副作用小、不易产生耐药性的优点在肿瘤治疗领域越来越受重视。中草药复方、单味药提取物或一些单体成分可抑制脂质过氧化反应、清除活性氧自由基、提高机体抗氧化酶活力[5-6]，从而抑制癌症。近年来，中草药在抗癌方面取得了很大的成就，其机制是非常复杂的，不能简单的用现代医学的某个观点来概括说明[7]。中医药对肿瘤治疗的主要理论基础是扶正、固本、驱邪，目前的研究主要集中于单味药的研究，多为体外试验[8]。本研究采用了夏枯草、胆南星、玄参、龙血竭、冰糖草等8种中草药，共有3个复方，各复方中草药的配伍组成和含量不同，A复方由8种中草药组成，B复方由其中4种中草药配伍组成，C复方由其中2种中草药配伍组成。夏枯草为唇形科夏枯草属植物，主要含有三萜及其苷类 苯丙素类、甾醇及其苷类、黄酮类、香豆素、有机酸、挥发油及糖类等[9]，味辛、苦，性寒，有降糖、降压、抗菌、抗病毒、抗炎、抗肿瘤及活血化瘀等功效[10]。胆南星为制天南星的细粉与牛、羊或猪胆汁经加工而成，或为生天南星细粉与牛、羊或猪胆汁经发酵加工而成，在临床上用于痰热咳嗽，咳痰黄稠，中风痰迷，癫狂惊痫等症[11]。玄参为玄参科植物玄参的干燥块根，是常用的传统中药；其味甘、苦、咸、性微寒，具凉血滋阴、泻火解毒的功效[12]，现临床主要用于热病烦渴、发斑、齿龈炎、扁桃体炎、急性淋巴结炎等[13]。龙血竭又名麒麟竭，为传统名贵中药，国产龙血竭的化学成分有黄酮、苷类、酚类、糖类等化合物[14]，龙血竭不溶于水，具有抗炎、止痛的作用，能抑制毛细血管的通透性，减少渗出，明显抑制肿胀、缩短凝血时间，促进创面愈合，有效改善机体的免疫功能[15]。冰糖草为玄参科植物野甘草的全草，是壮族地区常用的一味壮药，其味甜，性凉，具有清热毒、除湿毒、通气道和水道的功效[16]，主治感冒发热，肺热咳嗽，咽喉肿痛，肠炎，痢疾，脚气水肿等[17]。我国现有中药材资源12 807种，是世界上最大的药材生产国。以传统中草药的理论和数千年临床实践为基础，结合现代药学理论和技术，严格进行药学、药效学与临床研究，抗癌中草药的开发和临床应用将有新的更大进展[18]。本课题采用血清药理学联合MTT法，研究3种复方中药对人大细胞肺癌细胞株NCI-H460细胞的体外抑制作用。现报道如下。
1 材料与方法
1.1 实验动物和细胞株 健康成年的SD大鼠（200±20）g，SPF级，雌雄各半，由广西医科大学实验动物中心提供，实验动物生产许可证号：SCXK桂2014-0002，实验动物使用许可证号：SCXK桂2014-0004。人大细胞肺癌细胞NCI-H460购于中国科学院上海细胞库。
1.2 实验药物 由夏枯草、胆南星、玄参、龙血竭、冰糖草等8种中草药按不同比例组成，由北海博铧医院提供。注射用环磷酰胺，0.2 g/mL，百特医疗用品贸易有限公司，批号：5F063A。
1.3 实验器材 超净工作台、CO2培养箱、倒置显微镜、台式离心机、酶标仪、电子天平、恒温水浴锅、高压灭菌器、-80 ℃低温冰箱。
1.4 实验方法
1.4.1 含药血清制备实验
1.4.1.1 3种复方中药的制备 称取夏枯草、胆南星、玄参、龙血竭、冰糖草等8种中草药按不同比例用纯净水提取，A复方，由以上8种中草药组成；B复方由以上中草药中的4种组成；C复方由以上中草药中的2种组成，浓缩药液浓度至0.1 g/mL，置冰箱4 ℃保存备用。
1.4.1.2 注射用环磷酰胺的制备 环磷酰胺治疗肝癌的成人日用量为4 mg/kg，每日或隔日1次。根据人和动物间每公斤体重折算系数表，换算出大鼠的剂量为成人用量的6倍左右（即25 mg/kg）。
1.4.1.3 含药血清的制备 SPF健康成年的SD大鼠15只，随机分为5组，即空白组、A复方组、B复方组、C复方组和环磷酰胺组，每组3只。给药前禁食不禁水12 h，空白组灌胃等量的生理盐水，A复方组、B复方组和C复方组分别以2000 mg/kg灌胃，环磷酰胺组以25 mg/kg腹腔注射。2次/d，
间隔12 h，连续给药3 d。末次给药后1 h腹主动脉取血，取血后室温下静置4 h，3000 r/min离心
15 min，分离血清，经56 ℃水浴灭活30 min后，0.22 ?m微孔滤膜过滤除菌，混合分装于2 mL EP管中，置-20 ℃保存备用。
1.4.2 体外抑瘤实验（MTT法）
1.4.2.1 细胞培养 从-80 ℃低温冰箱中取出人大细胞肺癌NCI-H460细胞，迅速放于37 ℃水浴锅中，并来回晃动使其在1 min内完全融化。在超净台中取出细胞转移至15 mL离心管内，在1000 r/min离心5 min，弃去上层液体，将人大细胞肺癌NCI-H460细胞置于含有10%胎牛血清及双抗的RPMI 1640培养液中培养，将培养瓶置于37 ℃、5%CO2的恒温培养箱内培养，待细胞养至覆盖培养瓶瓶底80%～90%，用0.25%胰蛋白酶（1%胰酶∶0.2%EDTA=1∶3）M行消化，当细胞处于对数生长期后进行实验。
1.4.2.2 MTT法检测 用不含血清的培养基将含药血清稀释成5%、10%、20%、30%的浓度。取对数生长期的细胞株NCI-H460细胞，用胰酶消化后制成细胞悬液，调整细胞浓度至5×104个/mL，接种于96孔培养板，每孔0.1 mL细胞悬液，板周边的孔不加细胞，留空白调零，即只加培养液不加细胞，将培养板置于37 ℃、5%CO2的恒温培养箱内培养24 h。贴壁后吸出原培养液，分别加入空白组、依癌胶囊组和环磷酰胺组各个浓度的含药血清培养液，每组设5个复孔，继续培养24、48 h后，每孔加入5 g/L的MTT溶液10 ?L，37 ℃、5%CO2的恒温培养箱内培养4 h后，吸出原培养液，加入150 μL的二甲基亚砜（DM-SO），振荡10 min，在酶标仪上于510 nm处测定每孔的吸光度（OD值），重复测3次。计算药物对细胞的抑制率：抑制率（IR）=（1-实验组平均OD值/对照组平均OD值）×100%。
1.5 统计学处理 采用SPSS 17.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验；计数资料以率（%）表示，比较采用 字2检验。以P
2 结果
在所选的浓度范围内，3种复方中药含药血清对体外培养的NCI-H460细胞均有明显的抑制作用，其中B复方组对NCI-H460细胞的抑制效果要较对A复方组和C复方组更显著。24 h时，5%、10%、30%浓度的含药血清对NCI-H460细胞抑制率：B复方组>环磷酰胺组>A复方组>C复方组；20%浓度的含药血清对NCI-H460细胞抑制率：B复方组>环磷酰胺组>C复方组>A复方组。48 h，5%、10%、20%、30%浓度的含药血清对NCI-H460细胞抑制率：B复方组>环磷酰胺组>A复方组>C复方组。A复方组、B复方组、C复方组各浓度的含药血清与空白组比较差异均有统计学意义（P
3 讨论
肺癌是一种比较常见的恶性肿瘤，近年来，世界各国肺癌的发病率和死亡率均有明显增高的趋势[19]。中草药治疗恶性肿瘤以其毒副作用小的优点广为大家接受，中药及其复方制剂能够通过多种不同途径、多种方法应用于抗肿瘤临床治疗中，发挥独特作用，尽可能避免正常细胞受到损伤，药物毒副作用很小[20]。随着中医中药在国际社会受重视的程度越来越高，中药治疗肿瘤将成为癌症治疗的一种重要途径[21]。夏枯草、胆南星、玄参、龙血竭、冰糖草等8种中草药均为我国传统的中药材，在杀灭肿瘤细胞和缓解症状体征方面有明显效果。
本课题采用血清药理学联合MTT法，研究
3种复方中药对人大细胞肺癌细胞株NCI-H460细胞的体外抑制作用。结果显示，在所选的浓度范围内，3种复方中药含药血清对体外培养的NCI-H460细胞均有明显的抑制作用，差异均有统计学意义（P
参考文献
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益气消积方（Yiqi Xiaoji Recipe， YQXJR）是根据上海交通大学医学院瑞金医院中医科主任沈小珩教授十多年致力于肿瘤研究的临床经验，并结合临床实践总结而出的新一代抗癌复方，临床观察对胃癌有较好的治疗作用。本次实验采用益气消积方含药血清，温育体外培养的人胃癌NKN28细胞，通过甲基噻唑基四唑（methyl thiazolyl tetrazolium， MTT）法检测细胞增殖抑制作用，研究该方对体外培养的人胃癌NKN28细胞生长的影响。
1 材料与方法
1.1 实验材料 SD大鼠50只，雄性，清洁级动物，体质量（250±30）g，由上海交通大学医学院瑞金医院动物房提供；人胃癌高分化腺癌细胞系NKN28细胞，由上海瑞金医院消化内科实验室负责孵育提供；益气消积方主要由黄芪、全蝎和白花蛇舌草等组成，生药购自上海瑞金医院中药房，由中药房代煎，上海中药研究所实验室浓缩而成，含生药量为2.8 g/ml；RPMI1640培养液、胰蛋白酶为Gibco公司分装，批号31800022；新生牛血清，杭州四季青生物工程材料研究所产品；MTT，上海实生细胞生物技术有限公司；二甲基亚砜（dimethyl sulphoxide， DMSO），美国Fisher科学世界公司香港分公司产品；TE2000U多功能倒置相差显微镜，日本Nikon公司产品；MK3酶标仪，芬兰雷勃公司产品。
1.2 益气消积方含药血清的制备
1.2.1 含药血清的制备 选用正常SD大鼠36只，禁食12 h后，予益气消积方煎液灌胃给药。大鼠分为3个剂量组（每组12只）分别给药，给药剂量分别为，低剂量组1.17 g/kg，中剂量组5.85 g/kg，高剂量组11.7 g/kg，分别相当于60 kg成日用量的同倍、5倍、10倍。给药方式为每天分2次给药，即采用一次及二次重复（2 h后相同剂量重复给药一次）给药方法。连续灌胃3 d，第3天第1次给药2 h后再给药1次，1 h后，乙醚麻醉，无菌条件下腹主动脉取血，静置2 h以上，1 500 r/min，离心15 min，10 min后取血清，按灌胃浓度分别混合，56 ℃，30 min灭活，分装，－20 ℃冰箱保存备用［1］。
1.2.2 大鼠正常血清制备 对照组SD大鼠14只用生理盐水灌胃，每只2 ml/次，2次/d，连续3 d。于第3天第1次灌胃2 h后再灌胃1次，1 h后，乙醚麻醉，无菌条件下腹主动脉取血，静置2 h以上，1 500 r/min，离心15 min，10 min后取血清，56 ℃，30 min灭活，分装，－20 ℃冰箱保存备用。
1.3 细胞培养 NKN28细胞株常规培养于含10％新生牛血清的RPMI1640培养基（含硫酸庆大霉素0.025 U/ml）中，于37 ℃、5％ CO2孵育箱中进行连续培养［2］。
1.4 倒置显微镜下细胞生长状态观察 上述培养细胞，去掉培养液，分别加入以上各组血清，在CO2培养箱中继续培养24 h和48 h，将培养瓶在倒置显微镜下作生长状态观察。
1.5 细胞抑制率的检测 取浓度为1×105个/ml处于对数生长期贴壁生长的人胃癌NKN28细胞，按1×104个细胞/孔的浓度接种于96孔培养板（200 μl/孔），放入37 ℃，5% CO2培养箱中培养24 h后取出，吸弃培养板上清后加入高、中、低浓度含药血清及空白血清，每种浓度设1/2、1/4、1/8、1/16四种不同比例，200 μl/孔，每种比例设6个复孔。放回培养箱中，使药物与细胞共同孵育48 h和72 h。取出培养板，向每孔加入MTT 20 μl，继续培养2 h后终止培养，小心吸去孔内上清，每孔加入DMSO 150 μl，再放回培养箱中培养30 min，使结晶物充分溶解之后，在酶联免疫检测仪570 nm处读取各孔光密度值（即OD值）。抑瘤率（％）=（1－OD实验组/OD对照组）×100［3］。
1.6 统计学方法 采用SPSS 11.5统计软件包进行数据分析，计量资料以x±s表示，组间比较用单因素方差分析和LSD检验。
2 结果
2.1 人胃癌NKN28细胞生长状况 倒置显微镜下，对照组的人胃癌NKN28细胞可见贴壁生长，细胞形态呈梭形，胞浆均匀，细胞透明，相邻细胞生长融合成片；而经含药血清处理的各组细胞，24 h可见细胞由贴壁而脱落，至48 h脱落更明显，脱落细胞悬浮于培养液中，细胞形态变圆或不规则，细胞变暗。比较含药血清各组细胞生长状况，以高剂量组含药血清组作用48 h脱落最明显。说明益气消积方有抑制人胃癌NKN28细胞生长的作用，呈现一定的时间浓度依赖性。
2.2 MTT检测结果
2.2.1 48 h不同浓度不同比例含药血清的抑瘤作用 经单因素方差分析，四组48 h不同浓度不同比例含药血清对人胃癌NKN28细胞的抑瘤率差异有统计学意义（P＜0.01）。经LSD组间检验，在1/2、1/4血清比例时，高、中剂量组的抑瘤率均明显高于空白血清组，差异有统计学意义（P＜0.01），低剂量组的抑瘤率略高于空白血清组，差异无统计学意义（P＞0.05）；在1/8血清比例时，高剂量组的抑瘤率高于空白血清组，差异有统计学意义（P＜0.01），中、低剂量组的抑瘤率略高于空白血清组，差异无统计学意义（P＞0.05）；在1/16血清比例时，高、中、低三个剂量组的抑瘤率略高于空白血清组，差异无统计学意义（P＞0.05）。同时1/2、1/4、1/8血清比例时，高剂量的抑瘤率明显高于各低剂量组，差异有统计学意义（P＜0.05）；1/16血清比例时，高剂量的抑瘤率略高于各低剂量组，差异无统计学意义（P＞0.05）。说明益气消积方有抑制人胃癌NKN28细胞增殖的作用，其抑制作用以高剂量组最佳。见表1。
2.2.2 72 h不同浓度不同比例含药血清的抑瘤率 经单因素方差分析，四组72 h不同浓度不同比例含药血清对人胃癌NKN28细胞的抑制率差异有统计学意义（P＜0.01）。经LSD组间检验，在各血清比例时，高剂量组的抑制率均高于空白血清组，差异有统计学意义（P＜0.01）。在1/2、1/4血清比例时，中剂量组的抑制率高于空白血清组，差异有统计学意义（P＜0.01）；在1/2血清比例时，低剂量组抑瘤率高于空白血清组，差异有统计学意义（P＜0.01）。在各血清比例时，高剂量组的抑瘤率均高于各低剂量组，差异有统计学意义（P＜0.01）。说明益气消积方有抑制人胃癌NKN28细胞增殖的作用，且这种抑制作用随着中药浓度及时间的增加而有所提高。见表2。
表1 48 h不同浓度不同比例含药血清的抑瘤率（略）
Table 1 Inhibition rates of NKN28 cells after 48hour treatment of four groups of rat serum
*P＜0.05， vs normal control serum group; P＜0.05， vs highdose group.
表2 72 h不同浓度不同比例含药血清的抑瘤率（略）
Table 2 Inhibition rates of NKN28 cells after 72hour treatment of four groups of rat serum
*P＜0.05， vs normal control serum group; P＜0.05， vs highdose group.
3 讨论
本实验采用血清药理学方法观察了益气消积方含药血清抑制人胃癌NKN28细胞增殖的作用。益气消积方以黄芪益气扶正为君药，白花蛇舌草和全蝎清热、解毒、消积为臣药。药理研究证实白花蛇舌草提取物能激活T细胞，使其释放干扰素γ，杀死肿瘤细胞，具有抗突变、抗烟焦油对淋巴细胞DNA的杀伤和增强人体非特异性免疫功能的作用；白花蛇舌草中含有微量元素如有机锗，对氧自由基有较强的清除作用［4］。马氏钳蝎蝎毒可抑制和阻断人食管癌细胞从G0/G1向S期增殖，从而抑制癌细胞增殖。其抗肿瘤作用，一是通过增强免疫功能取效，二是通过抑制癌细胞内DNA合成，直接影响肿瘤的生存和增殖［5］。本实验表明，益气消积方有较好的抑制人胃癌NKN28细胞生长的作用，且这种抑瘤作用呈现出时间、浓度依赖性。
参考文献
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【关键词】 内质网; 衣霉素; 葡萄糖调节蛋白78; 凋亡促进因子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白; 小鼠
内质网（endoplasmic reticulum， ER）广泛存在于真核细胞中，是蛋白质合成、折叠、运输以及细胞内钙离子储存的主要场所。内质网中钙离子紊乱和未折叠蛋白质蓄积可引发内质网应激（endoplasmic reticulum stress， ERS），发生具有保护作用的未折叠蛋白反应（unfolded protein response， UPR）。内质网应激直接影响应激细胞的转归，如修复、损伤或凋亡。神经系统许多疾病与内质网应激相关。最近的研究表明，内质网应激介导的凋亡信号传导途径可能与阿尔茨海默病（Alzheimer disease， AD）的发病有关。本研究观察滋补脾阴方药（Zibu Piyin Recipe， ZBPYR）含药血清对由N糖链抑制剂衣霉素（tunicamycin， Tm）引起的内质网应激的影响，以探讨其神经保护机制。
1 材料与方法
1.1 实验药物 滋补脾阴方药由清代吴澄《不居集》中资成汤加味而成，由红参30 g，山药15 g，茯苓15 g，白芍15 g，丹参12 g，白扁豆15 g，莲肉20 g，石菖蒲10 g，远志10 g，檀香4.5 g，橘红9 g，甘草9 g组成，均购自大连医药集团药材公司。中药常规水煎，每毫升中药液含生药3.29 g，4 ℃保存备用。
1.2 主要试剂和仪器 达尔伯克改良伊格尔培养基（Dulbecco's modified eagle's medium， DMEM)和胎牛血清，Gibco公司产品；胰蛋白酶和TRIReagent，Sigma公司产品；Tm，星形孢菌素（staurosporine， STS），日本Wako公司产品；细胞毒性检测试剂盒，Roche公司产品；RNase OUT和Oligo (dt)，Invitrogen公司产品。二氧化碳恒温培养箱，Thermo Forma公司产品；台式高速冷冻离心机，Sigma公司产品；UV754紫外分光光度计，上海分析仪器总厂产品；温度梯度PCR扩增仪，Thermo Hybaid公司产品；酶标仪，美国BIOTEKTM公司产品；凝胶成像分析系统，UVP公司产品。
1.3 中药血清制备 取健康雄性SD大鼠（220～250 g）12只，随机分为对照组和ZBPYR组，每组6只。适应饲养3 d后，ZBPYR组给予滋补脾阴方药灌胃，10 ml/kg体质量，此剂量灌胃2次/d，连续3 d；对照组给予等体积生理盐水灌胃。于末次给药后1 h腹主动脉取血，静置2 h，2 000 r/min，4 ℃离心15 min分离血清，离心半径为16.1 cm，56 ℃，30 min灭活。0.22 μm滤膜过滤除菌，－20℃保存备用。
1.4 Neuro2a细胞的培养 小鼠神经瘤母细胞Neuro2a细胞株由日本北海道大学药学部野村靖幸教授惠赠。细胞常规复苏后加入培养液于5% CO2、37 ℃培养箱培养。细胞单层长满后用终浓度为0.25%胰蛋白酶37 ℃条件下消化3 min，以1∶3传代。培养液含90% DMEM、10%胎牛血清和1％双抗。细胞长至第三代可以使用。
1.5 乳酸脱氢酶释放试验 Neuro2a细胞接种后分为对照组、10％空白血清组、5％ZBPYR组、10％ZBPYR组、15％ZBPYR组、Tm（5 μg/ml）组、10％空白血清＋Tm（5 μg/ml）组、5％ ZBPYR＋Tm（5 μg/ml）组、10％ ZBPYR＋Tm（5 μg/ml）组、15％ ZBPYR＋Tm（5 μg/ml）组。细胞单层长至70％时按以上分组给予相应刺激。刺激后细胞放入5％CO2、37℃培养箱继续培养48 h后用乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase， LDH）释放试验检测LDH泄漏率。LDH实验步骤按试剂盒说明执行。LDH泄漏率为细胞上清中LDH活性与细胞总的LDH活性比值。LDH活性测定用酶标仪于490 nm处检测。另外Neuro2a细胞接种后分为对照组、STS（0.1 μmol/L）组、10％空白血清＋STS（0.1 μmol/L）组、15％ ZBPYR＋STS（0.1 μmol/L）组，待细胞单层长至70％时按以上分组给予相应刺激。刺激后细胞放入5％ CO2、37 ℃培养箱继续培养48 h后检测LDH泄漏率。
1.6 逆转录聚合酶链式反应 实验分组同前。细胞单层长至90％时按以上分组给予相应刺激。细胞放入5％ CO2、37 ℃培养箱继续培养6 h。总RNA的提取和逆转录聚合酶链式反应。（1）收集细胞用TRIReagent提取总RNA。用紫外分光光度计测定A260/A280，计算RNA浓度。（2）逆转录反应。反应体系为20 μl。取2 μg总RNA，加二乙基焦磷酰胺（diethyl pyrocarbonate， DEPC）水至总体积为9 μl，加0.5 μl Oligo (dt) 1218引物混合后，置70 ℃变性10 min。然后加入下列成分：5×第一链缓冲液5.875 μl、10 mmol/L dNTP 2 μl、0.1 mol/L DTT 2 μl、RNase抑制剂0.5 μl和逆转录酶0.125 μl，混合使反应总体系为20 μl。放入46 ℃反应1.5 h，70 ℃变性15 min，冰上5 min后进行扩增。（3）PCR反应。在0.2 ml PCR管中加入1.2 μl逆转录产物、sd H2O 9 μl、10 mmol/L dNTP 0.24 μl、10×PCR缓冲液1.2 μl、聚合酶0.12 μl、上游引物（20 μmol/L）0.12 μl、下游引物（20 μmol/L）0.12 μl，总反应体系为12 μl。（4）PCR产物观察。PCR产物经40％丙烯酰胺凝胶电泳后，EB染色15 min，用凝胶成像系统进行拍照及图像分析，然后计算待测基因与内标磷酸甘油醛脱氢酶（glyceraldehyde phosphate dehydrogenase， GAPDH)吸光度的比值。PCR反应扩增参数如下：葡萄糖调节蛋白78（glucose regulated protein 78， GRP78），94 ℃ 5 min，94 ℃ 1 min，55 ℃ 1 min，72 ℃ 1 min，循环22圈，72 ℃ 5 min；凋亡促进因子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CCAAT/EBP homologous protein， CHOP），94 ℃ 5 min，94 ℃ 1 min，60 ℃ 1 min，72 ℃ 1 min，循环25圈，72 ℃ 5 min；GAPDH，94 ℃ 5 min，94 ℃ 40 s，58 ℃ 30 s，72 ℃ 40 s，循环28圈，72 ℃ 5 min。引物序列见表1。
表1 引物序列（略）
Table 1 Sequence of the primers
1.7 统计学方法 每组实验重复4次，图像分析采用LabWorks 4.6专业图像分析软件。数据用SPSS 13.0软件进行分析，两组间差异比较采用t检验。
2 结果
2.1 LDH释放试验检测ZBPYR含药血清对Tm刺激Neuro2a后LDH泄漏率的影响 各浓度含药血清和10%空白血清组与对照组相比，LDH泄漏率差异没有统计学意义，说明血清对Neuro2a细胞没有毒性作用；Tm（5 μg/ml）组与对照组相比，LDH泄漏率明显升高，差异有统计学意义（P＜0.01）；10％空白血清预处理组LDH泄漏率与Tm组相比，差异无统计学意义；而各浓度ZBPYR含药血清预处理组与Tm组相比，LDH泄漏率下降明显，差异有统计学意义（P＜0.05）。10％药物血清预处理组与10％空白血清预处理组相比，差异有统计学意义（P＜0.05）。见图1。
2.2 RTPCR方法观察ZBPYR含药血清对Tm刺激Neuro2a后GRP78 mRNA表达的影响 各浓度含药血清和10%空白血清组与对照组相比，GRP78 mRNA表达差异无统计学意义，说明血清对Neuro2a细胞GRP78 mRNA表达没有影响；Tm（5 μg/ml）组与对照组相比，GRP78 mRNA表达明显增强(P＜0.05)；而加入血清预处理1 h后再加入浓度为5 μg/ml Tm各组与Tm（5 μg/ml）组相比，GRP78 mRNA表达明显下降(P＜0.05)，其中ZBPYR含药血清预处理组GRP78 mRNA表达较空白血清预处理组GRP78 mRNA表达下降更加明显(P＜0.05)。见图2。
2.3 RTPCR方法观察ZBPYR含药血清对Tm刺激Neuro2a后CHOP mRNA表达的影响 各浓度含药血清组与对照组相比，CHOP mRNA表达差异无统计学意义，说明血清对Neuro2a细胞CHOP mRNA表达没有影响；Tm（5 μg/ml）组与对照组相比，CHOP mRNA表达增强（P＜0.05）；10％空白血清预处理组与Tm（5 μg/ml）组相比，CHOP mRNA表达差异无统计学意义；而各浓度ZBPYR含药血清预处理组CHOP mRNA表达与Tm（5 μg/ml）组相比，差异有统计学意义（P＜0.05）；10％药物血清预处理组与10％空白血清预处理组相比，CHOP mRNA表达差异有统计学意义（P＜0.05）。见图2。
图1 LDH检测Tm刺激细胞后各组细胞LDH泄漏率（略）
Figure 1 LDH leakage from each group treated by Tm
**P＜0.01， vs normal control group; P＜0.05， P＜0.01， vs Tmtreated group; P＜0.05， vs 10％ control serumtreated group (n=4 for each group).
图2 RTPCR法观察Tm刺激各组细胞后GRP78和CHOP mRNA表达（略）
Figure 2 Expressions of GRP78 and CHOP mRNAs in different groups treated by Tm (RTPCR)
Results of RTPCR electrophoresis from each group and values of IOD from each group (n=4 for each group). *P＜0.05， vs normal control group; P＜0.05， vs Tmtreated group; P＜0.05， vs 10％ control serumtreated group.
2.4 LDH释放试验检测STS刺激Neuro2a后LDH泄漏率的变化 STS 0.1 μmol/L组与对照组比，LDH泄漏率升高（P＜0.01）；而加入15％空白血清预处理组与STS组相比，LDH泄漏率下降（P＜0.05）；15％ ZBPYR含药血清预处理组与STS组相比，LDH泄漏率下降（P＜0.01）；15％ ZBPYR含药血清预处理组与15％空白血清预处理组相比LDH泄漏率下降更加明显（P＜0.05）。见图3。
图3 LDH检测STS刺激细胞后各组细胞LDH泄漏率（略）
Figure 3 LDH leakage from each group treated by STS
**P＜0.01， vs normal control group; P＜0.05， P＜0.01， vs STStreated group; P＜0.05， vs 15％ control serumtreated group (n=4 for each group).
3 讨论
ERS是细胞的一种应激反应过程，糖饥饿、钙平衡紊乱、糖基化抑制和二硫键合成减少等情况下，内质网的微环境发生改变，蛋白质的折叠受到影响，导致大量未折叠或错误折叠的蛋白质堆积于内质网内，由此引起一系列以分子伴侣和折叠酶表达上调为标志的应答反应，称为未折叠蛋白反应（unfolded protein response， UPR）。通过UPR细胞才能在应激情况下存活。分子伴侣GRP78与凋亡促进因子CHOP是ERS时表达增多的两种分子，被看作是ERS的标志，在ERS中起着不同的作用。其中GRP78能保护细胞，而CHOP则是促进细胞凋亡。因此通过药物干预后研究它们的表达情况可以进一步了解药物对ERS的作用。AD是一种常见的神经退行性疾病，病理特征为淀粉样蛋白的沉积、神经原纤维缠结、tau蛋白异常磷酸化和区域选择性神经元死亡［1］。AD与基因突变有关，主要有编码淀粉样蛋白前体基因（amyloid protein precursor， APP）和早老素（presenilin， PS）基因，这些基因都与内质网有关。AD相关的早老素突变，诱导内质网应激反应并且通过改变APP的蛋白水解加工作用而部分地增强对应激诱导的凋亡的易损性。PS1突变通过细胞表面有活性的钙离子流入的直接减少，不依赖APP，并间接地通过APP处理作用和淀粉样肽的产生增加内质网钙离子释放来解除对神经元钙离子稳态的控制。这种钙离子稳态的干扰将改变APP的加工，过量生成β淀粉样蛋白142(amyloid βprotein 142， Aβ142)，同时内质网钙失衡，激活钙蛋白激酶，切割内质网膜上的caspase12，从而激活caspase12介导的内质网特异性凋亡路径，最终形成AD的病理变化［2］。除了钙离子失调，PS突变下调UPR并增强对内质网应激的易损性［3］。PS1突变还诱导了一个内质网中与应激介导的凋亡途径有关的凋亡前因子CHOP的表达［4］。PS是γ分泌酶复合物的一部分，与β分泌酶一起，裂解APP产生Aβ，并且PS突变增加总Aβ和Aβ142的产生。Aβ能直接引发内质网的钙离子释放并且诱导了内质网应激和神经毒性［5］。因而，在AD中内质网应激是引发和调节神经元死亡的一个主要事件。现有研究显示在AD神经元死亡中内质网应激凋亡途径和线粒体损伤的凋亡途径相互影响，起着调控凋亡级联反应的作用［6］。中医认为人体的生长、发育和衰老与“肾”密切相关。“肾精虚衰”是衰老的主要原因。同时又认为“脾胃为血气阴阳之根蒂”，“脾胃既和，其人寿；脾胃不和，其人夭”，因此也重视奉养脾胃精气在延年中的作用［7］。老年痴呆发病于老年期。老年期脾胃气衰，饮食减少，脾虚则化源不足，脑髓失养，神机失调而发为本病。因此脾虚是老年性痴呆的基本病机，脾的功能衰退在老年性痴呆发病过程中起着主导作用，并贯穿于全过程［8］。脾的生理功能是脾之阴阳共同作用的结果。脾阴是指存在于脾脏的阴液（包括血、津液和水谷精微等）和脾的物质形态及其滋润濡养功能。由于脾与大脑关系密切，脾阴亏虚严重影响大脑的意识、学习、思维、记忆和情绪等功能，导致一系列与脑相关的精神意识病证如意识不清、学习记忆能力下降和情绪失常等。因此，滋补脾阴应当是防治老年痴呆的一个重要措施。滋补脾阴方药由清代吴澄《不居集》中资成汤加味而成，以人参补脾益气生津，山药益胃补脾养阴，白芍养阴缓急，丹参活血养血益阴，茯苓健脾安神益智等，共奏健脾益阴之效。本组以往的研究显示，滋补脾阴方药能通过改善老龄大鼠脑细胞线粒体膜Na+K+ATP酶、Ca2+Mg2+ATP酶活性，调节膜磷脂代谢障碍和修饰膜的作用［9］，以及延缓兴奋性氨基酸受体N甲基D门冬氨酸（NmethylDaspartic acid， NMDA）受体、γ氨基丁酸（gammaaminobutyric acid， GABA）受体染色阳性神经元在衰老过程中丧失，同时抑制神经胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein， GFAP）的表达，起到神经保护、延缓脑衰老的作用［10］。本实验中Tm刺激Neuro2a细胞LDH释放试验结果表明，在加入滋补脾阴方药含药血清预保护后，可以明显降低Tm刺激细胞后的LDH泄漏率，结合RTPCR观察到滋补脾阴方药含药血清预处理后，内质网应激标志物GRP78及CHOP mRNA的表达受到抑制，两种实验结果的同步性可以推断滋补脾阴方药具有抑制内质网应激的作用。STS刺激Neuro2a细胞LDH释放试验结果表明，加入滋补脾阴方药含药血清预处理后，可以明显降低STS刺激细胞后的LDH泄漏率（STS是线粒体凋亡途径诱导剂）。因而表明滋补脾阴方药同时具有保护线粒体损伤的作用。以上的研究结果为滋补脾阴方药应用于临床防治AD提供了依据。AD是一种常见的神经退行性病变，其发病机制复杂，目前尚无有效的治疗手段，对社会和人们的生活造成严重的负担。现有的研究表明，神经元的凋亡在AD的发病过程中起着重要的作用。而内质网应激凋亡途径和线粒体损伤的凋亡途径已被证明在AD的发病过程中起着协同作用。我们的实验证明，滋补脾阴方药对内质网应激凋亡途径和线粒体损伤的凋亡途径具有双重作用，因而有助于AD的防治，加之中药治疗有着毒副作用低、经济实惠的优点，更易于为人们所接受。
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同学聚会邀请函如何写一
亲爱的同学们：
光阴似箭，日月如梭，转眼间我们已经毕业xx年了。xx年光阴弹指一挥，人生沧海桑田。亲爱的同学们：您是否会时常回忆起我们的青春岁月?您是否会时常怀念起同学间的纯真情感?您是否会盼望能再次欢聚一堂，畅叙阔别之情?
你的心情现在好吗?你的一切还算顺利吗?当我们用自己的智慧和汗水，在创造生活和实现自我价值的过程中品味了人生的酸、甜、苦、辣之后都会发觉：让我们最难以忘怀和割舍不掉的依旧是那份学生时代的同窗友情。不是吗?多少寝室里的欢笑、多少操场上的打闹、多少校园里的往事不是常常出现在你我的梦里吗?留言薄上的美好祝福、分手时的相互嘱托、校门口的挥泪告别不也是常常闪现在你我的眼前吗?如今我们还能再以忙碌为由，而去淡漠彼此间的同窗情谊吗?往事难忘，温馨如昨，依然常驻心头;悲欢岁月，依稀如梦，但愿你还记得我!我们和你一样，多少次梦里相聚，多少次心驰神往!
我们很想约你，约你去往事里走走，听听久违的声音，看看久违的面孔，说说离别的思绪 尽管我们知道你很想抑制内心的期盼与波澜。但是这样难得的欢聚，会因你的缺席而黯然失色，更令我们黯然神伤!就让你我暂时抛开尘世的喧嚣、挣脱身边的烦恼，走到一起，尽情享受老同学相聚的温馨让心栖息，忘却忧愁;说说真话，谈谈友情;回首往事，畅想未来;交流感想，相互勉励 相信除了欣喜和激动，你还会有更多的收获!
来吧，老同学!为了让我们了却一种遗憾xx年来未能谋面的遗憾，也许来了您会后悔，但不来却是你终生难了的遗憾;来吧，老同学!为了让我们寻求一种温馨挚友久别再次欢聚的温馨，也许来了您会更累，但不累怎能体验这难得的温馨。来吧，老同学!来重温曾经的浪漫，展望精彩的明天，让我们在浪漫中叙述各自的故事，共叙后再去谱写明天的浪漫。来吧，老同学!薄酒一杯，却品不尽沁人肺腑的甘纯;淡饭两口，也淡不了血浓于水的同学之交!我们聚到一起来，绝不是为了吃点喝点娱乐消遣，更不是为了胡吹海侃推销风光，而是为我们今后的亲密来往铺铺路，为我们今后的感情沟通连连网
来吧，老同学!让我们携起手来，为融化世态炎凉干杯!
同学聚会邀请函如何写二
xx师范大学xx系xx级毕业同学：
当年同窗，今散四海;一别二十载，荏苒不惑年。老同学啊，现在你的心情好吗?你的一切顺利吗?
美好的大学时光，恰似流光溢彩的画卷，烙在我们的记忆深处;往事如梦温馨如昨，依然常驻心头!因此我们在xx的同学始终坚信：无论你回到故里，或远在他乡;无论你多么繁忙，或何等闲暇，你终究不会忘记那山、那水、那人、那屋于是，尽管有千山阻，万水拦，都无法让我们对你不惦记，无法让我们对你不念想。然而，惦记、念想又有何用，因为每一次惦记、每一回念想总选在我们心中那块最柔软的地方堆砌明天将要来临，你我相逢何期的感伤，以至于我们再也无法忍受，要用行动来抚慰那彼此思念的愁肠。
悟已往之不谏，知来者之可追。今年适逢母校建立xx周年、同学毕业20周年，我们xx级同学会组委会郑重向你发出邀请：来吧!亲爱的同学，让我们到桂林来!到母校来!让我们走到一起来重温我们过去走过的日子，尽情享受老同学相聚的温馨探探师亲，访访旧舍;说说心语，叙叙友情，在今天美丽的母校校园中回首往事、畅想未来;让心栖息、忘却忧虑;交流感悟、相互鼓舞
盼望您早作安排，如期赴约，并请与本小班召集人取得联系。
顺祝您及全家身体健康!万事如意!预祝同学聚会圆满成功!
交流会的邀请函范文一尊敬的同行们、朋友们：
您好!
时光飞逝，岁月如梭。转眼间我们即将走过20xx年。在这一年，我们肩负重任，压力重重;在这一年，我们时刻忙碌，迷失自我;在这一年，我们面临挑战，步履维艰;在这一年，我们倍感艰辛，祈盼收获。跨过一年，你还在不知所措吗?你还在艰难前行吗?你还在独自困惑吗?不要再这样!因为，我们和你在一起!
在此，我们诚挚的邀请您参加我们20xx年度潍坊人力资源管理交流年会，加强自身专业技能，提高个人业务能力。倾听他人的声音，分享自己的心得，看看老朋友，结识新朋友。让大家在一个轻松愉快的氛围中，收获知识，收获乐趣、收获明天，让我们共同前行在HR的道路上，迎接美好的未来。
【主办单位】 山东xxHR交流论坛
【协办单位】 潍坊日月企业管理咨询有限公司
【年会时间】 20xx年xx月xx日08:3015:00
【年会地点】 帝豪大酒店(于08:3009:00签到)
【年会安排】 1、年度计划的制订
2、人力资源作业重点
3、20xx年HR发展探讨
4、管理困惑解答
5、年会聚餐
【邀请对象】 企事业单位HR工作者(人数限制为100人)
【年会费用】 100元/人 (因会议场地、会场服务、聚餐等均需费用，请参会同行在签到时缴纳，谢谢!)
【注意事项】 请带足名片，方便交流。
邀请人：XXX
XXXX年XX月XX日
交流会的邀请函范文二XX :
20xx年是个难忘的一年，承载了中华儿女太多的希望和泪水西南五省旱灾、江南暴雨洪涝灾害、4.14玉树地震、大连泄油污染、8.8舟曲特大泥石流,对志愿者朋友及各NGO组织来说20xx年却充满了考验和磨难，灾难是不幸的，生命是无辜的，爱心却是有情的!哪里有灾难哪里就有你们的身影，哪里有困难哪里就有爱心和希望，你们是最可爱的人，是最值得尊敬的人!今天，20xx年1月21日，我们汇聚一堂，相约20xx，共忆20xx!
【开启记忆的封印，20xx公益在行动】电子版年鉴合辑影像作品资料征集
过去的一年，我们伟大的志愿者及其NGO组织们在中华大地留下了太多的身影和故事，如果你有话要说，有故事要讲，请您留下您的文字、照片，我们将统一编辑制作成电子年鉴合辑，为您也为所有有爱心的人们留下一份纪念
一、会议时间：
20xx年1月21日 13:3017:00
二、会议地点：
工人体育馆北区地下一层报告厅
三、会议费用：
免费;现场免费提供饮料、茶点;
现场设置募捐箱，所得善款将用于资助北京红十字会希望大地助学项目
四、会议安排(详细安排见当日彩页)：
1、13:30入场签到、自由交流
2、14:0014:30 组织方致辞、参会组织致辞、志愿者代表致辞
3、14:3016:00 讲述你的故事，20xx公益年鉴展
4、16:0017:00 20xx年度公益项目交流、黑暗中的太阳现场体验
5、17:00 抽奖
五、参与对象：
公益慈善组织及其工作人员、志愿者以及有志于从事公益慈善事业有爱心的个人
六、参会报名及年鉴资料投送方式：
1、仅接受报名表报名，报名表下载地址(内有联系方式)：
2、提供公益年鉴资料的组织机构或个人请随报名表一并发送至报名表内邮箱。
3、报名截止日期：20xx年1月20日
4、公益年鉴资料征集截止日期：20xx年1月16日
注1：需要在会议现场放置易拉宝、发放宣传材料的组织机构请在报名时注释并由我们统一规划;
注2：需在现场单独播放PPT的组织机构请在报名时注释;
七、参与组织：
北京市红十字基金会会希望大地项目、希望大地助学工作室、NPI(恩派)公益组织发展中心、创意之窗黑暗中的太阳项目组、绿色和平组织、北京市社会福利管理处、心平公益基金会、北京桂馨慈善基金会、腾讯公益、百度小桔灯、天涯公益(报名中)
媒体支持：央视国际、网易、搜狐、新浪网、京华时报、腾讯网、百度
技术支持：阿飞觅友团影像资料组
八、年会现场志愿者招募
本次年会现场共需志愿者8名，分别为签到处接待员2位;自助餐饮区1位;现场服务1位;主持人1位;PPT播放人员1位;平面设计人员1位;FLASH制作人员1位;欢迎各位志愿者朋友踊跃报名参加。
九、交通路线：
地 铁：地铁2号线到东四十条站，出东南C口，向东步行约10分钟;地铁10号线到团结湖站，出东南C口，向西步行12分钟
公交线路：______________
邀请人：XXX
XXXX年XX月XX日
交流会的邀请函范文三**同学：
您好!我是20xxxx世界园艺博览会**(世园)，让我们走在一起两岸学生使者交流活动组委会的工作人员，周为老师推荐说贵校学生才华横溢，积极优秀，因此组委会衷心邀请您和贵校学生参与此次两岸学生使者交流活动，让贵校的学生们能够代表贵校及贵地区同来自全国和世界各地的青年学子们进行交流，传播两岸情谊。
本活动是20xx年西安世界园艺博览会(简称世园会)为传递世园会天人长安，创意自然、城市与自然和谐共生等核心理念，将绿色引领时尚精神推广至青年学子，将绿色、低碳、环保理念进一步推广给学生们而组织开展的。
参与形式非常简单，同学们只要登录活动官网 xxxx上传作品，即有机会成为两岸交流使者，世园会将提供交流的全额经费支持，让大学生能利用此平台去台湾、访西安，与全国及国际留学生们交流。活动不限制参与学生背景，并鼓励所有学生能通过网站参与活动。
网站针对学生，分为时尚好玩个性化的三个板块：花语祝福，花与生活，花于潮流，任选一种参与即可。参与方式活动快速简单，三分钟内便能完成。这是一个发挥创意，展示当代大学生才华的平台。参加活动不仅有机会获得两岸交流，其作品还有机会收录入科学松鼠会与头脑风暴主持人袁岳先生明年将出版的《身边的植物》一书，优秀T-shirt作品更将成为两岸交流使者的统一服装。
非常希望您能参与到我们的活动中来，同时也希望能帮忙在贵社团及学校对本次活动给予支持，在学生中对是缘(世园)让我们走到一起两岸学生使者交流活动进行宣传，鼓励更多学生参与。本次活动介绍请见附件，如需要宣传海报或纪念品，欢迎随时联系活动组委会。
