时间：2023-06-02 15:27:50
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关键词：市场法 价值乘数 多元回归
一、市场法及价值乘数的概念
市场法就是在现实公开交易市场上寻找相同或者相似资产作为可比对象，通过分析可比对象交易价格或者合理报价来分析确定资产的价值。市场法的核心思想就是以“价值乘数”为中介，以可比对象在现实市场上的成交价格或者合理报价为基础，通过对比分析可比对象与被评估资产的相关因素，分析确定被评估资产的价值。市场法中常用的两种方法是上市公司比较法和交易案例比较法，两种方法都需要选择可比对象，不同的是所选可比对象的来源和途径有所不同，而两种方法相同的是，必须要确定对比分析的基础――价值乘数。
价值乘数又称价值比率，本文主要对价值比率做一定的探究，实务中价值比率的应用会根据企业性质的不同，有各种类型的价值乘数，但它们大多是基于常用的三种价值比率进行变形，所以本文主要对基础的三种价值比率――市盈率、市净率和市销率加以分析，探究影响其大小的决定性因素，分析其优缺点，并做出一定的改进。
二、 市盈率
市盈率又称收益乘数（PE比率），是指在一个考察期内，股票的价格和每股收益的比率，其基本表达式：P/E=每股股价/每股收益。
（一）优点和局限
优点：首先，这是一种具有直观吸引力的统计方法，它将被评估资产的价值与标的资产目前的收益联系起来。其次，对于大多数股票来说，PE比率很容易计算，也随处可得，这使得评估师在使用这一指标时会很方便。再次，使用PE比率可以不用考虑风险、增长和股息支付比率，而所有这些在用收益法中的折现现金流量法评估时所必须要考虑的。最后，市盈率更有可能反映市场状况和前景预测。如果市场投资者对股票的投资热情重新高涨，这些股票的市盈率也将提高，反映出这种乐观的情绪。
局限性：对于收益为负数的公司，市盈率的使用就会受到限制，市盈率就失去了意义；市盈率除了受企业本身基本面的影响以外，还受到整个经济景气程度的影响。在整个经济繁荣时市盈率上升，整个经济衰退时市盈率下降。除此之外市盈率还存在两个主要的缺陷：第一，市盈率受到资本结构的系统性影响。主要体现在投资者要求的报酬率或者股权资本成本上。第二，净利润是扣除了非经营性损失之后计算得到的。因此，一项非现金注销，将显著降低利润（对于价值没有可比性的效应），导致市盈率被人为提高。
（二）基本分析
影响市盈率的不仅仅是每股股价和每股收益，将公司的基本数据纳入考虑之中，则可以找到影响市盈率高低的决定因素。
市盈率使用的前提是，公司处于持续经营中，而根据公司所处状态不同，市盈率评估模型也有所不同。一个处于稳定状态的公司，即处于稳定增长状态的公司，其增长率与整个经济的名义增长率接近，根据高顿增长模型，其股权价值为：P0=DPS1/r-gn。这里，P0是股票价值；DPS1为下一年的预期股息；r是投资人要求的报酬率或股权资本成本；gn为股息的永久增长率。
而DPS1 =EPS0×s×1+gn。其中EPS0为初始年份的每股收益；S为股利支付率。将其带入高顿增长模型公式：P0=[EPS0 ×s×1+gn]/r-gn 。公式两边同时除以EPS0可以得到用基本数据表示的市盈率公式。P/E=s×1+gn/r-gn 。由此公式可以看出，稳定型公司的市盈率P/E会受到股利支付率、期望报酬率（股权资本成本）和股利的增长率的影响。
处于增长期的公司的比率同样可以和基本数据联系起来，增长期公司适用于两阶段股息折现模型，即前期处于高速增长阶段，后期处于稳定阶段。其基本公式如下所示：
P0=DPS1×[1-1+gn/1+rn]/r-g+DPSn/[r-gn×1+rn]
其中DPS1=EPS0×s×1+g，DPSn=EPS0×s×1+gn×1+gn，将两等式带入上述公式并且两边同时除以EPS0可得如下所示：
P/E={s×1g×[1-1+gn/1+rn]}/r-gs×1gn×1+gn/[r-gn×1+rn]
其中，g为增长期股息的增长率，gn为稳定期股息增长率。
由上述等式可以看出，决定市盈率高低的要素依然是股息支付率、股权资本率以及股息增长率。因此，无论是处于增长期还是稳定期的公司，在使用市盈率评估时，都会受到股息支付率、股权资本率以及股息增长率三个基本因素的影响。
三、 市净率
市净率又称为权益乘数，是指股权市场价值和账面价值的比率，其基本公式为：P/BV=股票市场价值/账面价值。
（一）优点和缺陷
市净率的优点：首先，相对于市盈率来说，即使是收益为负的公司，不能使用市盈率进行评估，但可以使用市净率进行评估。其次，与市场价格相比而言，账面价值提供了一种相对稳定、符合直觉的价值评估方法。通常情况下，人们总是感觉账面价值比内在价值更加可靠、清晰，因此账面价值是一种非常简单的比较标准。最后，如果会计标准合理，而且不同公司之间会计标准一致，市净率可以作为一个低估或者高估的信号，在同类公司中进行比较，以便于评估师对可比公司的选择。
采用市净率也存在一些缺陷：第一，账面价值和盈利一样会受到折旧方法和其他会计政策的影响，当企业之间采用不同的会计政策时，将难以使用市净率对不同的企业进行比较，同样，当不同国家采用的会计制度或准则存在重大差异时，利用市净率进行跨国间的企业价值评估也将失去意义。第二，账面价值对于某些没有太多资产的行业来说意义不大，比如服务行业。第三，如果企业连续多年亏损，那么企业权益的账面价值可能为负，相应地，市净率也会变为负值，因此对于多年亏损的企业，市净率很可能不能使用。第四，账面价值反映的是初始成本，如果在获得一项资产后，其盈利能力显著增加或降低，那么，其账面价值就会与市场价值产生显著差异，再用市净率来评估就会显著低估或者高估价值。
（二）基本分析
同市盈率一样，影响市净率大小的，不仅仅是股票的市场价值和账面价值，还有更深层次的基本因素对其有决定性的作用。
对处于稳定增长状态的公司，适用于高顿模型计算其股权价值。高顿模型如下：P0=DPS1/r-gn
同样，P0是股票价值；DPS1为下一年的预期股息；r是投资人要求的报酬率或股权资本成本；gn为股息的永久增长率。而DPS1=BV0×ROE×s，其中ROE为下一年度的净资产收益率，s为股利支付率，又s=1-gn / ROE，将两个等式带入高顿模型，且两边同除以BV0可得：P0/BV0=ROE-gn/r-gn。
由此可见，稳定增长公司的市净率大小是由净资产收益率、股息增长率和股权资本成本决定的。
对于增长型公司，同市盈率一样，适用于两阶段增长模型。基本模型如下：
P0=DPS1×[1-1+gn/1+rn]/r-g+DPSn/[r-gn×1+rn]
其中DPS1=BV0×ROE×s ×1g，DPSn=BV0×ROE×s×1gn ×1+gn，将它们带入基本模型公式且两边同时除以BV0可得：
P0/BV0={ROE×s×1g×[1-1+gn/1+rn]}÷r-g+[ROE×s×1gn×1+gn]÷r-gn×1+rn
由此公式可见，影响增长型公司的市净率高低的因素同样是净资产收益率、股权资本成本、股利支付率以及股息增长率。
四、市销率
市销率又称为收入乘数，是指股票价值和企业收入之间的比值。其基本公式为：P/S=股票价格/每股收入。
（一）优点和弊端
市销率因其独特的优点而备受关注，首先，它不像市盈率可能会是负值而变得毫无意义，市销率在任何情况下都可以使用，甚至对于最困难的公司也可使用。其次，与净利润和账面价值不同，销售收入不受折旧、存货等会计政策的影响，因而也难以被人为的扩大。再次，市销率并不像市盈率那样易变。因此，用市销率进行价值评估更为可靠。例如，对于一家周期性公司，其市盈率值变化要比市销率变化频繁得多，这是因为利润比销售收入对经济状况的变化更为敏感。
当然，采用市销率比率也有些弊端，用销售收入来代替账面值或净利润的好处之一是它的稳定性。然而这种稳定性，在公司的成本控制出现问题时，就失去价值评估的准确性。在这种情况下，尽管利润和账面价值有显著的下降，但是销售收入可能不会大幅下降。因此，当使用市销率对一个存在亏损或资不抵债的处境艰难的公司进行价值评估时，可能因为无法识别各个公司成本、毛利率方面的差别而得出不准确的评估值。
（二）基本分析
同市盈率、市净率一样，对于市销率的基本分析，同样将公司分为稳定型和增长型，稳定型公司适用于高顿模型，增长型公司适用于两阶段模型。其计算过程和市盈率、市净率相似，在此不再计算，其最终等式如下：
稳定型：P/S=PM×s×1+gn÷r-gn，其中PM为净利润率。
增长型：P0/S0=PM×s×1+g×[1-1+gn/1+rn]÷r-g+PM×s×1gn×1+gn÷[r-gn×1+rn]
由以上两个等式可以看出，无论是企业处于增长期还是稳定期，影响企业市销率的因素是净利润率、股权资本成本、股利支付率和股息增长率。
应注意的是，三个比率的基本分析都是以股权价值为基本切入点，理论上股权价值等于股票价格，而实际上，股票价格受到多种因素的共同影响，因此，用股票价值为切入点来分析三比率得到的是一种理论上的价值比率。
五、问题和改进
（一）市场法适用性问题
市场法的应用必须要满足两个最基本的前提条件：第一，要存在一个公开活跃的资本市场；第二，市场上要存在充分的可比案例或者交易活动。公开市场指的是有多个交易主体在自愿、平等、理智、非强制或者不受限的条件下进行的交易，这个市场上的买卖双方获取的信息量相当，交易价格代表了交易资产的行情，也就是资产的市场公允价格。现实中，几乎没有能够完全满足上述市场法应用条件的公开市场条件。公开市场假设是基于资产可以在市场公开买卖这一客观的事实为基础的。从现实情况来看，对于用上市公司比较法评估企业价值而言，至少已经存在证券市场这样一个活跃的公开市场。许多文献在谈及市场法时，均认为我国资本市场处于发展的初级阶段，尚未成熟，资本市场上的信息不能准确真实地反映企业的价值，据此认为市场法在我国尚不能广泛的运用。笔者认为，资本市场的主要功能有融资、投资、资源配置和资产定价功能，其中与上市公司比较法运用联系最为紧密的就是市场对资产的定价功能。由于垃圾信息、市场预测、“噪音”干扰以及信息不对称等原因，使得定价不能总是一步到位，但是这并不能否认定价功能的效率。当价格在某一个阶段、某一个适当的时间范围内总体趋于一定的情况下，就表示资本定价功能发挥正常。
（二）实务中存在的问题
市场法在应用中，首先需要找出一组可比公司，根据《企业价值评估指导意见》中第三十七条“注册资产评估师应当确信所选择的可比企业与被评估企业具有可比性。可比企业应当与被评估企业属于同一行业，或者受相同经济因素的影响”的规定，实务中评估师一般会选取属于同一行业的一组公司作为可比公司。而采用这种方法有几个问题：
第一，可比公司的定义基本上是个主观上的概念，评估师在选择可比公司时，大多数是靠个人经验，因此不同评估师所选可比公司不同，其评估结果肯定会有所不同。将行业中其他公司作为一组也经常不能解决问题，因为同一行业中的公司在业务组合、风险和增长率等方面也存在很大的不同。
第二，就目前我国的资本市场来说，由于资本市场并不是很健全，有些行业上市公司很少，例如根据申银万国最新的行业分类来说，三级分类通信运营中，只有中国联通和263两家上市公司。对于通信运营类公司用市场法评估而言，则很有可能找不到合适的可比上市公司。
第三，即使能够找到一组合适的可比公司，被评估公司与可比公司之间的基本差异仍然存在，由以上对市盈率、市净率和市销率的基本分析可以看出，影响三大指标高低的基本因素有净资产收益率、净利润率、股权资本成本、股利支付率以及股息增长率等基本数据，所以很难找到合适的可比公司，即使通过一些主观的调整，也很难找到一组在各个方面都合适的可比公司。
（三）相应改进
鉴于以上问题的存在，在实务中运用市场法时需要评估师尽可能做到客观、公正，避免个人主观的偏见。而在实务中，每个评估师主观经验的不同，评估结果就会不同。基于此，在用市场法评估时，需要找到一些辅助方法进行验证，可以借鉴市场法运用较多国家的一些成熟方法。
美国的资产评估业有100多年的历史，在对企业价值评估方面，市场法是常用方法之一，因此可以借鉴他们在市场法方面的经验，在缺少相应的可比公司时，美国偏向于使用多元回归分析方法来确定市盈率、市净率以及市销率等价值比率。具体方法如下：
以市盈率、市净率以及市销率作为因变量，根据前面的分析，可以找到影响各个比率的基本数据，将基本数据作为自变量进行多元回归，具体表达式如下：
市盈率=α0+α1×股息支付率+α2×股权资本成本+α3×股息增长率
市净率=β0+β1×股息支付率+β2×股权资本成本+β3×股息增长率+β4×净资产收益率
市销率=γ0+γ1×股息支付率+γ2×股权资本成本+γ3×股息增长率+γ4×净利润率
可以采用行业数据回归分析和整个市场数据回归分析两种方法，当被评估公司所在行业上市公司较多时，可以使用行业数据回归分析，作为可比公司的辅助验证。而当所在行业上市公司很少时，如上面所说的通信运营三级分类中只有两家上市公司，则可以扩大回归分析的样本范围，可以使用所在行业的二级分类中的上市公司作为样本或者一级分类所包含的上市公司，甚至可以使用完全不同行业的上市公司数据来进行回归分析，求得回归系数，将被评估公司的相应基本数据带入回归方程式便可求得被评估公司的市盈率、市净率及市销率。若使用整个市场的数据进行回归分析，则要考虑更多的因素。如由于行业不同，面临的行业风险也会不同。
（四）注意问题
回归分析方法是价值评估常用三大比率的一种简便途径，它将价值比率和影响其大小的基本因素通过方程式联系起来，而这些基本数据对于上市公司来说很容易取得，因此，多元回归分析方法在实务中运用非常方便，但是此方法本身也存在一些缺陷，如有可能基本数据因变量和价值比率之间并不是线性相关的，或者基本数据之间具有很强的相关性等，这些不确定性的因素都会影响回归模型的有效性，因此需要评估师在使用模型时，对其进行相应的检验。
参考文献：
1.（美）Aswath Damodaran.张志强，王春香译.价值评估[M].北京：中国劳动社会保障出版社，2004.
关键词：决策树;Logistic回归;超额收益;基本面指数
中图分类号：F830.91 文献标识码：A 文章编号：1003-5192(2009)03-0057-04
Research on Constructing Stock Price Constituent Index
WANG Xin, YIN Liu-zhi, FANG Zhao-ben
(School of Management, USTC, Hefei 230026, China)
Abstract:Based on decision trees and Logistic regression, we select constituent stocks and determine their weights with fundamental factors.Fundamental stock price constituent index(JOYFI300), created as a guidance to fundamental investment, is testified better on excess return.Firstly, two selection measures, net profit and trading value, are chosen by using decision trees, and then initial samples of constituent stocks can be found out by these two factors.Secondly, the influence of fundamental factors on weights of constituent stocks can be analysed and determined by Logistic model.Finally, after testing and comparing we find that JOYFI300 Index is better on excess return than Shanghai-Shenzhen 300 and CITIC/S&P 300 Index.
Key words:decision trees; Logistic regression; excess return; fundamental index
1 引言
目前流行的股票价格指数通常仅以股票市值作为加权因子，而股票基本面因素在决定指数成份股构成时，虽然也有所考虑，但在决定权重时却未能具体体现这些因素。另一方面，少数指数虽然已把基本面因素作为加权因子，但采用了主观的等额定权方法，客观依据不足，难以给出合理的经济解释。基于这一现状，本文运用决策树技术确定基本面指数选股原则和成份股初始样本；之后再以基本面变量作为加权因子建立Logistic模型，通过模型拟合区分各因子对样本股进入指数的影响程度，进而确定成份股构成及各自权重。本文将应用上述方法选择300家成份股编制基本面300指数（简称“JOYFI300”）。
本文研究的意义在于，通过引入基本面因素选择成份股并确定权重，使价值低估的股票能获得更合理的权重，从而优化指数的风险收益特征［1］；为市场提供一种可交易的良好基准［2］，引导基于基本面投资的理念；为组合投资者提供一种构建投资组合的新方法［3~5］，以提高资产配置的效果，促进金融工程技术的应用。
2 综述
2．1 股票价格成份指数编制现状及最新进展
现有股价成份指数选样标准过于简单，大多只考虑市值规模和流动性因素；从定权方法上，国内所有股价成份指数均采用流通市值加权，还没有指数采用基本面因素定权。市值加权的优点是权重易于确定，能够给予直观的解释；缺点是随着股票价格的变化，各成份股所占权重随之变化，同时很难设计出调整机制使权重回到合适的水平。而基本面因素加权却可经由再平衡（Rebalance）机制使权重回到初始的水平，即通过减少波幅靠前股票的比例，增加波幅落后股票的比例，使成份股权重新回到期初水平，以纠正投资偏差。
国际上已有少量指数采用基本面因素加权，但定权方法较为主观，客观依据不足，难以给出合理的经济解释。目前公开考虑基本面因素的指数有［6］：(1)道琼斯股价指数体系中道琼斯全球、行业和亚洲顶尖50指数三个风格指数都是按照自由流通市值、销售/收益（S/E）、净利润进行综合排名，权重分别为60％，20％，20％，但最终成份股权重仍然采用自由流通市值。这里流通市值仍被作为最重要的选股标准，2个基本面变量也仅按等权进行处理。(2)富时股价指数体系中RAFI系列指数，基于Robert［7,8］的研究框架，以销售收入、现金流、股息、账面价值为指数选股标准，但4个变量同样按等权进行计算。(3)标准普尔股价指数体系中成长价值风格系列指数也类似地选择成长型和价值型变量共7个变量作为加权因子，具体定权方法未公开披露。
2．2 决策树和Logistic回归
决策树［9］是用于分类和预测的预测型建模方法。它的优点是分类判定方法简单高效，生成的规则易于解释和理解，适于分类变量的数据处理；但不易于处理连续型数据。作为数据分类的一种有力工具，决策树在管理、金融、生物统计等领域得到了广泛应用。简单来说，运用决策树进行数据分类一般分为两个步骤：(1)决策树归纳，即利用训练数据构建决策树，生成分类规则。(2)应用决策树预测检验数据，确定数据类别。第2步决策树的应用相对简单。第1步决策树结构的拟合是需要重点考虑的，不同的决策树可能产生不同的分类结果。
在构建决策树进行数据分类和预测前，需对数据进行以下预处理：(1)数据清理（Data Cleaning）。包括缺失值的处理和数据噪声的消减；(2)相关性分析（Correlation Analysis）。训练样本的某些数据属性可能是冗余的，与分类并不相关，通过相关性分析将这些多余的属性删除；(3)数据变换（Data Transformation）。例如：将连续数据通过聚类分析或概念化分层转换为分类数据；对数据进行标准化，使数据取值进入指定区间，如（0，1）等。
自上世纪70年代以来Logistic回归模型的研究逐步得到深入［10］，它的优点是：(1)适用于因变量是分类变量（可以是二分类或多分类）的数据处理；(2)对于自变量的分布没有正态假设条件，数据类型既可以是连续变量、离散变量、也可以是哑变量（Dummy Variable）；(3)未作方差齐性假设；(4)要求因变量与自变量之间是非线性关系（S型曲线），假设服从Logistic分布。若假设服从标准正态分布，则为Probit模型。当观测数据尾部较厚，或自变量为连续变量时，采用Logistic模型更为适当。
记给定自变量取值xki时事件发生的条件概率为
P(yi=1｜x1i,x2i,…，xmi)=pi
得到Logistic回归模型（1）式，α、βk分别表示Logistic模型的截距项和各自变量回归系数。
pi=exp(α+∑nk=1βkxki)1+exp(α+∑nk=1βkxki)（1）
上式可转换为Logit形式：ln(pi1-pi)=α+∑nk=1βkxki。如果因变量和自变量的观测值已知，就可估计出模型各项系数，这些系数估计值可以解释为各自变量在模型中所起的作用。
3 JOYFI300指数的编制
以每年4月30日为基准，将该日沪深两市所有已上市A股作为样本，但需剔除：(1)ST、*ST股和暂停上市股票；(2)最近一年发生重大违法违规事件；(3)最近一年财务报告未及时披露或有重大问题；(4)上市不满11个交易日的公司。所有数据均取自wind金融数据库。
3.1 决策树分类变量
本文选择13个变量作为决策树分类变量(见表1)。后五类基本面指标在进行决策树分类前均进行了加权标准化。即先对数据进行市值调整，以其占全体样本取值总和的比例作为最终取值。市值调整以公司实际流通市值占公司总市值的比例为权重。为提高决策树分类效果，运用聚类分析将后六类连续型变量进一步离散化为分类变量。
表1 决策树分类变量
序号变量代码变量名称变量属性序号变量代码变量名称变量属性
1zccz资产重组二分类8gsgrow销售增长量连续
2cgjzd持股集中度二分类9bv账面价值连续
3zrz再融资二分类10np净利润连续
4hydw行业地位三分类11gs销售收入连续
5hydbx行业代表性三分类12gd股息总额连续
6cjje成交金额二分类13ygrs员工人数连续
7gdgqxz股东股权性质四分类
3．2 决策树训练样本及分类变量相关性分析
从4个类似的300指数（沪深300、中信标普300、申万300和巨潮300）中选取相重合的成份股作为决策树“宜进入指数”的训练样本；将6个连续变量按取值大小排序，将至少有5个变量排名在下1/2分位的股票做为“不宜进入指数”的训练样本。
根据训练样本数据，对上述变量分别与因变量（是否进入指数）作pearson χ2检验。在95％置信水平下均拒绝原假设，即它们与因变量间存在显著的相关性关系。
3．3 成份股的选择与定权
采用R语言拟合决策树，树结构见图1。np和cjje两个变量就决定了树的结构，说明仅股票业绩和流动性是JOYFI300成份股的选样标准。本文通过对数据的加权标准化将市值因素引入基本面变量，在基本面变量中间接反映公司市值大小，因此JOYFI300与其他成份指数选样标准的差异正是体现在经市值调整的净利润指标上。根据树结构对其余样本进行分类，选出符合分类标准的股票，与“宜进入指数”的训练样本共同构成JOYFI300成份股初选样本。
表2 Logistic模型变量选择结果 （α＝0.05）
变 量系数估计值Wald置信区间Wald χ2P值
bvβ^1=4.1707（β^1－1.01，β^1＋1.01）65.8792
npβ^2=10.5788（β^2－2.18，β^2＋2.18）90.4159
gdβ^3=2.8356（β^3－1.62，β^3＋1.62）11.83130.0006
gsgrowβ^4=0.5776（β^4－0.54，β^4＋0.54）4.37020.0366
记成份股初选样本因变量y为1，否则为0。运用逐步选择法（Stepwise）对6个连续变量进行变量选择，采用SAS的Proc Logistic［11］程序计算，系数估计值显著性检验（Wald检验）的结果见表2。账面价值、净利润、股息总额、销售增长量4个变量P值显著小于α＝0.05，故拒绝原假设（H0: βk=0）。各初选样本的评分可由(2)式得到，scorei就是第i只初选样本股票的基本面得分。根据评分大小选出前300家股票作为指数成份股。各成份股最终权重由公式weighti=scorei/∑iscorei计算。scorei=1×bvi+2×npi+3×gdi+4×gsgrowi(2)
图1 决策树结构
3．4 JOYFI300指数样本期间及计算
以2005年4月30日为基期，基点1000点,模拟计算2005年5月至2007年10月JOYFI300指数。根据各成份股加权收益率计算每日指数收益率的变动，再换算成每日指数变动值。成份股分配现金红利会使流通市值发生变动，JOYFI300对此的处理是考察期内维持其权重不变，这相当于在跟踪JOYFI300进行指数化投资时，红利即时再投资于该股。
4 JOYFI300指数的评价与比较
4．1 风险收益特征
再平衡机制能够使权重回到合适的水平，但也会提高指数的周转率，增加交易成本，因此需要考量再平衡的调整频率。通过比较样本期内各指数的总收益率（表3），每半年和不进行再平衡由于收益特征未表现出显著差异被首先否定，每月再平衡总收益率虽比每季再平衡略高，但是若考虑成份股周转时的交易成本，显然每季再平衡总收益率更优。后文在进行指数评价时均采用按季再平衡的JOYFI300指数。
表3 各类指数总收益率比较（2005年5月~2007年10月）
JOYFI300（每月再平衡）JOYFI300（每季再平衡）JOYFI300 （每半年再平衡）JOYFI300（未再平衡）中标300沪深300
总收益率587％582％532％453％500％510%
表4 各指数收益特征比较
指数最大月收益率最小月收益率几何平均月收益率几何平均年收益率年超额收益（参照沪深300）年波动率偏度峰度
JOYFI30030.74%-7.28%6.611%115.58%10.84%28.795%1.3050.421
中标30027.14%-8.61%6.153%104.74%-1.40%27.614%1.2080.140
沪深30027.93%-8.20%6.214%106.14%-27.722%1.2360.229
JOYFI300在各项收益率指标（表4）上都高于两比较指数；年波动率与中标300、沪深300相比分别增加1.181%、1.073%，但年均收益率增幅远远超过年波动率的增幅，分别到达10.84%、9.44%。偏度为正且略大说明收益率的分布较其他指数呈现更明显的右偏，即在JOYFI300收益率分布的右侧存在更多的极端值。峰度略高表明尖峰厚尾特征更为显著。峰度偏度数据清晰地显示JOYFI300收益率分布比其他指数具有更优良的性质，它的右尾部（正收益率）有更多更大的数据点分布，可能具有更高的均值水平。参照其他两种指数对JOYFI300月超额收益进行均值检验（H0：月超额收益≤0），P值显著小于0.05，说明JOYFI300月超额收益显著不为零，月收益率均值水平比其他两种指数更高。
基于资本资产定价理论的分析框架，从投资组合的角度考察各指数的风险收益特征(见表5)，JOYFI300仍然表现出良好的特性。基本面指数组合的β系数比沪深300略低，与中标300大体相当；经风险调整后的投资组合超额收益（Jensen）也表现为JOYFI300更优。
表5 基于CAPM的风险收益特征（参照沪深300按月收益率计算）
指数βPearson相关系数超额收益IRJensen
JOYFI3000.99598.08%0.397%0.22310.00428
中标3000.95699.78%-0.060%-0.09590.00201
4．2 指数稳定性
JOYFI300的结构调整包括两个方面:成份股定期和不定期的调整、指数权重再平衡。表6中平均周转率的计算综合考虑了这两方面的因素。指数结构调整的成本也来自两个方面：交易费用和执行成本。本文仅考虑交易费用带来的成本。由于机构投资者通常无需或部分支付交易佣金，所以分别计算仅支付印花税（交易成本＝3‰）和部分支付交易佣金（交易成本＝5‰）两种情况。
表6 JOYFI300指数周转率与交易成本(参照沪深300)指数平均周转率月超额收益
交易成本＝3‰交易成本＝5‰
月超额收益超额收益损失率月超额收益超额收益损失率最大交易成本（超额收益＝0）
JOYFI30024.663%0.397%0.375%5.54%0.361%9.07%5.40%
5 结 论
运用决策树和Logistic回归将基本面因素引入股价成份指数的编制，使成份股的选样标准与定权方法更为合理客观，同时再平衡机制使初始权重得以保持，指数的收益性质得到很大的改善。采用上述方法编制的JOYFI300获得了显著优于沪深300和中标300的超额收益，样本期内JOYFI300指数组合年均收益率分别高出10.84%和9.44%。JOYFI300的风险收益特征表明采用基本面因素加权构造的指数组合是比市值加权指数组合更为有效的CAPM市场组合；基于基本面投资的理念在中国证券市场具有很强的适用性，能够获得超越同类型指数的风险收益水平。尤其在以沪深300为标的指数的股指期货推出后，可为设计指数基金、ETFs、指数投资组合等指数产品提供一种可行的新方法；组合投资管理者也可利用JOYFI300优于沪深300的风险收益性质，实现投资组合的套期保值和套利交易。
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Effect of simvastatin on osteoblastic differentiation of bone marrow stromal cells in rats
【Abstract】 AIM: To study the effect on osteoblastic differentiation and proliferation of bone marrow stromal cells in vitro by administration of simvastatin in vivo and to elucidate the mechanism of the anabolic osteogenetic effect of simvastatin. METHODS: Thirty 3monthold virgin female SD rats， weighting 250-300 g were randomly pided into 3 groups: Group 1， control， 10 rats; Group 2， given simvastatin 10 mg/(kg・d)， 10 rats; Group 3， given simvastatin 20 mg/(kg・d)， 10 rats. All of the animals were given the agents through gastric tube for 28 d. At 29th day all the rats were sacrificed. Bone marrow stromal cells in femur and tibia were cultured in vitro. After treated with same condition for 14 d ALP activity of bone marrow stromal cells in supernatant was determined. The mRNA level of cbfa1 was detected by RTPCR， and cbfa1 protein expression was analyzed by Western blot. Cell count kit (CCK8) was used to examine the cell proliferation. RESULTS: After the rats were administrated with differentdose simvastatin in vivo for 28 d， and then the bone marrow stromal cells were cultured for 14 d in vitro， the level of cbfa1 mRNA was increased， and the expression of cbfa1 protein also increased in a dosedependent manner， and supernatant ALP activity increased in a dosedependent manner. Ttest showed that the proliferation of bone marrow stromal cells in Group 2 had significant difference， but no significant difference in Group 3， when compared with control group. CONCLUSION: Simvastatin leads to the high expression of cbfa1 in bone marrow stromal cells and increased ALP activity， which may be parts of the mechanisms underlying the anabolic osteogenetic effect of simvastatin.
【Keywords】 Simvastatin; bone marrow stromal cell; osteoporosis; osteoblast; cbfa1
【摘要】 目的：研究辛伐他汀体内给药后对大鼠骨髓基质细胞在体外培养过程中成骨分化和增殖的影响，探讨其刺激成骨的作用机制. 方法：30只SD雌性大鼠，随机分为3组，每组10只. G1组（C）为对照组；G2组（SIM10）给予辛伐他汀10 mg/(kg・d)；G3组（SIM20）给予辛伐他汀20 mg/(kg・d). 连续给药28 d后，取大鼠的骨髓细胞体外培养，诱导14 d后用RTPCR和Western blot分别检测cbfa1 mRNA和蛋白表达的变化；收集上清液，检测细胞碱性磷酸酶；应用cell counting kit(CCK8) 测定细胞增殖情况. 结果：辛伐他汀体内干扰28 d后，再经过骨髓细胞体外培养诱导14 d后，cbfa1因子的mRNA及蛋白表达水平均增高，呈剂量依赖关系. 上清液碱性磷酸酶表达增高，呈剂量依赖关系. 实验组与对照组比较，G2组（10 mg）组促进细胞增殖，而G3组（20 mg组）未见显著性差异. 结论： 辛伐他汀可促进骨髓基质细胞中cbfa1 mRNA和蛋白的表达，碱性磷酸酶活性增高，辛伐他汀刺激成骨的作用机制可能与此有关.
【关键词】 辛伐他汀； 骨髓基质细胞； 骨质疏松； 成骨细胞； 核心结合因子
0引言
他汀类药物是竞争性3羟基3甲基戊二酰辅酶A（HMGCoA）还原酶抑制剂，能够降低肝内胆固醇的生物合成. 是近20 a来发展起来的一类新型调脂药，目前广泛用于治疗高胆固醇血症. 1999年Mundy等［1］经过动物实验筛选了30 000多种天然或人工化合物后发现，他汀类药物可引起成骨细胞系的骨形成蛋白2（BMP2）的高表达，并能有效地刺激骨形成. 继Mundy之后，同样的发现，通过灌胃法口服给药（辛伐他汀），正常及去势大鼠［2］ 皆可见小梁骨量增加. 并伴随成骨作用有破骨细胞数量的减少. 在临床的回顾性研究中也发现，服用他汀类药物可以增加血清中骨钙素（osteocalcin，OCN）的水平［3］. 并降低股骨颈骨折的发病率［4-5］. 但具体作用机制尚不清楚，辛伐他汀对骨髓基质细胞向成骨细胞分化的作用如何，目前国内外少见报道. 本研究采用体内给药然后体外对骨髓基质细胞培养诱导的方法，旨在观察辛伐他汀对骨髓基质细胞（BMSc）成骨分化的影响，以探讨其促进骨形成，治疗骨质疏松的机制.
1材料和方法
1.1材料
1.1.1动物30只3 mo龄雌性SD大鼠（郑州实验动物养殖中心提供. 动物合格证号为医动字第410117号）平均体质量250~300 g. 所有受试大鼠均置于动物房中饲养1 wk，以适应环境. 然后随机分为3组，每组10只. G1组（C）为对照组， G2组（SIM10）给予辛伐他汀10 mg/(kg・d)， G3组（SIM20）给予辛伐他汀20 mg/(kg・d).
1.1.2材料DMEM培养基（Sigma）， β甘油磷酸钠(Sigma)，维生素C(Sigma)，辛伐他汀（商品名：西之达，国药准字H20000007）浙江瑞邦药业有限公司生产，碱性磷酸酶检测试剂盒(南京建成生物制品有限公司)， CCK8(日本协和化学研究所)，Trizol(Invitrogen)， MMLV逆转录试剂盒(BBI公司)， Taq DNA聚合酶(BBI公司)， 引物由北京华美生物工程公司合成.. 兔抗 cbfa1抗体，辣根酶标记的山羊抗兔Ⅱ抗，ECL发光试剂盒均购自美国SantaCruze公司.
1.2方法
1.2.1给药方法各亚组动物分笼，标准固体饲料和自由饮水摄食喂养，光照12 h，黑暗12 h，室温为（25±2）℃左右. 各实验组动物于手术后次日通过灌胃给药，对照组给予安慰剂灌胃. 连续灌胃给药28 d后处死所有动物.
1.2.2骨髓基质细胞的体外培养无菌条件下，处死的大鼠即刻取双后肢股骨和胫骨，将其附着肌肉和结缔组织分离干净. 用DMEM培养液（青霉素100 u/mL，链霉素100 μg/mL，100 mL/L胎牛血清，维生素C 50 μg/mL，β甘油磷酸钠10 mmol/L）反复冲洗骨髓腔，收集细胞于离心管中，1000 r/min离心10 min，弃上清，细胞重悬后反复吹打成单细胞悬液，细胞计数板计数，接种于培养瓶中，50 mL/L（体积分数）二氧化碳，37℃温箱中培养. 24 h后换液，以后，每2~3 d更换培养液，弃掉未贴壁的悬浮细胞. 至细胞融汇成致密单层后进行传代，细胞计数后接种于培养瓶和培养板中.
1.2.3RTPCR骨髓基质细胞在体外培养诱导14 d后，采用Trizol一步法提取细胞总RNA，RNA定量后反转录合成第一链后进行PCR， PCR反应体系: 总体积25 μL，包括：10×PCR buffer 2.5 μL， 25 mmol/L MgCl2 5 μL， 2.5 mmol/L dNTP 0.5 μL， 引物(25 μmol/L)各1 μL， Taq酶0.25 μL (5 U/μL)，cDNA模板2.5μL. PCR引物的序列: Cbfa1(扩增产物为 240 bp)上游引物： 5′CCCAACTTCCTGTGCTCC3′，下游引物：5′AGTGAAACTCTTGCCTCGTC3′)；GAPDH(扩增产物为288 bp)的上游引物: 5′TGCTGAGTATGTCGTGGAG3′ ，下游引物: 5′GTCTTCTGAGTGGCAGTGAT3′. PCR反应条件：cbfa1为95℃ 5 min； 94℃ 30 s； 55℃ 45 s； 72℃ 50 s； 35个循环；72℃ 10 min. GAPDH为95℃ 4 min；94℃ 30 s；54℃ 40 s； 72℃ 35 s；30个循环；72℃ 10 min. 循环结束后取扩增产物5 μL于20 g/L的琼脂糖凝胶电泳，电泳后再经溴化乙碇染色，最后将凝胶置于凝胶成像分析系统中扫描检测各条带的光密度值并求出与内参照物GAPDH的光密度比值.
1.2.4Western blot5 cm×5 cm培养瓶内细胞在经过诱导培养基诱导14 d后，细胞刮刀收集细胞. 细胞浆核蛋白抽提缓冲液［5］〔A：10 mmol/l HepesNaoH(pH 7.8)， 15 mmol/L KCl， 1 mmol/L MgCl2， 0.1 mmol/L EDTA， 1 mmol/L DTT， 1 mmol/L PMSF， 1 μg/mL Leupeptin. B: 20 mmol/L HepesNaoH(pH 7.9)， 1.5 mmol/L MgCl2， 0.42 mol/L NaCl， 0.2 mmol/l EDTA， 250 mL/L(体积分数)甘油， 0.5 mmol/L DTT，
0.5 mmol/L PMSF，
1 μg/mL Leupeptin. PMSF使用时临时加入. 〕顺序抽提提取核蛋白. 考马斯亮蓝G250蛋白定量，取相同蛋白量的样品，以排除细胞量的差别，SDSPAGE电泳，转膜，封闭液（50 g/L脱脂奶粉TBS+1 mL/L Tween20）封闭过夜，1∶200（体积比）稀释的兔抗Cbfa1多克隆抗体第一次杂交，室温温育2 h后，TBST洗膜3次以上，每次不少于5 min. 然后辣根酶标记的羊抗兔Ⅱ抗第二次杂交，室温温育1.5 h即可，洗膜后ECL发光试剂盒发光，显影，定影. 密度扫描仪定量分析.
1.2.5ALP（碱性磷酸酶） 活性的检测细胞培养14 d后，取培养液上清，ALP检测试剂盒检测碱性磷酸酶活性，单位为nkat/L.
1.2.6细胞增殖的测定将消化所得细胞以2×104/mL密度接种于96孔培养板，每组50孔，每孔培养基总量为100 μL，次日起每天选择各10孔细胞，连续测5 d，每孔加入CCK8溶液10 μL，37 ℃孵育4 h停止，在酶联免疫检测仪上测定每孔的光密度值（波长450 nm，参比波长655 nm），以时间为横轴，A值为纵轴绘制细胞生长曲线.
统计学处理： 实验数据以x±s表示，采用SPSS 10.0统计软件包进行分析. 不同给药剂量的实验组与对照组进行方差分析及Dunnettt检验，P＜0.05，具有统计学意义.
2结果
2.1倒置相差显微镜下细胞形态观测骨髓细胞接种后6~8 h，骨髓基质细胞（BMS）开始贴壁. 随培养时间延长，未贴壁的悬浮细胞死亡或随细胞液丢弃. 培养瓶中只有贴壁的骨髓基质细胞，骨髓基质细胞呈典型梭形或多角形的成纤维细胞. 培养约5~6 d后，细胞融汇至0.8左右.
2.2RTPCR骨髓基质细胞在辛伐他汀给药组中cbfa1的mRNA水平较对照组升高，G3组（20 mg组）水平更高（P
2.3Western blot结果显示辛伐他汀给药组G2 和G3组较对照组核蛋白cbfa1表达增高，而G3组（20 mg组）表达更高(P
2.4上清液ALP活性辛伐他汀给药组ALP活性高于对照组. G3组（20 mg组）增加更显著(P
2.5细胞增殖与对照组比较，辛伐他汀给药组中，G2组（10 mg组）与对照组比较有统计学差异（P0.05， 图4).
3讨论
通过本实验我们发现辛伐他汀促进大鼠成骨细胞相关因子ALP及cbfa1基因的表达，从而促进骨髓基质细胞的成骨分化，10 mg组有促进成骨细胞增殖的作用.
骨髓基质细胞作为一种多能干细胞，在特定条件下不仅可分化为成骨细胞，还可分化为脂肪细胞，成软骨细胞，甚至神经细胞等［7］. 而在骨组织工程学和骨质疏松治疗学方面，如何能有效的刺激BMSc定向诱导分化为成骨细胞，具有重要的理论和应用价值. ALP是成骨细胞的特异表型，ALP的活性在一定程度上反映成骨细胞分化程度和功能状态. 其活性越高，说明前成骨细胞向成熟成骨细胞分化越明显. 宋纯理等［8-9］发现在辛伐他汀对骨髓基质细胞体外培养干扰过程中，ALP活性明显增高，BMP2高表达并呈现剂量依赖关系OCN，骨桥蛋白（osteopontin，OPN）表达水平增高，呈现剂量依赖关系. 本研究结果与其一致，提示辛伐他汀有促进骨髓基质细胞向更多成骨细胞分化的潜质，并且可能具有刺激分化成熟的成骨细胞的成骨功能.
新近研究表明，核结合因子a1 即cbfa1转录因子是调节成骨细胞生成的关键因子，属于Runt结构域家族，因此又称Runx2（Runt related gene 2）. Cbfa1是成骨细胞分化早期的标志物，它可调节OCN基因表达. Ducy等［10］在小鼠和大鼠骨钙素基因启动子区发现了与cbfa1的Runt结构域特异性结合的连接基序，即成骨细胞特异性作用元件2（OSE2）. 随后又发现在Ⅰ型胶原（COI1）， OPN，骨结蛋白（ON）等成骨细胞标志基因中也存在这种启动子元件，cbfa1通过调节这些基因在成骨细胞的表达，来促进成骨细胞的分化和成熟. 当非成骨细胞异位表达cbfa1时，可使这些细胞表达骨钙素，而缺乏cbfa1基因的小鼠骨组织仅有软骨细胞和软骨，而无骨形成［11］. 人类常染色体显性遗传病锁骨颅骨发育不良综合症就是由cbfa1一个等位基因突变引起［12］. OPG（osteoprotegerin）是由成骨细胞分泌的破骨细胞分化和功能的抑制因子，其在体外培养细胞中的表达也同cbfa1密切相关［13］. 本实验中可见到辛伐他汀促进了cbfa1因子mRNA和蛋白的表达，说明辛伐他汀可通过提高cbfa1因子的表达来促进BMS分化为成骨细胞，从而使成骨细胞表达增强.
Cbfa1表达也受许多生长因子，激素以及转录因子的影响，Viereck等［14］报道cbfa1为成骨细胞分化成熟过程中BMP2， TGFβ和地塞米松的靶基因. 其中BMP是促进成骨细胞分化有效的细胞外因子，这类因子可通过Smads信号途径诱导cbfa1表达，并可能通过调节cbfa1Osx和其他转录因子来影响成骨细胞分化［15］. 他汀类药物进入体内后以前体药物的形式对蛋白酶体有抑制作用，进而抑制了BMP的下游信号调节蛋白Smad的降解，使BMP的含量增加. 但其明确，具体的作用靶点和途径机制有待进一步研究和证实.
目前已知与增殖激活有关的基因有cmyc， cfos， cjun， 与细胞周期有关的基因有组蛋白，细胞周期素基因. H4组蛋白的基因表达伴随细胞内DNA的合成，与增殖密切相关. 本实验中10 mg组促进细胞增殖，而20 mg组与对照组比较未见显著性差异. 辛伐他汀对增殖作用的机制是与激活相关基因有关还是与细胞周期基因有关，是否存在双向作用机制，即在较低剂量时促进成骨细胞增殖，而在较高剂量时抑制成骨细胞增殖尚待进一步研究证实.
目前，辛伐他汀已成为治疗骨质疏松的新型药物，对其成骨作用做了大量研究，但其临床应用尚待进一步证实，同样也有报道［16］，辛伐他汀可促进小鼠骨折愈合. 对骨折愈合的相关因子表达和具体作用机制未见其他报道. 因此，通过体内外实验探讨辛伐他汀对成骨作用的机制，为他汀类药物用于临床骨质疏松和骨折愈合治疗提供依据，将更有意义.
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集中体现中华民族淳朴审美理念的剪纸艺术有着强大的生命力，是民族艺术园地的一朵奇葩，我们的剪纸艺术家任重而道远，肩负保护传承的重任，又要研究发展的途径。笔者认为，内蒙古剪纸艺术的任务一是抢救与保护，二是继承与发展。众所周知，没有继承就没有发展，如同人类的繁衍，如果种族消失了，延续将是不可能的。因此，这个延续包含有抢救、传承、传播等多重意义和任务。
我国的民间剪纸艺术有着极强的民族性、地域性，也有因各个作者不同的秉性手法而产生的个性。要继承剪纸艺术就得深入到民间，深入到各个不同民族地区去了解其风俗民情，了解其个性语言。了解这些才能真正看到剪纸艺术发展的全貌，而不是盲人摸象。抢救的意义在于使发展千年的艺术样式、品种不至失传，以便传承上千年的文明之花为现代精神文明建设做出贡献。
内蒙古剪纸艺术作为非物质文化遗产首先应该列为保护之列。我们要打造“草原文化”品牌，建设文化大区，可是剪纸这种我们身边的文化形态似乎被人遗忘了。民间艺人在逐渐消失，而他们的后辈子孙又不愿学习这种技艺，使得剪纸艺术在现代数码科技的冲击下犹如珍奇标本，被封存于“文件包”内。在中小学美术课堂也只将其列为欣赏内容，并未实质性地加以保护和传承。在这里笔者要大声疾呼，剪纸艺术不能失传，要让更多的艺术品种保留下来，让更多人参与到这种简洁又古老的艺术形式的抢救、传播和发展中来。剪纸艺术没有过时，也不会过时。我们的剪纸艺术要发展，必须先抢救。
内蒙古剪纸学会会长段建珺先生就是一位民间剪纸艺术抢救的专家和先行者。笔者经常与段建珺下乡采访剪纸老人。为了让老人们保留下更多的原生态剪纸，他自费给老人们购买生活用品，每到一个剪纸老人家里都会买糕点、罐头和红纸等，问寒问暖，使老人们感受到对他们的关爱。段建珺十年如一日，走遍了和林格尔的山山水水，踏遍了内蒙古的草原大漠，现已收集到原生态剪纸3万余件，为内蒙古剪纸艺术乃至中国当代剪纸艺术的传承与发展做出了巨大的贡献。一次，笔者与段建珺前往和林格尔上脑亥村，征集一位94岁老人的剪纸，经过跋山涉水终于到了老人家里，可是老人的儿子伤感地说这位剪纸老人已经去世12天了。“抢救”这个词在笔者的脑海里立即打上了深刻的烙印，笔者感到原生态传统文化的丢失实在是太严重了。百岁老人张花女的剪纸艺术的挖掘、收藏、整理就是在和林格尔县政府支持下由段建珺实施的对民族文化抢救和保护的重要实例。一个不识字的农村剪纸老人，她的剪纸艺术造型语言和形式完全可以与毕加索、马·蒂斯的造型语言和形式比肩。这不只是老人天资灵性使然，更重要的是在老人的剪纸作品中传递着中华民族几千年的审美理念，她的剪纸承载了中华民族几千年的文化信息，是民族文化的活化石和几千年文化的传承符号。
张花女剪纸《龙食鱼》（图1）的造型与构图完全和汉代瓦当的《蛟龙食鱼》一致，这就充分印证了原生态剪纸是上千年传统造型艺术的传承者。我们在陕西榆林城访问到的一位74岁的剪纸老人，她现场剪的牛和羊，其造型特征几乎接近汉魏时期的壁画造型。我们在这里发现了上千年的古老文化的印记，让人感动。所以，从这个意义上来讲，从剪纸原生态文化符号的抢救中又派生出一点，即“寻找汉代、北魏文化的足迹”，为整理发掘古代北方汉族与少数民族文化信息找到了抢救以外的更多意义——考古价值。结合汉墓、北魏墓室、辽墓的考古发现，我们看到了北方民族上千年文化沉淀的痕迹。
原内蒙古剪纸学会会长、内蒙古师范大学美术学院教授包玉祥更是抢救和研究民族民间艺术的专家，他编著的《蒙古族图案》《内蒙古剪纸集》等，成为研究蒙古族图案和内蒙古剪纸艺术的重要文献。段建珺和包玉祥不光在抢救这门古老的剪纸艺术，而且也在传承和发展。他们把这种古老的民间艺术带入到课堂，让下一代更多的小学生、中学生、大学生继承传播这一世界独有的文化瑰宝。段建珺曾在和林格尔县职中开设了剪纸课，成立剪纸兴趣小组，进而连续办起了剪纸艺术学习班，以和林格尔县为基地，向全县、全区、全国辐射，建立了从原生态剪纸老人到小学、中学、大学再到各层次剪纸艺术家的完善的剪纸学会会员网络。包玉祥把剪纸艺术直接带到大学课堂。他们为剪纸艺术继承与发展做着辛苦而又实在的工作。与此同时，他们还连续编撰专著，为抢救和发展剪纸艺术不断地奔走呼号，甚至把剪纸艺术带到了天安门国旗护卫队，在战士中成立剪纸兴趣小组，受到大家的欢迎。他们为剪纸艺术的传承做出卓有成效的贡献，是内蒙古剪纸艺术抢救、保护和传承与发展工作的功臣。
内蒙古剪纸艺术的第二个任务是传承与发展。光有继承没有发展就没有活力。与时俱进的伟大哲学理论告诉我们，传统剪纸艺术不光要继承，还要不断发展，而且要常变常新。创新是艺术发展的硬道理，创新是艺术发展之灵魂。笔者认为剪纸艺术的创新有三种，一为改善型创新，二为改革型创新，三为吸收型创新。
剪纸艺术的传承一直是民间心传手教的方法，有很多程式化的格式，把这些传统格式加上现代元素或在形式上加以丰富就是改善型的发展。如陕西安塞剪纸的代表人物樊晓梅，在剪纸原始母体的形式上加以丰富，加上自己的理解和现代生活的内容元素而形成现代剪纸。这类剪纸给人以亲切自然贴近生活的美感，受到了外国友人的青睐。她把传统的东西加上丰富的纤细图纹，在繁密茂盛的细小纹样中衬托主体物，有主有次，有虚有实，很有新意!
从自己的个性特点出发，更注重个人理解，加入个人的审美取向，这一类应当是改革型的创新剪纸艺术。这类剪纸更个性、更有表现力、更主观。被誉为剪纸大师的张花女的剪纸当属这一类。一个没有受过书本教育的农村妇女，凭借她敏锐的直觉与洞察力，概括出了生动鲜活的“生活”符号，加之极富主观性的处理办法，其作品中的形象生动鲜活，打动着每个观赏她剪纸作品的人。她的画面处理是大胆的，不守常规却恰到好处，一目了然却耐人寻味。大片的空白衬托出大块“红”的主体物，然后由细小的花纹作配饰，形成线面结合、繁简对比的大气风格。她的作品大开大合，删繁就简，极简却极生动自然，可谓驾轻就熟，大巧似拙，生动活泼。在样式构成上也与常型不同，创造出很多随形适合的新构图。让人感受到艺术即人，人即是“我”，“我”就是画中之形的自信横溢的艺术才华。
兼容并蓄，自我生发是吸收型创新的特点。既从传统中吸收营养，又注重现代元素的吸纳，生发自我，有感而成。这一类剪纸富于现代感，同时又易为人接受，强烈的时代感包容于传统的图形中，使作品丰满又充满着活力。如段建珺的《草原雄鹰》（图2），在传统和林格尔剪纸的云纹花纹配饰下两个矫健的博克手，舞动章嘎跳起鹰步舞，又让这些图纹适合于传统的剪纸格式中，给人一种扑面而来的生活气息。
他的剪纸作品吸收了民间的图纹和随形穿插的伸缩透视法，形象按主次表达可大可小，又加入了现代绘画点线面组合、画面黑白灰的方法，加上自身对民族民间文化内涵的理解和巧妙构图，精致的制作，形成了兼容并蓄、极富现代感的现代剪纸。
关键词：氯化聚氯乙烯聚氯乙烯气固相光催化
Abstract: The author studied the synthesis process of chlorinated polyvinyl chloride (CPVC) initiated by UV light in a fluidized bed and explored the influences on chlorine mass content of reaction time, reaction temperature, volume fraction of chlorine gas in feedstock and UV light intensity. The optimal reaction conditions includs: the reaction time 1.5 h, reaction temperature 110 ℃, volume fraction of chlorine gas in feedstock 30%, UV light wavelength 300 nm and UV light intensity 211 μW/cm2. The chlorine mass content of the composite CPVC could reach 68.48% and the mechanical properties of the CPVC improved more noticeable in comparison with polyvinyl chloride.
Keywords: chlorinated polyvinyl chloride；pvc；gas solid phase；photocatalysis
中图分类号：TQ 325.3文献标识码: B文章编号:
氯化聚氯乙烯(CPVC)是将聚氯乙烯(PVC)进一步氯化改性的产物。在氯化过程中，一般可将w(Cl)从PVC的56.7%提高到CPVC的61 %～68 %[1-2]。（PVC的w(Cl)是多少？）与PVC相比，CPVC具有更优良的物理机械性能、耐腐蚀及阻燃自熄等性能[3-4] 。目前我国用于管材、型材等硬制品的CPVC需大量进口[5]。同时，我国氯碱行业的副产品Cl2除用于生产PVC外还有剩余，而生产CPVC是消纳富余Cl2的有效途径。
目前，CPVC树脂的生产工艺按氯化介质不同分为溶剂法、水相悬浮法和气固相法[6-7] 。溶剂法由于使用有机溶剂、能耗较高，目前几乎被淘汰[8]。水相悬浮法具有操作简单、产品性能较好等优点，是目前国内外CPVC生产所采用的主要方法。但该法流程较长，产生“三废”较多，成本相对较高[9-11]。杨金平等[12]用气固相搅拌式氯化法生产CPVC，该法流程简单、污染物排放小，但传热效果较差，不适宜大规模生产。
本研究采用紫外光引发，在流化床反应器中将PVC分子链中―CH2―中的H和―CHCl―链节中的H用Cl取代？反应式(2)中―CHCl―中H不继续被取代？（应给出产品分子结构式，已将方程式修改）实现CPVC的制备，重点考察操作条件对CPVC中w(Cl)的影响。将流化床反应器用于PVC氯化过程，可充分利用床层内混合均匀的特点，快速移走反应热，防止物料结块、变色。
1 实验部分
1.1主要试剂与仪器
PVC树脂，SG-5，河北金牛化工股份有限公司生产；Cl2，石家庄市电化厂生产；硝酸银、硫氰酸铵、硫酸铁铵，均为分析纯，市售。
气固相流化床，自制；紫外灯，南京华强电子有限公司生产；电位滴定仪，上海精密科学仪器有限公司生产。
1.2CPVC的制备
准确称取5.0 g的PVC粉末，装入流化床反应器中。反应器采用金属镀膜加热。料温达到50～70 ℃ 时，通入N2防止PVC被氧化。温度升至80 ℃ 后，开始加大N2流量使物料流化，并保持稳定。待达到氯化温度时，打开紫外灯，并开始通Cl2，通过调节N2与Cl2流量改变原料气中的φ(Cl2)，尾气用碱液吸收。反应完成后，取出产品，用蒸馏水浸泡0.5 h，抽滤，重复操作至中性，然后于60 ℃真空干燥至恒重。称量CPVC的质量，并分析产品中w(Cl)。
为了充分活化Cl2并防止紫外光能量过高时造成PVC分解，选择了能量相对适中的波长为300 nm的紫外光作为引发光源。
1.3w(Cl)的测定
CPVC产品中的w(Cl)按GB/T 7139―2002测定。
2结果与讨论
2.1反应机理
实验采用气固相光催化法氯化PVC，此反应为自由基反应，分为链引发、链传递、链终止三个步骤，反应机理见式（1）~式（5）。
链引发反应：
（1）
链传递反应：
（2）
（3）
（4）
链终止反应：
（5）
常见的引发方式主要有单纯热引发、紫外光引发及低温等离子体引发。单纯热引发方式即单纯依靠加热引发氯化PVC制备CPVC，所得产品的w(Cl)较低，反应过程中物料极易发黏变黄从而影响氯化反应的进行；低温等离子体引发氯化PVC虽然能够得到氯化均匀且具有较高w(Cl)的CPVC产品，但是该引发方式制备CPVC较难实现工业化；采用紫外光引发方式能够得到氯化均匀且具有较高w(Cl)的CPVC产品，若能解决工程问题，有望实现工业化，以期解决目前CPVC生产工艺中存在的环境污染、产品后处理繁琐等弊端。（请补充CPVC的核磁谱图或红外谱图，应有与PVC的谱图对比，以表明生成了CPVC）
2.2 产品的红外光谱分析
为了验证实验所得产品确为CPVC，首先对氯化后产物进行了红外光谱分析，结果如图1所示。从图1中可以看出，PVC经氯化后，波数为2900cm-1和830 cm-1处的C-H振动明显减弱，说明说明C-H键的数量较氯化前有所降低，同时，690cm-1处C-Cl键振动增强，说明聚合物中出现了更多的C-Cl键。由此可以证明，PVC经氯化后，确实生成了CPVC。
图1 产品CPVC与原料PVC红外光谱图
Fig.1 FTIR spectra of CPVC and PVC
2.3反应条件对产品w(Cl)的影响
2.3.1反应时间的影响
在原料气中φ(Cl2)为30%，反应温度为110 ℃，紫外光强度为211 μW/cm2，波长为300 nm的条件下，研究反应时间与CPVC产品w(Cl)的关系。由图2可知：反应开始CPVC的w(Cl)随着时间的延长而增加，最高可达68.10%。当反应时间超过1.5 h后，随着反应时间的延长，这种变化趋势减弱，反应逐渐趋于平衡。这是因为PVC 在氯化时发生自由基取代反应，反应初始阶段PVC分子链中含有较多的―CH2―和―CHCl―，Cl・碰撞到这两种基团发生取代的几率较大，所以氯化速度较快。随着反应进行，PVC分子链中―CCl2―逐渐增加，而―CH2 ―、―CHCl―逐渐减少，当反应到一定程度氯取代变得比较困难，此时反应趋于平缓。因此，选择1.5 h为PVC氯化的较佳反应时间，此时产品中w(Cl)为67.88%。
图2反应时间与w(Cl)的关系
Fig.2 Relation between reaction time and chlorine mass content
2.3.2反应的影响
在原料气中φ(Cl2)为30%，紫外光强度为211 μW/cm2，波长为300 nm，反应时间为1.5 h 的条件下，研究反应温度与CPVC中w(Cl)的关系。由图3可知： CPVC的w(Cl)随着反应温度的升高而增大，但达到110 ℃后这种变化趋势减弱。120 ℃ 反应时，产品w(Cl)可达68.48%。这是因为该反应为放热反应，温度越高，反应阻力越大，因而反应速率减小[12]。实验中发现，温度过高，物料会发生粘连变黄现象，使反应无法正常进行，这是因为一定w(Cl)的CPVC在较高温度下会发生降解脱HCl反应。因此，选择PVC氯化的较佳反应温度为110 ℃。
图3 反应温度与w(Cl)的关系
Fig.3 Relation between reaction temperature and chlorine mass content
2.3.3原料气中φ(Cl2)的影响
在反应时间为1.5 h，紫外光强度为211 μW/cm2，波长为300 nm，反应温度为110 ℃的条件下，研究φ(Cl2)与CPVC中w(Cl)的关系。高分子间的化学反应取决于高分子链上的活性基团的碰撞几率[13]，碰撞几率越高，分子间的反应越容易，反应速率也就越大，如果φ(Cl2)太低，使发生化学反应的有效碰撞几率降低。由图4看出：当φ(Cl2)在20% 以下时，改变Cl2流量对氯化产物中w(Cl)的影响显著，但随着φ(Cl2)进一步增大，这种影响迅速减弱，当φ(Cl2)超过30% 时，对产品w(Cl)的影响不大。因此，PVC氯化的原料气中较佳的φ(Cl2) 为30%。
图4 原料气中φ(Cl2)与w(Cl)的关系
Fig.4 Relation between chlorine gas volume fraction in feedstock and chlorine mass content
2.3.4紫外光强度的影响
在反应时间为1.5 h，φ(Cl2)为30%，紫外光波长为300 nm，反应温度为110 ℃的条件下，研究紫外光强度与CPVC中w(Cl)的关系。由图5可知：紫外光强度为211 μW/cm2时，w(Cl)达到较高值67.88%，再提高光强度，产品中w(Cl)反而下降。这是因为CPVC分子链中的缺陷与PVC的相似，包括烯丙基氯、活泼氢原子和氯原子、双键、含氧基团、头头结构及重复单元的空间排布[14]。由于聚合物链中的各种缺陷结构使CPVC受强光容易发生分解，首先脱去HCl，产生的HC1更进一步地促进了CPVC分子链中HCl的脱去，从而导致产品w(Cl)降低。
图5 紫外光强度与w(Cl)的关系
Fig.5 Relationship between UV light intensity and chlorine mass content
2.4产品性能分析
2.4.1物理性能
国内目前还没有CPVC产品的质量标准，各生产厂家一般采用PVC的标准检验其性能。因此，本研究也按GB/T 5761―2006检验最优条件下合成CPVC的主要物理性能（膜？粉末）。从表1看出：产品性能均能达到标准要求。
表1CPVC产品性能
Tab.1 Properties of the CPVC product
项 目 GB/T 5761―2006 CPVC性能
杂质粒子数/个 ≤30 21
挥发物(包括水)质量分数，% ≤0.40 0.30
筛余物质量分数，% (筛孔0.250 mm) ≤2.0
≥90 1.7
121
(筛孔0.063 mm)
“鱼眼”数/[个・(400 cm2)-1] ≤40 35
白度（160 ℃，10 min），% ≥75 95
2.4.2力学性能
本实验对比分析了制备的CPVC与原料PVC、工业品CPVC的力学性能。试样制备工艺为：开炼温度为160 ℃、开炼时间为10 min、平板硫化机压力5 MPa、常温冷却，分别测定力学性能。从表2看出：PVC原料采用气固相氯化后，各项性能均与水相法生产的工业品相近，比原料PVC有较大提高。
表2力学性能比较
Tab.2 Comparison of mechanical properties
项 目 CPVC CPVC工业品 PVC
维卡软化温度/℃ 125.9 120.0 80.0
拉伸强度/MPa 58.29 50.00 40.00
弯曲强度/MPa 128.15 106.00 104.00
冲击强度/(kJ・m-2） 17.41 16.00 15.30
洛氏硬度 120 119 100
3 结论
a)在气固流化床中以紫外光引发合成了CPVC。
b)在该反应体系中，制备CPVC的最佳工艺条件为：反应温度110 ℃，反应时间为1.5 h，原料气中φ(Cl2)为30%，紫外光波长为300 nm，紫外光强度为211 μW/cm2。
c)在最佳工艺条件下，得到白色CPVC的w(Cl)可达68.48%，主要性能达到GB/T 5761―2006的要求。产品力学性能相对原料PVC有较大提高。
参考文献
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（西安航天动力机械厂，西安 710025）
（Xi′an Aerospace Power Machinery Factory，Xi′an 710025，China）
摘要：在固体火箭发动机金属件焊接施工过程中，对焊接材料、焊接设备、焊接工艺规程、焊接生产现场等环节进行有效的质量控制，以保证产品的焊接质量。在本文的研究中，分析了焊接过程质量控制要点，在此基础上，通过长安福特焊接车间的质量控制的实际案例，说明了在实际焊接过程中，通过采取合适的过程质量控制措施，可以在很大程度上提高金属件焊接效果。
Abstract： In the welding construction process of solid rocket motor metal parts， the effective quality control of the welding material， welding equipment， welding procedure， welding production site can ensure the welding quality of the product. This paper analyzes the quality control points of welding process. On this basis， the actual cases of the quality control in the welding workshop of S-MAX show that the appropriate process quality control measure can largely improve the welding effect of the metal parts in the actual welding process.
关键词 ：发动机；金属件；焊接；质量控制
Key words： motor；metal parts；welding；quality control
中图分类号：V463 文献标识码：A 文章编号：1006-4311（2015）19-0234-02
作者简介：王文娟（1982-），女，河南荥阳人，硕士研究生，工程师，主要从事固体火箭发动机金属件加工过程的质量控制与检验技术工作。
0 引言
焊接是一种永久性连接金属材料的工艺方法。焊接过程的实质是通过加热或加压力等方式使金属原子结合或者扩散，将分离的金属材料紧密连接在一起。焊接方法在制造大型结构件或复杂机器部件时，更显得优越。它可以化大为小、化繁琐为简单，通过这种方式配料，然后逐次装配焊接拼小成大，拼简单成复杂。这是其它工艺方法难以做到的[1，2]。
近年来，随着我国航天事业的快速发展，型号任务逐年增加，工厂的科研生产呈现出高密度、严要求、快节奏的新形势，对发动机金属件焊接质量的要求越来越高。在发动机金属件的制造过程中，焊接是一道比较特殊的工序，单纯地采用试验方法检测产品的工后质量无法获得更为全面的结果，必须通过试运行和正常使用才能发现其质量缺陷[3]。所以，一定要重点控制产品的施工质量。本文从焊接材料、焊接设备、焊接工艺规程、焊工管理、焊接生产现场、焊接试件、焊后无损检测等几方面对发动机金属件焊接过程进行质量控制，以保证产品获得较高的焊接质量。
1 焊接材料
物采部门依据焊接技术人员拟定的焊接材料采购技术条件向合格供方订货。从不同厂家出厂的焊条，即使型号/牌号一致，其生产工艺也有可能存在差异。所以采购时选定相对固定的焊条生产厂家，以保证焊材的一致性。收到供货方的焊材后，首先检查是否附带厂家出具的质检证书和合格证，是否明确标示了焊条的出厂批次，建议用专业技术设备复测焊材质量，确认质量达标再入库存放。
入库后，需要根据焊材的生产批次、型号、牌号等分类堆置。库房室温最低5℃，相对湿度应该在60％以内，货架应该与墙壁、地面之间保持300mm的距离。使用焊条、焊剂之前，应先烘干并保温，处理妥当后定额发放。为确保焊接材料的正确使用，焊工在领用焊材时必须在“焊材发放记录”上签字。焊材库保管员在发放焊材时须记录每次发放的数量，并核对焊工返回的焊条头、焊丝头数量与发放记录是否一致。
2 焊接设备
焊接设备必须定期测试和检修，并建立设备维修技术档案，保持设备良好和可靠的使用状态。大功率或有特殊要求的焊接设备，应采用专用电源或稳压装置。新启用或大修后的设备，必须经过鉴定，试用合格后方可使用。
3 焊接工艺规程
焊接专业工艺师必须根据设计图样、技术条件和有关标准，编制焊接工艺规程，经批准后方能实施。焊接工艺规程中除应规定详细的焊接工艺参数外，还应明确规定使用的设备型号、检测器具、预热、保温设备及热处理时间；焊接件和焊丝的准备、装配和焊接质量要求；给出随炉试样的下料图、编号和数量等。
焊接工艺参数应先经过工艺评定或工艺试验，证明可行后方能纳入工艺规程。焊接试验人员按焊接工艺评定指导书进行工艺评定试板的施焊、无损检验、焊后热处理，并按工艺评定指导书及有关标准的要求进行试件解剖和性能检验。性能检验合格后按施焊记录、热处理记录和力学性能报告结果出具“焊接工艺评定报告”，为产品焊接工艺规程的制定提供依据。
焊接返修需要提前制定一套操作规程，明确缺陷成因及治理措施，说明应使用哪种型号/规格的焊材以及技术参数。施焊前，先将缺陷部位清理干净，必要时可通过无损检测确定缺陷的程度。
4 焊工管理
焊工须通过院焊接委员会组织的理论考试和技能考试，应持证上岗。在具体操作中需要严格遵守工艺流程，详细填写施焊记录并签字。
为了提高焊接工艺质量，焊厂应该为焊工建立档案，定期跟踪记录其焊接项目、所采用的技术手段、质量检验方法、焊缝合格率等等，以确保所有焊接项目质量可控。
5 焊接生产现场
焊接生产现场使用的技术文件必须是现行有效的版本。焊件待焊部位的准备和装配质量必须符合有关标准、设计图样和工艺规程要求。焊件、焊丝焊前必须按规定进行表面处理，并在规定的时间内进行焊接。同一工位只许摆放一种牌号的焊接材料，如有特殊要求需要一种以上的焊材时，应采取严格措施，防止混料和使用。有热处理要求的焊件，必须在规定的时间内按有关文件规定进行热处理。
焊接过程要有焊接施焊监控记录，保证焊接质量的可追踪性。焊接检验员监督焊接过程，核对操作者填写的焊工施焊监控记录的正确性、完整性、符合性，并盖章确认。
6 焊接试板
产品焊接试板是焊接生产过程检验的一种重要手段，是对产品的主体材料包括主体焊缝的焊接材料、焊接工艺和焊工技能的综合检验。
产品焊接试板必须与主体焊缝同材料同工艺并连在焊缝上和焊缝同时由同一个焊工施焊。有热处理要求的产品，其试板必须和筒体同炉热处理。试板分割后应按相关要求进行拉力、弯曲、冲击及金相试验，出具性能检测报告。
7 焊后无损检测
焊接完成清理干净后需进行无损检测来检验焊缝质量。无损检验人员应按标准规范要求取得相应资格，在接到焊接检验员的“无损检验委托单”后，按图纸、技术条件、相应标准编制无损检验规程，进行无损检验操作，并出具无损检验报告。
8 长安福特马自达焊装车间过程质量控制实例分析
8.1 引进先进监测系统，提高焊接过程的监测效果
长安福特马自达焊装车间引入了德国BOS 6000系统，可以对该车型所有焊接机器人和焊点进行实时监控，既可以监控每个焊点的焊接参数、飞溅大小、焊接质量，还可以监控焊接机器人电极头的磨损情况、打磨频次等。
8.2 运用科学的点焊检验技术，更为准确地控制焊点内部缺陷
在焊接生产过程中，对样件进行强度检验的环节也非常重要。点焊检验手段主要有非破坏性检查（Non-Destructive）和破坏性检查（Destructive）两种方式，非破坏性检查包括撬检、超声波检验等，破坏性检查包括Teardown点焊检查和激光焊/MIG焊金相分析等。超声波在被检测焊点金属材质中传播时，焊点内部组织的变化对超声波的传播会产生一定的影响，通过对超声波受影响程度和状况的探测，可以了解焊点性能和内部缺陷。比如：波峰逐级降低过缓（较平整），说明该焊点存在低热溶现象，波峰逐级降低过陡（较陡峭），说明该焊点存在过热溶现象。比如：波峰逐级降低过缓（较平整），说明该焊点存在低热溶现象，波峰逐级降低过陡（较陡峭），说明该焊点存在过热溶现象。
8.3 利用先进的测量技术和工具，有效控制整车尺寸
长安福特公司焊装车间为了有效监控整车尺寸，避免后续工位出现装配困难、匹配不良等问题。采用了先进的德国ZEISS 3D测量和瑞士Leica无线CMM 3D测量技术，对工装夹具、分总成到总成都能做到定期监控，通过SPC的监控手段，使得每个测点都可以根据历史测量数据在车间网站自动生成I-MR控制图来产生预警，做到及时发现问题、提前围堵问题、制定改进措施、输出合格产品。
8.4 效果分析
总的来看，长安福特马自达焊装车间的过程质量控制，采用德国BOS 6000等先进的检测系统，在实际焊接时，通过运用准确的焊点检验技术，并且有效控制车身的尺寸，不仅提高了整车CTQ（成本、时间和质量）表现，还有效确保了各车型安全、精准、稳定的产品质量。通过全公司各个车间、焊接工艺各个环节进行的质量改进，公司的整车的焊接作业质量管理工作有了明显提升，产品和企业的竞争力都将得到有效增强。
9 结语
当前，产品质量水平已成为影响企业竞争力和经济效益的关键因素，在产品质量的形成过程中，工序质量是形成产品质量最基本的环节，制造过程中质量控制的核心即是加工工序过程的质量控制。通过加强焊接材料、焊接设备、焊接工艺规程、焊工管理、焊接生产现场、焊接试板等方面的焊接过程质量控制，从而使固体火箭发动机金属件的焊接质量得到保证。为跟上我国航天事业发展的新脚步，在今后的科研生产中必须持续提高固体火箭发动机金属件的焊接质量，这就需要大力培养高素质的焊接人才和技术过硬的焊工队伍，在技术上不断进步，在工艺上不断创新。同时还要加强有关人员的培训和教育，提高思想素质和责任心，使质量控制落实到每道工序和每个人员。
参考文献：
[1]邓文英，郭晓鹏.金属工艺学[M].北京：高等教育出版社，2001：130-131.
关键词： 苍术挥发油 增殖作用 成骨样细胞UMR－106 MTT 法
苍术（Rhizoma atratylodes）为菊科植物南苍术Atractylodes lancea ( Thunb.) DC.或北苍术Atractylodes chinensis Koidz.等的干燥根茎。苍术性辛、苦、温，归脾、胃、肝经，具有燥湿健脾、祛风散寒、明目作用。主治脘腹胀满、泄泻、水肿、风湿痹痛、风寒、感冒等［1］。
苍术在中医临床中使用十分广泛。已有研究发现苍术挥发油增加去卵巢雌性大鼠的骨钙含量（闫雪生《苍术油软胶囊的研制》。山东中医药大学硕士学位论文，2002），但对苍术挥发油是否影响成骨细胞的增殖，尚未见报道。本实验研究苍术挥发油对成骨细胞UMR-106的增殖作用。
1 材料与方法
1.1 材料
苍术药材购自上海德康药业有限公司,经中国第二军医大学药学院生药教研室黄宝康副教授鉴定为苍术Atractylodes lancea (Thunb.) DC.的干燥根茎。
1.2 试剂
DMEM 培养基(Cibco)；3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基-四唑氢溴酸盐MTT(Sigma)；胎牛血清FBS(杭州四季青生物工程材料研究所)；胰蛋白酶(Cibco)；其它试剂均为国产分析纯。
1.3 方法
1.3.1 挥发油样品的制备水蒸气蒸馏法：将药材样品粉碎过40目筛，精确称取200 g的苍术，加水浸泡1 h，然后用挥发油提取器按常规水蒸气蒸馏，提取直至挥发油的量不再增加，蒸馏液用正己烷萃取，萃取液用无水硫酸钠干燥，过滤，微热蒸去溶剂得挥发油样品，挥发油样品为淡黄色透明油状物，具有刺激性气味。取50 mg挥发油样品溶于1 ml二甲基亚砜中，用灭菌过的0.2 mm 滤器( Gelmann Sciences) 除菌,并于4℃保存，备用。临用时用DMEM培养液稀释至所需浓度。
1.3.2 成骨样细胞UMR－106的培养［3］UMR－106 (大鼠成骨肉瘤细胞系) 细胞株获赠于江苏镇江医学院病原生物教研室,源于美国麻省医学院。将UMR-106细胞培养于10％胎牛血清（100KU/L青霉素，100 mg/ml链霉素）的无菌DMEM培养基中，置37℃,5%CO2培养箱中进行培养。取生长状态良好的细胞，用0.25％胰蛋白酶消化，加含胎牛血清的培养基制成细胞悬浮液，调整细胞浓度为5×106个/ml接种于100 ml培养瓶中，二氧化碳培养箱中孵育，2～3 d换液1次。
1.3.3 MTT 法测定细胞的增殖［2］取对数生长期细胞消化计数后,用含血清的DMEM 细胞培养液将细胞浓度稀释至1×105个/ml ,铺入96孔细胞培养板中(100 μl/孔)培养24 h后加入含不同浓度挥发油(每个浓度6孔)的无血清DMEM培养。结束培养4 h前弃去培养液,每孔加入20 μl MTT(5 mg/ml,用PBS配制)继续孵育4 h,有蓝紫色沉淀生成,每孔加入150 μl二甲基亚砜(DMSO) ,振荡10 min待沉淀完全溶解,用酶标仪以550 nm 为测定波长、650 nm为参比波长测定吸光值,以不加中药的细胞孔测得的吸光值为空白,用t检验进行各加药组与空白组之间均值的比较。细胞增殖率的计算如下：
增殖率（%）= Ai实验组- Ao对照组Ao对照组×100%
Ai：不同条件下的吸光值；Ao：空白组的吸光值
2 结果
2.1 MTT 法测定细胞增殖与吸光度的关系将UMR-106细胞分别以6个不同浓度(1×105～1.2×106个)铺入96 孔板,培养8 h贴壁后,用上述方法测定每孔吸光度(Y),与细胞数目(X)作线性回归,得标准曲线方程：Y=0.054+0.092 6×10-6X(r=0.986 0,n=6),两者具有良好的线性关系。见图1。
2.2 挥发油对细胞增殖的作用用1，0.1，0.01，0.001 mg/ml 4种浓度的挥发油作用于细胞24 h，在λ＝550 nm测定其吸光值。结果见表1 。表1 不同挥发油浓度对UMR-106的增殖作用(略)
苍术挥发油浓度0.001 mg/ml时培养24 h，可明显促进细胞的增殖,细胞的增殖率为10.44%。在低的浓度下对细胞增殖有轻微的抑制作用,表明挥发油短期内使用低浓度较好。
为了观察挥发油促细胞增殖的最适宜的作用时间,用浓度为0.001 mg/ml的苍术挥发油作用于细胞分别为24，48，72 h , 在λ＝550 nm测定其吸光值。结果见表2。表2 不同作用时间对细胞增殖的影响(略)
由表2可见，当挥发油在浓度为0.001 mg/ml作用24 h时能明显刺激UMR-106增殖，在近48 h时增殖率为20.96％， 达到最强,72 h 时细胞数目又下降。
3 讨论
苍术挥发油在0.001 mg/ml浓度下作用24，48 h，均对UMR-106增殖有明显的促进作用。UMR-106大鼠成骨肉瘤细胞系从形态和性质上都保留了成骨细胞独有的特征, 并且具有稳定、均一、纯度高等优点。 因此,UMR-106 细胞作为一种国际公认的成骨细胞系可以用来代替成骨细胞［3］。在骨形成最初阶段的成骨细胞增殖期, 成骨细胞数量增多, 形成多层细胞并合成、分泌I型胶原以便最终矿化形成骨结节。成骨样细胞的增殖与细胞培养液中药物的成分有关, 与成骨样细胞UMR-106共同体外培养的方法可能作为对骨形成有促进作用的活性化合物的筛选模型, 经过进一步的动物体内实验从这些活性药物中追踪对骨形成有促进作用的活性成分。因此，以成骨样细胞UMR-106 的增殖为活性指标,观察了苍术挥发油对该细胞系增殖的作用。由于采用的是苍术挥发油和细胞共同体外培养的方法,推测苍术挥发油中含有直接刺激成骨样细胞增殖的成分,为苍术治疗骨质疏松症提供初步筛选，具体机制有待进一步研究。
【参考文献】
欧体”。其源出于汉隶，骨气劲峭，法度谨严，于平正中见险绝，于规矩中见飘逸，笔画穿插，安排妥贴。楷书以《九成宫醴泉铭》等，行书以《梦奠帖》、《张翰帖》等为最着名。其他书体，也无一不佳，唐张怀瓘《书断》中说：“询八体尽能，笔力险劲，篆体尤精，飞白冠绝，峻于古人，犹龙蛇战斗之象，云雾轻宠之势，风旋雷激，操举若神。真行之朽出于大令，别成一体，森森然若武库矛戟，风神严于智水，润色寡于虞世南。其草书迭荡流通，视之二王，可为动色，然惊其跳骏，不避危险，伤于清雅之致。”
虞世南说他“不择纸笔，皆能如意”。而且他还能写一手好隶书。贞观五年《徐州都督房彦谦碑》就是其隶书作品。他的书法，以隶书为最。究其用笔，圆兼备而劲险峭拔，“若草里惊蛇，云间电发。又如金刚怒目，力士挥拳。”其中竖弯钩等笔画仍是隶笔。他所写《化度寺邑禅师舍利塔铭》，《虞恭公温彦博碑》，《皇甫诞碑》被称为“唐人楷书第一”。
他的楷书无论用笔，结体都有十分严肃的程式，最便于初学。后人所传“欧阳结体三十六法”，就是从他的楷书归纳出来的结字规律。他的行楷书《张翰思鲈帖》体势纵长，笔力劲健。墨迹传世，尤为宝贵。欧阳询的儿子欧阳通，书法一本家传。父子均名声着于书坛，被称为“大小欧阳”。小欧阳《道因法师碑》，隶意更浓，然而锋颍过露，含蓄处不及其父。
欧阳询的书法早在隋朝就已声名鹊起，远扬海外。进入唐朝，更是人书俱老，炉火纯青。但欧阳询自己却并不满足于已经取得的成就，依然读碑临帖，精益求精。
有一次，欧阳询外出游览，在道旁见到一块西晋书法家-索靖所写的章草石碑，看了几眼，觉得写得一般。但转念一想，索靖既然是一代书匠，那么他的书法定会有自己的特色。我何不看个水落石出。于是伫立在碑前，反覆地观看了几遍，才发现了其中精深绝妙之处。欧阳询坐卧于石碑旁摸索比划竟达三天三夜之久。欧阳询终于领悟到索靖书法用笔的精神所在，因而书法亦更臻完美观止。
楷书，是欧阳询得意的作品，唐贞观五年（公元631年）立。
