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1.1底部增氧方式
底部增氧方式是一种立体曝气增氧技术，是近几年从充气式增氧技术发展而来的增氧式技术。底部增氧方式的典型机型是微孔曝气增氧机，该增氧机由风机与管道构成。微孔曝气增氧机主要是在水体底部进行增氧，而风机的功率和管道布管的密度大大影响这增氧机的增氧能力。微孔曝气增氧机的安装过程比其他增氧机要复杂许多，第一步是在水体底部铺设微孔管道，然后利用风机对管道进行加压，使微孔中冒出的微细气泡呈现弥散状态，这样微细气泡可以一边上升一边与低溶氧水体进行融合，从而提高水体底部的溶氧水平。
1.2平衡增氧方式
平衡增氧方式是在水体净化技术基础上进行增氧设计的。该设备的典型代表是耕水机，耕水机的缺点是功率小、转速低，增氧能力和瞬时增氧的效果也不如传统的增氧机好。但该种设备也具有传统增氧机所不具有的优势，该设备能够24h不间断地低能耗运行，以使表层的富氧水与底层的缺氧水进行不间断的置换，从而提高水体的整体溶氧水平，缓解水体底部的缺氧状况。
2淡水水产养殖中机械增氧技术的应用现状
2.1机械增氧设备的总量仍然不足
当前我国在增氧机方面增长的速度很快，但是总量不足，现有设备数量难以满足高产高效养殖的需要。一般情况下，增氧机的数量是与淡水养殖的面积和养殖密度成正比的，也就是说，养殖水面越大、密度越高，那么对增氧机的需求量就会越大。但是按照我国现有增氧机的动力效率和有效的增氧面积计算，产量在15000kg/hm2以上的，每66.67hm2的养殖面积至少要配备3kw的增氧机134～167台，现有的设备数量是不能满足如此高产高效淡水养殖的需要的。
2.2设备结构不尽合理
当前的增氧机格局是叶轮式增氧机占主导地位，而其他增氧机的增速缓慢。这是由于淡水水产养殖户的从众心理，他们愿意选择大家都选择的增氧机，而忽略了水产养殖的品种问题。据相关统计显示，叶轮增氧机一度上升到增氧机总量的99%，这就导致设备的现状不仅与名特优水产养殖强劲的发展趋势相背离，其增氧方式也违反了淡水养殖品种的生活习性。
3几种机械增氧方式在池塘养殖中的增氧性能比较
3.1机械增氧方式对增氧性能的影响
3.1.1叶轮增氧机
叶轮增氧机在清水试验中的增氧能力和动力效率指标要高于水车增氧机和螺旋桨增氧机。这是由于叶轮增氧机在水体中的混合与提升能力较强，能获得较大的氧液接触面积，增氧性能会很好。
3.1.2水车增氧机
水车增氧机在清水试验中的增氧能力和动力效率指标略低于叶轮增氧机，而高于螺旋桨式增氧机。这是由于水车增氧机在水体的中上层的推流能力和混合能力较强，其氧液的接触面积也会较大。水车增氧的适用范围是水深1m左右的浅池。
3.1.3螺旋桨增氧机
螺旋桨增氧机在清水试验中的增氧能力和动力效率指标要远低于叶轮增氧机和水车增氧机。这是由于螺旋桨增氧机在整个水体中的推流能力和混合能力较弱，在池塘试验中底层的溶氧值有明显提升，但上下层溶解氧的均匀性较差。
3.2机械增氧方式对不同深度水层增氧能力的影响
由于淡水水产养殖中养殖品种的不同，那么对淡水增氧的方式要求也不尽相同。一般来说，叶轮增氧机的性能较好，能够同时提升淡水池塘中不同深度水层的溶解氧；水车式增氧机的优势是能提升水体中上层的溶解氧，而对水体底层溶解氧的提升能力较差；螺旋桨增氧机的突出优势则是提升水体底层的溶解氧，其对水体中上层溶解氧的提升能力则较弱。
4淡水水产养殖中机械增氧技术的发展趋势
4.1增氧设备的节能低耗、高效可控发展趋势
淡水水产养殖中机械增氧技术的发展趋势是向着低耗、高效的方向发展。这是由于传统的增氧设备具有高耗能低效率、依靠人工操作的缺点。因此，要致力于机械增氧设备水平的提升和智能操控系统的研究，这将是今后机械增氧技术的发展重点和方向。
4.2混合增氧将成为未来发展的趋势
可持续水产养殖是我国水产养殖业的发展方向。“种养结合”、“净水渔业”是我国发展现代渔业的必由之路；水产品质量安全的关键在于对养殖水环境修复和保护。我国渔养殖业的发展关键问题是水体富营养化。水体富营养化的治理，最主要是削减污染源的排放，必须内源与外源同时治理。发展净水渔业是治理内源污染的关键措施。一定要加大生物修复的投入，国家与民众共同参与修复水环境。只有走净水渔业之路，我国的水产养殖业才会可持续性发展。推广净水渔业养殖模式而需要各级政府部门在宏观上加以控制，微观上给予指导。控制有效养殖的面积。充分发挥政府职能,控制有效养殖面积，建立健全的法律法规体系，要合理的规划养殖面积及品种,建立渔业用药限制、制定养殖废水排放水质标准,一定要严格控制滥用渔药现象,加强养殖水处理及废水排放的管理,为发展净水渔业提供充足的法律保障。只有走了净水渔业之路，我国的水产养殖业才会可持续性发展。
二、水产生态健康养殖的探索
养殖业的健康发展，既要走对路子，也需要政府相关方面的保驾护航。
（一）必须搞好规划
养殖水域滩涂规划，就是各地人民政府在水域滩涂总体利用规划中制定的用于水产养殖的水域滩涂规划，这是渔业部门管理的用于水产养殖的法定地域范围。
（二）必须严格执行养殖生产管理制度
各地人民政府要继续推进渔民养殖的有效证明，做好核发工作，养殖证也是渔民开展养殖生产的基本依据。
（三）加强执法监督的体系建制
进一步加强病害防治、水产原良种，渔业主管部门一定要加大监督管理，加大对水域生态环境的监管力度等体系建制；加强养殖水域水质的监测、养殖生物疫病测报与防治工作，以提高从业人员岗位技术的培训，从业人员素质和职业资格鉴定，提高和专业技术水平；加强安全、环保型、高效的饲料和水产药物，实现技术推广和服务队伍建设的有效提高。
（四）加强管理
各地人民政府应加强环境监测，及时发现和处理渔业水域污染案件，保护养殖渔民的合法权益。而水产养殖业发展到今天，来之不易；将来向何处走，值得深思，努力建设现代水产养殖业，解决目前遇到的各种问题，使我国成为世界养殖强国，应该是我们为之努力奋斗的目标。而要实现这一目标,推进和发展生态健康养殖，是一条必由之路。
三、结语
基于物联网的智能海洋水产养殖系统是专门为人工水产品养殖到销售环节设计的，采用无线传感技术、网络化管理等先进管理方法对养殖环境、水质、鱼类生长状况、药物使用、废水处理、运输环节等进行全方位管理、监测，具有数据实时采集及分析、食品溯源、生产基地远程监控等功能。海洋水产养殖物联网系统包含6个子系统及1个数据库，涵盖了渔业水产养殖、加工、运输及销售环节的物联网技术运用。
二、系统的组成
2.1水产品智能环境监测控制系统
水产品智能环境监测控制系统集成水质传感器、无线传感网、无线通信、嵌入式系统、自动控制等技术，可自动采集养殖水质参数，上报到智能平板终端及物联网云中心。并通过无线传输方式自动控制各继电器给给排水设备、增压泵、水温控制设备工作。
2.2水产品智能养殖管理系统
水产品智能养殖管理系统包含水产品养殖辅料管理、水产品管理及水产品出库管理。水产品养殖辅料管理主要针对饲料、药物的出入库、投饲进行登记。水产品管理主要通过在养殖池上放置RFID设备对鱼苗种类、数量、出入库等进行登记。水产品出库管理主要通过在水产品打捞网箱上放置RFID设备，读取并存储水产品出库时二维码条码信息。
2.3水产品加工管理系统
水产品加工管理系统主要分为入厂登记环节和出厂登记环节。对从养殖池运输来的水产品进行相关检疫并在电脑客户端软件上登记水产品来源信息，把信息通过RFID写入到挂钩上的RFID条形卡上，同时上传到云中心进行储存。待加工好后的水产品出厂时，对包装好后的成品进行称重，读取批发商的IC卡信息生成水产品质量安全信息追溯码并打印，在水产品包装上赋码，并上传到云中心进行储存。
2.4水产品冷链物流管理系统
水产品冷链物流管理系统主要通过在车辆运输中使用的水产品包装箱上放置RFID温度采集标签，通过无线网络手持式交易监管终端读取数据传输至物联网云中心。
2.5水产品交易零售系统
批发商对所批发的水产品进行零售时，利用智能溯源电子台秤上配置的手持式条码扫描枪扫描条码，打印出小票。
2.6水产品溯源查询系统
客户通过在销售商处购买水产品时拿到销售票据，登录查询追溯网站输入相应的追溯码可以查询到从水产品养殖生产到消费者购买为止的过程中的相关信息。
三、结语
1.1鱼塘清淤
鱼、虾、蟹等经1年的饲养后，池底往往沉积着大量的食物残渣和排泄物，这些有机废物经腐烂、分解后在池底形成淤泥，而淤泥是细菌很好的培养基。因此，当淤泥沉积到一定厚度时，必须及时清除。银鲫类的出血病及罗氏沼虾、青虾等细菌性病害的发病率的上升与池底淤泥不及时清理有一定的关系。按国外对虾养殖经验来看，高密度虾类养殖，最好每年将池底的1层浮泥予以清除，其目的也是去除细菌滋生所需的营养源。另外，淤泥中有大量的寄生虫卵及孢子等，挖除多余的淤泥亦可大大减低侵袭性病害的发生率。一般来讲，池底淤泥厚度只需15cm左右即可。这样既使水体有一定肥度培育浮游生物，满足水产养殖类对天然饵料的需求，又可减少致病菌的滋生场所和细菌密度。因此，每年对鱼池清整时，必须清除池底多余的淤泥。
1.2池底曝晒与冰冻
池底每年需经15d左右的曝晒和冰冻，一是改良池底的土质，二是使池底淤泥中的致病菌和寄生虫卵及孢子的密度下降。池底经曝晒和冰冻的鱼池，养殖病害的发病率明显下降。但池底干枯时间过长则易引起草荒。
1.3药物清塘
生石灰清塘可有效地杀灭致病菌、寄生虫及孢子等，同时可改善池底土质。
2放养健壮苗种
选择的标准：体质健壮，无畸型苗，且规格均匀。体表、鳍条或附肢无炎症，无烂鳃、白肝等异常病症。苗种游动（或爬行）灵活，无病态。有条件的单位或个人可用显微镜对体表、鳃、肝等部位取样进行镜检，应无寄生虫或致病菌。对罗氏沼虾和南美白对虾来讲，应选购经过检疫不带病毒的虾苗。
3种苗放养前药浴
对鱼类可用15~20mg/kg浓度的高锰酸钾溶液药浴15~20min，具体视鱼类对药物的忍受力而定。蟹种放养前，在水温5~8℃时，用高锰酸钾20g/m3浸洗3~5min，或用3%~5%的食盐水溶液药浴消毒，用来杀灭河蟹体表上的细菌和寄生虫。虾苗进池后即用二溴海因等（浓度达0.3mg/kg）进行全池泼洒4食台或食场消毒
用250g左右的漂白粉对水，泼洒在食台或食场的周围，一般从4~9月每月2次；石灰轻消可有效地抑制致病菌，并可及时补充水体中的钙质，使水体常年呈偏碱性。这对养特种品甲壳类尤为重要。生石灰轻消方法：常规养鱼池一般每米水深为225kg/hm2，特种水产品（如鳜鱼、虾、蟹等）一般每米水深为75~105kg/hm2。
5选购优质配合饵料
要求颗粒均匀、水中稳定性好、营养全面、饵料系数低等，并添加诱食剂及稳定维生素C等，促进养殖品种的摄食、消化和吸收，促进其生长，增强抗病力，提高成活率。要注意投喂饲料的科学性，不要投喂单一饲料，避免缺少某种营养元素而引起营养性疾病。如虾、蟹养殖中，除投喂动物性饵料和全价配合饲料外，还应保证充足的植物性饲料。
6采用生物调控水质
采用生物调控水质，确保有一个良好的生态环境，从而提高鱼、虾、蟹等水产品的体质和抗病力。生物调控水质可采用种植水草、放养螺蛳、添加有益菌和培育浮游生物（如施肥）等。可根据养殖品种选择相应的生物调控法。浮游植物的光合作用能使水体富含氧气，减少氨氮、硫化氢等有毒物质的生成，创造良好的生态环境，抑制致病微生物的滋生。定期用有益活性微生物制剂施放光合细菌、复合型活菌生物净水剂（如西菲利）等，它们在水体中能快速将有机物质彻底分解成单细胞藻类可利用的无机营养盐，减轻有机废弃物的污染，而本身对养殖品种无害，同时自身在水体中能迅速繁殖生长形成优势菌群，通过食物、场所竞争及分泌类抗生素物质，直接或间接抑制有害菌群的繁殖生长。生物调控水质的方法可减少池水排换量，从而减少从外界水源带来的污染。研究和实践证明，通过大排大灌换水的方法改善底质，效果不佳，会造成南美白对虾生长不适，应激生病。
7配套增氧机械
通过增氧机的打水作用，增加水体的溶解氧，使底质中的有机物和水中鱼、虾、蟹的排泄物及残饵等充分氧化分解成单细胞藻类所需的无机营养盐，减少有机废弃物的污染，保持水质条件良好，从而避免诱发疾病的应激条件产生。
8掌握病害发病规律
掌握某些水产养殖病害的发病规律，定期在水体中施用药物或投喂药饵，杀灭病菌，减少致病因素，但需注意药物的拮抗作用和协同作用，并且不能与微生物制剂同时使用。如银鲫的出血症，在发病季节每隔15~20d对水体消毒1次，并投喂药饵2~3d。
论文关键词水产养殖；病害预防；鱼塘清整与消毒；药浴；食场消毒
论文摘要总结了水产养殖中病害的预防措施，包括鱼塘清整与消毒、放养健壮苗种、种苗放养前药浴、食台或食场消毒、选购优质配合饵料、采用生物调控水质、配套增氧机械、掌握病害发病规律等内容，以供水产养殖者参考。
本品为黑紫色、细长的棱型结晶或颗粒，带蓝色金属光泽，无臭味，在空气中稳定。本品为强氧化剂，易溶于水，遇有机物、热、酸性或碱性并释放出新生态氧或称初生态氧，从而呈现出极强的杀菌、杀虫、除臭、氧化、解毒、止血和收敛功效。
2常规应用
高锰酸钾在水产养殖中的防治对象主要为鱼类的细菌性疾病以及水生生物的真菌性病害，如鱼类水霉病、鳖和蛙的肤霉病；鳗鱼弧菌病、烂鳃病、烂尾病、赤鳍病等；虾丝状细菌病、幼体粘污病、黄鳃病、虾蟹链壶菌病等；鱼类中华鳋病、锚头鳋病、指环虫病、三代虫病、鲤嗜子宫线虫病、车轮虫病、口丝虫病等，采用的方法主要有浸泡法和泼洒法。2．1浸泡法目前最常用的范围之一，主要用于鱼种放养时鱼体浸泡消毒、杀虫，以及防止鱼卵孵化早脱膜，常见用量为10～20mg／L，浸泡15～30min，但往往实际生产中浸泡鱼体的容器水量、药液浓度、浸泡时间凭经验掌握。2．2泼洒法用于养殖水体大面积泼洒杀虫和消毒。因高锰酸钾受水体有机物影响作用效果而降低，以及用量较大（2～5mg／L），高锰酸钾的价格较高，用药成本不划算，故一般大面积水体应用较少，仅用于一些小水面的名贵水产品养殖。3特殊功效养殖水体“转水”的急救、增氧、解毒。“转水”在北方地区水产养殖中时有发生，因受水源条件限制，水体有机物含量高，使水体富营养化，藻类大量繁殖，一遇天气突变或营养盐类供给不足，藻类大量死亡，即“转水”或称“倒水”现象，造成水体严重缺氧，氨氮、亚硝酸盐偏高，水色由浓变清，有的甚至清澈见底，有浓烈果腥臭味。养殖鱼类生命受到威胁，有的甚至全军覆灭，损失惨重。目前采取的应急措施主要有：①向水体加注新水，但北方地区普遍存在加注新水困难。注水在水产养殖中是一种急救措施，不定期或临时向水体加注水，要求进水量大、时间速度快，增加溶解氧，稀释有害物质浓度。注水仅对养殖面积较小的鱼塘起作用，对大水面作用甚微。加水是一种日常水质调节措施，一般定期向水体加新水，对水量、速度没有明显要求，避免水质老化。②向水体泼洒降解氨氮、亚硝酸盐等药品，如硝化菌、复合芽孢杆菌、吸附剂等，不能在短时间内消除这些有害物质，达不到急救作用。③向水体泼洒速效增氧剂或大粒氧，增加水体溶解氧，以缓解严重缺氧。因溶解氧受水温、溶解度影响，快速释放的氧气形成微气泡，释放到空气中，持续时间不长。④向水体泼洒解毒药品，以解除有害藻类死亡释放的毒素对养殖鱼类的危害。目前大部分解毒药品主要成分为有机酸或Vc类，对解除有机物等中毒效果不够理想。笔者曾采用高锰酸钾解救因“转水”严重缺氧的案例，使养殖鱼类转危为安。案例1．天津市武清城关江××，养鱼水面0．33hm2，因“转水”严重缺氧，氨氮、亚硝酸盐指标偏高，24h不停开增氧机，用速效增氧剂替换增氧机，1h后又缺氧浮头，连续七天得不到好转，烧坏一台增氧机。采用高锰酸钾每米水深用3．75～7．5kg／hm2，稀释到不染手指为宜，向浮头严重的鱼群泼洒，浮头现象当即消失。并通过藻类调济接种，使水质得到恢复。案例2．天津市武清白古屯杨××，0．67hm2养鱼池氨氮、亚硝酸盐偏高，养殖鱼类以暗浮头现象在水面集群游动，气温越高表现越明显，连续五天得不到好转。通过上述方法当即消失，并结合肥水培养藻类使水质恢复正常。案例
3．唐山市陡河水库曾
××，养鱼池0．53hm2，养殖高峰季节8月，池塘养殖鱼类荷载量约17500kg，晚上21：00左右，水质发黑有腥臭味，养殖鱼类严重缺氧浮头，不抱增氧机，扎塘边，特别是上半夜，如不及时采取有效措施，就意味着有“泛池”危险，造成不可估量的损失。通过采用高锰酸钾急救，备用7．5kg／hm2，上半夜用3．75kg／hm2按上述方法泼洒，养殖鱼类及时恢复抱增氧机，就减轻了“泛池”死鱼的危险，如下半夜有返弹，再用3．75kg／hm2泼洒，结果只用了一次，第二天水质就恢复正常。
4分析原因
4．1改良水质作用高锰酸钾为强氧化剂，迅速氧化水中有机物质，降低了以水呼吸为主的耗氧量，直接和间接起到了改良水质的作用。4．2释放初生态氧高锰酸钾在水中释放出初生态氧，与水分子结合成氧，避免了速效增氧剂因受水温影响溶解度，形成微气泡逸出水面，所以高锰酸钾增氧持续时间长。国外有人把高锰酸钾作为增氧剂使用，用10～15mg／L的高锰酸钾全池泼洒，可使池水溶氧量提高1．5～5mg／L。4．3氧化有毒物质高锰酸钾可迅速氧化水中有毒物质，如有害藻类分泌或死亡产生的毒素；氧化亚硝酸盐；有机磷农药如敌百虫、马拉硫磷；有机硫农药如“福美”化合物类的福美鋅，“代森”类的代森銨等中毒。因此，人、畜因这类物质中毒常采用1∶2000～1∶5000的高锰酸钾溶液反复洗胃，以解除农药中毒。
5注意事项
1.1材料
1.1.1实验装置膜生物反应器(MBR)处理水产养殖废水的工艺流程如图1所示。反应主体为圆柱形有机玻璃容器，有效体积为70L。膜组件为杭州捷滤膜分离技术有限公司生产的聚偏氟乙烯（PVDF）+特种纳米材料材质的中空纤维膜，截留孔径为0.1μm，中空纤维内径为0.9mm，中空纤维外径为1.5mm，膜面积为2m2，出水方式为负压抽吸。正常运行时反应器采用间歇运行，每隔6h抽2h水。出水时间和停抽时间8min和2min。水力停留时间为8h。
1.1.2培养基（1）牛肉膏蛋白胨硝酸盐固体培养基：5g牛肉浸膏，10g蛋白胨，1gKNO3，20g琼脂，1000mL自来水，pH7.2～7.4。（2）硝酸盐葡萄糖反硝化培养基：5g葡萄糖，2gKNO3，1gK2HPO4，1gKH2PO4，0.20gMgSO4•7H2O，1000mL蒸馏水，pH7.2～7.5。（3）DM培养基：4.70g琥珀酸，7.90gNa2HPO4•7H2O，1.00gKNO3，1.50gKH2PO4，0.30gNH4Cl，0.10gMgSO4•7H2O，2mL微量元素溶液。微量元素溶液：50gEDTA，2.20gZnSO4，5.06gMnC12•4H2O，5.50gCaC12，5gFeSO4•7H2O，1.10g（NH4）6Mo7O24•4H2O，1.61gCoC12•6H2O，1.57gCuSO4•5H2O，1000mL蒸馏水，pH7.0。
1.1.3检测试剂（1）格里斯试剂（GriessReagent）Ⅰ和Ⅱ：试剂Ⅰ：将0.5g的对氨基苯磺酸（SulfanilicAcid）加到150mL的30%稀醋酸溶液中，保存于棕色瓶中。试剂Ⅱ：将0.5gα-萘胺（α-naphthylamine）加到50mL蒸馏水中，煮沸后，缓慢加入150mL的20%稀醋酸溶液中，保存于棕色瓶中。（2）二苯胺试剂：溶1.0g无色的二苯胺（Diphenylamine）于20mL蒸馏水中，然后徐徐加入100mL浓硫酸（相对密度1.84）中，保存于棕色瓶中。
1.2实验方法
1.2.1活性污泥的培养驯化实验所用的污泥为哈尔滨市文昌污水处理厂间歇曝气池的活性污泥，其MLVSS/MLSS为45%，SV为34%，MLSS为5296mg/L。在活性污泥中好氧反硝化菌的富集驯化是通过MBR装置驯化上述活性污泥。操作过程为瞬时进水（水产养殖废水添加营养液配制而成）、曝气、出水。曝气期间，监测DO的浓度，保持DO浓度在2mg/L,温度保持28~30℃，pH为7左右。进水COD值在250～350mg/L,氨氮值在20mg/L左右，MLSS值为350mg/L。好氧反硝化菌污泥的驯化富集过程采用的COD和氨氮浓度逐步提高的方法，最后达到COD800mg/L，氨氮70mg/L；曝气时间从开始每个周期（24h）曝气6h，逐步增加到8、12、18、24h，使系统逐渐适应，最后保持好氧状态。为了加强好氧反硝化菌的优势，每隔24h向培养液中加入适量5%硫酸铵溶液、5%硝酸钾溶液和5%亚硝酸钠溶液，培养60d。
1.2.2菌株的分离、纯化与筛选取膜生物反应器中驯化60d的活性污泥10mL，经过充分打碎，用无菌水制备稀释液，取稀释倍数10-2、10-3、10-4稀释液在牛肉膏蛋白胨硝酸盐固体培养基平板上涂布，于30℃培养48h。挑取形状各异的菌株纯化数次，获得36株菌株。将此36株菌株分别接种于装有5mL的以硝酸钾为氮源的反硝化培养基的试管中，反硝化培养基的试管中应放入一倒置杜氏发酵管，以检测气体的生成。试管置于30℃恒温箱中培养。培养14d后，各取培养液5滴于白色比色皿上，加入格利斯试剂Ⅰ和Ⅱ各2滴，只有F20、F21、F28三株菌接种的试管中培养液（分别记为F20培养液、F21培养液、F28培养液，下同）呈红色，说明培养液中的硝酸盐被还原成亚硝酸盐，这3株菌具有好氧反硝化作用。再分别取这3支试管中培养液5滴于白瓷比色板上，加二苯胺试剂2滴，F20培养液和F21培养液呈蓝色，而F28未变色。说明F20培养液和F21培养液中仍有硝酸盐未被转化，F28培养液中没有硝酸盐；F28培养液中反硝化进行程度比F20培养液、F21培养液中反硝化程度高，F28菌株好氧反硝化能力较强。从而筛选获得一株好氧反硝化能力较强的菌株F28。将菌株F28接种于硝酸盐葡萄糖反硝化培养基斜面上扩大培养备用。
1.2.3菌株的鉴定从硝酸盐葡萄糖反硝化斜面上挑取菌株F28，做平板划线培养。待长出菌落后,观察菌落的形状、颜色等特征。采用革兰染色,显微镜观察其个体形态。另外,进行硝酸盐还原试验、淀粉水解试验、葡萄糖发酵试验、吲哚试验、乙酰甲基甲醇试验、甲基红试验、柠檬酸盐试验、产硫化氢试验、过氧化氢酶试验等生理生化鉴定。并同时进行16SrDNA基因序列分析。使用DNA提取试剂盒（E.Z.N.A.BacterialDNAkit，购自美国Omega生物技术公司）提取F28菌株基因组DNA。对该菌的基因组DNA进行PCR扩增的引物采用27F：5''''-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3''''和1492R：5''''-GGTTACCTTGTTACGACTT-3''''。PCR反应体系(25μL)：2.5μL10×PCR缓冲液,3.5μLMgCl2，0.5μL模板DNA，0.5μLPF和PR，1μLdNTP，0.5μLTaqDNA聚合酶，16μL超纯水。PCR反应条件为：98℃5min；95℃35s，55℃35s，72℃1min，35个循环；72℃8min。得到的PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测。测序由上海生工生物工程有限公司完成。测序结果通过NCBI的BLAST检索程序与GenBank中已知16SrRNA序列进行同源性分析。通过MEGA5.05软件用NJ法构建系统发育树。
1.2.4菌株的反硝化性能实验从硝酸盐葡萄糖反硝化斜面上挑取菌株F28接种于DM液体培养基中，200r/min、37℃摇床中培养，测OD600值，在OD600值0.4左右，按1%(V/V)接种量接种于DM液体培养基中，200r/min下恒温振荡培养3d，每隔2h测定培养液OD600值、培养液中硝酸盐以确定菌株F28的生长情况和反硝化能力。
1.2.5菌株F28对水产养殖废水的净化效果采集集约化水产养殖车间水处理过滤装置中的混合液，充分搅拌后，静置，取上清液过滤，装过滤液2L于5L三角瓶中。以5%（V/V）的接种量接种于上述污水中。每隔1d取样测定培养液中COD、硝酸盐、氨氮含量。
1.3分析方法硝酸盐的测定用紫外分光光度法；氨氮的测定用纳氏分光光度法；OD600采用分光光度计在600nm波长下，以未接种的培养液为参比，测量菌液的吸光度。COD的测定采用重铬酸钾法。
2结果与讨论
2.1含好氧反硝化菌污泥的培养驯化经过60d的不断调试,曝气时间由开始的每个周期(24h)6h变为24h。活性污泥里的菌群以好氧菌为主。此时进水营养液的COD为800mg/L,氨氮为70mg/L左右。系统稳定，COD去除率在80%以上，氨氮的去除率在80%以上，总氮的出去除率在55%以上。驯化结果良好。
2.2菌种鉴定菌落呈圆形,乳白色，表面光滑。生理生化检测表明，菌株F28革兰氏染色反应呈阴性，硝酸盐还原试验、葡萄糖发酵试验、柠檬酸盐试验、产硫化氢试验、过氧化氢酶试验呈阳性，淀粉水解试验、吲哚试验、乙酰甲基甲醇试验、甲基红试验呈阴性。经过对菌株F28菌株DNA的提取及PCR扩增，得到了一定长度的DN段，16SrRNA的PCR扩增产物电泳照片见图2。通过与左侧的Marker对照，可知目标扩增产物的片段长度约1500bp。对菌株F28的DNA进行测序研究，得到长度为1442bp的16SRNA基因序列，将获得的基因序列与GenBank数据库中序列比对，结果表明，菌株F28与多株假单胞菌属的菌株具有高度同源性，同源性均在99%以上,结合生理生化检测推断菌F28为Pseudomonassp。应用MEGA5.05软件采用NJ法构建系统发育树，确定其进化地位.结果如图3所示。
2.3菌株的反硝化作用菌株F28在DM液体培养基上培养生长时，溶液中硝酸盐浓度的变化曲线以及菌体生长变化曲线如图4所示。由图4可知，菌株F28延迟期内硝酸盐浓度有下降，但反硝化过程主要发生在对数期，对数生长期时间较长。在稳定期和衰亡期之后菌量不再增加，并在后期略有下降，但仍具有较强的反硝化能力。F28的延迟期较长，为7h。当菌种接种到新培养基之后，需要经过一段时间的调整和适应，以合成多种酶和细胞其它成分。F28的对数期相对较长，约持续9h，反硝化主要发生在这个时期，这可能是因为对数期生长速率最大，细胞合成所需要的能量和还原力主要在这一阶段被消耗，因此指数期是反硝化效率最高的时期。
2.4菌株F28对水产养殖废水的净化作用由表1可以看出，菌株F28对于集约化水产养殖废水处理2d后，NO3--N、NH4+-N浓度由初始77.1mg/L、46.3mg/L分别降至7.4mg/L、1.59mg/L，去除率分别为90.4%、96.6%。同时，菌株对废水中COD具有一定去除作用，处理2d后的去除率为33.7%。处理第3天基本上和第2天变化不大。因此，菌株F28在处理水产养殖废水处理中具有相当好的效果，在实际工程应用中具有较大潜力。本研究针对MBR反应器处理水产养殖废水系统，逐步提高反应器COD和氨氮的负荷，逐步增加活性污泥曝气时间以至全时段曝气，反应器内菌群以好氧菌为主，污泥驯化结果良好，系统稳定，MBR反应器的总氮的去除率在55%以上。经过稀释、平板划线分离纯化与筛选，从MBR处理水产养殖废水体系中获得的适合水产养殖废水处理的好氧反硝化菌F28。结合生理生化试验和16SrRNA基因序列分析及同源性对比确定所筛得的菌株F28为一株假单胞菌（Pseudomonassp）。好氧反硝化细菌广泛存在于自然生态系统中，目前分离出的好氧反硝化菌归属于多个属，假单胞菌是主要的属之一。从土壤、城市污水处理厂污泥中分离好氧反硝化菌常见报道。但适用于水产养殖系统的好养反硝化菌报道不多，李卫芬等从草鱼养殖池水中分离出一株高效好氧反硝化作用的施氏假单胞菌（Pseudomonasstutzeri），杨小龙等从富营养化的鱼塘中分离出一株好养反消菌鉴定为不动杆菌属(Acinetobactersp)。分离好氧反硝化菌的常规方法是根据Takaya等建立的有氧反硝化菌平板分离法。有氧反硝化菌平板分离方法是基于溴百里酚（BTB）培养基的指示剂溴百里酚蓝在pH大于7.6时呈蓝色，而细菌的反硝化过程伴随着产碱，当平板培养基内有反硝化菌生长时，pH升高，菌落呈现蓝色晕圈或者出现蓝色。
全向春、李卫芬、杨小龙和姜磊等是基于有氧反硝化菌平板分离法进行好氧反硝化菌分离实验。本实验采用一种不同的高效分离好氧反硝化细菌方法。先使用牛肉膏蛋白胨固体培养基平板划线法，将驯化良好MBR反应器中的活性污泥可分离细菌分离出来，分别接种于内置有杜氏发酵管的DM液体培养基中。培养12d后，用格里斯试剂溶液Ⅰ和Ⅱ检测培养液中是否有亚硝酸盐产生和观察杜氏发酵管中气泡的产生以及培养液变浑浊情况，用二苯胺试剂检测培养液中硝酸盐消耗情况。Takaya等建立的有氧反硝化菌平板分离方法，是间接利用碱指示剂筛选出好氧反硝化菌。与有氧反硝化菌平板分离法本实验直接使用格利斯试剂Ⅰ及Ⅱ检测有无亚硝酸盐生成以及用二苯胺试剂检测硝酸盐更科学合理、准确度更高，且周期短，操作性强。对菌株F28反硝化作用研究，显示其反硝化作用主要发生在细菌的对数生长期，随着细菌快速增殖，硝酸盐氮迅速下降，验证了李卫芬等报道的，好氧反硝化菌反硝化特性主要发生在对数期。菌株F28对水产养殖废水处理结果表明，24h时反硝化率去除率在70%以上；48h菌株对于水产养殖废水中硝酸盐、氨氮去除效果明显，去除率均在90%以上，同时碳的去除率达到30%以上。文献报道的适用于废水处理系统的好氧反硝化菌对氮去除率达到82%，菌株F28对氮的去除效率更高，适用于水产养殖废水处理。本研究分离出的适用于水产养殖废水处理系统的好氧反硝化细菌F28，对氮有良好的去除作用，同时对碳有一定的去除作用。集约化水产养殖用水量较大，养殖废水水质恶劣，利用生物方法处理水产养殖废水循环利用是降低养殖成本、控制环境条件、保护生态环境的有效途径。水产养殖废水中氮含量对养殖对象具有较大毒害作用，研究工艺中好氧反硝化菌对于水产养殖废水处理具有重要意义。菌株F28在水产养殖废水处理特别是集约化水产养殖废水处理实际工程应用中具有实际潜力与价值。
3结论
1.1混凝沉淀技术
混凝沉淀技术就是利用化学原理，将混凝剂加入水中，对水中的污染物进行有效去除，石灰铁盐与有机絮凝剂等常用的混凝剂因为其具有一定的毒性，所以不能直接在养殖用水中应用，而是用在水产养殖排水水质的处理上。
1.2臭氧氧化技术
臭氧如果具有强氧化性，就能在水中迅速自行分解，避免造成二次污染，具有除臭、杀菌、脱色以及去除有机物的作用，是一种比较有效的绿色氧化药剂，这种技术主要运用于海水工厂养殖排水水质的处理中，具有较强的氧化作用，能够有效分解、溶解以及降解水中的有机物。
1.3紫外辐射技术
紫外辐射技术利用紫外辐射对水体进行消毒，不仅能够破坏水中残留的臭氧，还能将大量的病菌杀死，具有无毒、高效以及低成本的特征，紫外辐射技术是一种比较成熟的养殖排水水质改善技术，主要应用于水产生殖排水的循环过程中。
1.4其他处理技术
在对水产养殖排水水质进行改善处理的过程中，离子交换技术以及电化学技术也是一种水质处理技术，但是离子交换技术主要在水族馆或者科研项目中运用，应用范围较小，而电化学技术还处于试验阶段，不完全适用于生态农业园的需求。
2生物处理技术
2.1人工浮床净化技术
人工浮床净化技术通过模拟自然界的各种变化规律，利用高分子材料和混凝土等载体，对水生植物进行种植，使其发挥清除水体污染物的作用，这种技术能够净化水质、美化水体景观，为生物创造生存空间的功能，促进周围生物的多样性发展，加强其生态系统的完善，能够很好地适用于生态农业园区的水产养殖排水中。
2.2人工湿地净化技术
人工湿地净化技术能够按照水体的具置和实际情况，模拟湿地的结构与功能，综合净化与处理污水，构成水体、基层、微生物以及水生植物等人工湿地的主要元素，对铵、氮、硝酸盐以及亚硝酸盐等化学物质进行有效清除。
2.3水生动物净化技术
水生动物净化技术就是将水生动物放养于水产养殖所用水体中，不仅能够起到净化水质的作用，还能提高生态农业园水产养殖的经济效益，是一种兼具实用性与经济性的水质净化技术。
2.4水生植物净化技术
水生植物主要有沉水植物、浮叶植物以及漂浮植物，通过水生植物在生态农业园水产养殖区域的种植，能够抑制水体中藻类的生长，并且具有一定的观赏价值，同时能够有效起到净化水体的作用，实现一定的经济效益。
3结语
随着渔业自然资源的逐渐衰退，水产养殖业也已经发展成为对“粮食紧缺”问题解决的主要途径，是保障食品安全的重要产业。但是，水产养殖模式所依靠的是施肥或投饵，以能够获取更多的鱼产品，往往会导致实际养殖量远远在其生态容量允许之外，同时，其生产过程中所产生的一系列残饵、鱼体排泄物以及肥料等等，也就会在水体中逐渐发生消耗溶氧，从而导致水体发生污染，同时，携带大量致病菌，对水产品质量安全产生威胁。另外，水产养殖污水排放，流入河流之中，还会导致多种毒素的产生，从而对土壤、空气及水体产生更大的污染。其不但给水产养殖也可持续发展带来了影响，同时也给渔民、企业、国家带来了一定的经济损失，更有甚者会造成环境污染，从而影响消费者的生存安全，因此，水产养殖业污染管理非常必要，甚至已经是刻不容缓的大事情，必须作为水产养殖的首要任务来完成。
2水产养殖污染的最佳管理模式
2.1构建水产养殖环境评价机制
必须进一步构建水产养殖污染预警机制，以对水产养殖生态环境的质量、稳定性、数量及发展潜力等进行综合考虑，以能够从生态环境承载力及生态资源承载力基础上出发，对水产养殖和自然资源的平衡关系进行构建，在水产养殖经济发展评价体系中将水资源消耗及环境损失等各项资源纳入其中，依照模糊评判理论，同时借助于调查问卷方式，对和水产养殖环境可持续发展相符合的评价体系进行构建。在进行水产养殖业发展之前，必须要以保护水域生态环境作为前提，不断的对和水产养殖环境具有一定关系的环境承载力及养殖容量等实施多方面评价。依照当地不同水资源、土地、湖泊、水域、水库及地下水资源等各种资源现状，对其养殖规模及养殖方式进行科学合理的确定，同时还要对其相应的等级进行划分。最终还要依照当地的生态环境等级及最低容量原理，对其水域承载力和养殖容量确定出一个最佳方案，以此促进水产养殖和当地生态环境的融合可持续发展。
2.2提高水产养殖生产规范性
很多水产养殖协会、国际发展组织、NGOs以及政府的相关渔业管理机构等等，均对水产养殖的相关规范要求进行了制定。这些规范要求对于水产养殖的生产管理以及操作行为等等均具有一定的指导性作用。但是这些规范要求的制定，大部分都是依照联合国粮农组织所制定的“负责任渔业行为守则”进行制定的，其全部都要依靠渔农的自我遵守完成，并不具有法律效应，这样也就导致在实际生产过程中，人们往往不会依照这些规范进行，从而导致大量水产养殖污染的发生，因此必须要进一步对水产养殖的生产规范性进行提高。简而言之生产规范性也就是对其相关操作进行规范，其中主要包括的就是BMPs，其能够对水环境质量实施有效的改善，当然也并不是说BMPs能够在所有水产养殖场所适用。另外，想要对水产养殖进行有效的规范，还需要广大生产者看和政府通力合作，以能够对实施BMPs的正是法规文件形成，确保水产养殖污染管理的有法可依。
2.3加强水产养殖水体管理
水产养殖废水处理是其污染管理的主要内容之一。水产养殖水体之中含有大量的营养物质，其能够导致收纳水体富营养化，那么其能够通过以下措施对其营养负荷进行降低：在进行浮游藻类丰度进行维持的时候，只使用必须肥料；在进行放养量和投饵率选择的时候，一定要适当，以防超出池塘的消化能力；对水体交换尽量不增加，或者是最大化的减少；近可能的进行重复用水，或者是将其外排水体进行暂存；对池塘中各层水体进行适当的混合，以提高下层水体水质；选择使用优质饵料，以对水质稳定性进行保障；对鼓风设备进行使用，以能够避免对极端低浓度DO情况的发生等等。
3结语
加强重点水产养殖区域和养殖户规范化管理，确保全市水产品质量安全，避免发生质量安全事故。一是对重点养殖户进行登记造册，发放水产养殖记录本，督促填写鱼塘日志。二是通过水质检测服务及时检查病害发生情况和用药情况，促进水产品质量安全。与106户水产养殖户签订标准化养殖协议，发放养殖规范操作技术资料210份，发放池塘日志350本，基本涵盖全市高产养殖池塘。
二、引进新技术加强示范基地建设
水产苗种生产供应和示范基地是水产业发展的基础。2014年，争取并实施了省无公害水产品基地建设项目，依据永城市池塘面积大（30亩以上）、水位深（3米以上）的特点，投资10万元，开展了网箱培育鱼种及商品鱼养殖试验，培育黄颡鱼种37.6万尾、黄河鲤鱼种26万尾，网箱养殖黄颡鱼试验产量达到2.7kg/m3，取得理想效果，为水产养殖结构调整积累了经验。实施了农业部渔业标准化健康养殖项目，投资50万元扶持永城市康丰渔业养殖专业合作社渔场标准化建设。建设内容分二个方面。一是道路交通、输电线路改造、池塘护坡、仓储房建设、渔业机械、新品种、新技术应用；二是现代渔业信息化装备。完善了无公害水产品生产基地标准化建设，提高对周边水产养殖带动、示范作用。
三、完成了《永城市现代渔业发展规划》
在永城市政府大力支持下，安排专项资金，委托河南省水产科学研究院，在调查全市渔业现状，研究分析永城市现代农业规划、土地规划等规划的基础上，编制了《永城市现代渔业发展规划》。经过资源普查、综合评估、系统诊断提出永城市现代渔业发展战略方针、区域布局、建设重点等一系列规划，编写出《永城市现代渔业发展规划》（2013—2030）讨论稿。内容分十部分，包括永城市渔业现状、发展潜力分析、发展思路和目标、区域布局和建设重点、投资规模与资金筹措、经济社会生态效益评估、保障措施，以及规划图、重点项目投资核算表。
四、认真谋划2015年重点工作
1.加强水产品质量安全管理
结合水产技术服务促进标准化养殖，提高水产品质量安全。扩大渔业水质检测范围，把中高产池塘全面纳入检测范围，帮助养殖户池塘水质调控；加强渔业病害检测，促进针对性用药，改变过去凭经验、盲目用药、滥用药物，推广科学鱼病防治技术，推进标准化水产养殖；对河道、沉陷区、人工湖等国有渔业水域水质实施监控，加强渔业资源保护。
2.贯彻落实发展规划
进一步加大宣传力度，认真贯彻落实新制定的《永城市2013—2030年现代渔业发展规划》，依据规划发展要求，制定年度水产技术推广工作计划。
3.加强水产苗种与高产示范基地建设
继续加强水产苗种与高产示范基地建设，促进永城市渔业产业化发展。指导、帮助现有的三户水产苗种养殖场扩大生产能力、规范培育管理，提高永城市水产苗种供应能力；重点帮助致信水产良种场完成申报省级水产良种场建设，缓解永城市水产苗种不足的局面。
4.充分发挥养殖协会作用
引导水产养殖协会，促进永城市渔业产业化发展。目前，已经起草了协会章程，召开了部分养殖户座谈会，群众反映积极，正在进行会员报名、审查工作。计划2015年初，完成协会注册，召开协会成立大会，推选协会领导机构，建立正常运行机制，确定渔业用电价格优惠政策落实、水产养殖户小额贷款使用、饲料集团购买等几件事实。
5.多元化促进永城水产业发展
