时间：2023-09-01 16:42:38
引言：易发表网凭借丰富的文秘实践，为您精心挑选了九篇统计学取样方法范例。如需获取更多原创内容，可随时联系我们的客服老师。
1.1一般资料
在本次研究中所选择的研究对象为我院2014年1月～2015年1月收治的需要进行妇科医学检验的患者120例，年龄24～51岁，平均年龄38岁，患者所患的妇科疾病种类有所不同，其中因为阴道炎而接受治疗的70例（58.3%），因为人工流产或者放置节育环而进行相关检验的30例（25%），因为妇科手术或者其他原因而进行医学检验的20例（16.7%）。所有患者的阴道分泌物的检验均在我院相关的检验室进行。
1.2方法
利用随机原理将患者平均分为两组，各60例，为了便于记录，把这两组分别命名为1组和2组，并把每一个小组都再分为对照组和观察组。分别把木质刮板以及棉签作为取样工具对患者阴道分泌物进行取样，在1组中采用盐水镜检法进行检测，在2组中运用革兰氏染色法对其进行检测。在利用盐水镜检法时，相关的检测人员必须注重氢氧化钠的加入，从而保证检测率的准确性。革兰氏染色法就是在对相关分泌物进行镜检前对其进行染色，进而观察相关的细菌的检出情况。
1.3统计学处理
本次研究中所有数据的获取以及分析均采用统计学软件SPSS19.0进行分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。另外为了方便相关研究的进行，把本次研究的结果以四张图标的形式所呈现。
2结果
通过相关验证性措施的采取，可以发现利用棉签作为取样工具的感染检出率高于以木质刮板作为取样工具的组别。其中利用棉签作为取样工具的综合检出率为84%，以木质刮板为取样工具的综合检出率为75%。利用革兰氏染色法比利用盐水镜检法的检出率要高，其中利用革兰氏染色法的综合检出率为93%，利用盐水镜检法的综合检出率为81%。
3讨论
关键词：ARFI；正常胎盘；初步评价
超声辐射力脉冲成像技术（英简ARFI）是一种基于超声技术[1]，短时间高强度声脉冲机械地刺激目标组织产生剪切波，可以将人体脏器的弹性程度量化，是一种新的方法。目前有研究将ARFI应用于肝脏、肾脏、甲状腺、颈部斑块等领域研究，但还没有应用胎盘方面的研究，本研究针对不同孕周，不同位置及不同取样深度的胎盘进行ARFI指数分析，进行初步研究如下。
1 资料与方法
1.1一般资料 随机选取2012年6月～2013年6月间孕（18～41）w单胎487例，入选标准：无母体疾病，既往无不良妊娠史，月经规则，实验室检查包括AFP、PAPPA、β-HCG无异常，胎儿系统超声检查无阳性发现，生后正常方可纳入。
1.2方法 采用德国西门子S2000彩色多普勒超声诊断仪，4C1凸阵探头，频率范围1.5～4.0MHz。
所有胎儿均为在我院常规行Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级产前超声检查 ，对胎儿进行相应的检查，所有研究对象均选择胎盘中央的部分，不靠近胎儿面或母体面，检查时嘱被检者在平静状态下呼气末屏住呼吸，检查者维持探头与扫查部位的垂直和固定，根据胎盘的位置调节不同的取样深度，取样深度在8cm以内，每位患者取避开胎盘血窦的胎盘实质测量9次，取平均值作为ARFI测值，单位为m/s。
1.3统计学分析 采用SPSS17.0统计软件。Pearson相关分析求出各孕周胎儿胎盘的ARFI值；t检验比较前、后壁胎盘ARFI值；t检验比较不同取样深度的胎盘ARFI值。P
2 结果
2.1各孕周胎盘ARFI值的关系 根据不同孕周分成亚组，统计各孕周与ARFI值的关系。相关系数r=0.033，P值0.471>0.05，没有统计学差异，与孕周之间无相关性，均数（0.776±0.078）。见图1。
图1
2.2不同胎盘位置的ARFI值 根据胎盘前、后壁的位置分成两组，比较前壁胎盘与后壁胎盘的ARFI值。见表1。
2.3不同取样深度时胎盘的ARFI值 根据取样深度分成两组，≤4cm为一组，4.1～8cm为一组，比较不同深度ARFI值的区别，差异性明显，P
3 讨论
胎盘是母胎进行代谢产物、营养物质以及气体交换的器官，其母血循环障碍，或是胎盘自身异常及病变，均会造成胎盘组织的病理改变。正常胎盘存在一定的代偿能力，在其病变广泛、严重时，将出现失代偿现象，致使胎儿缺氧，或是胎死宫内。ARFI技术是超声弹性成像技术的一种，是利用调制的聚焦超声波束作为激励机制，组织受力后产生纵向压缩和横向振动，产生声剪切波，利用特定的电子系统采集组织内剪切波信号，就可以获得感兴趣区域的低频剪切波的传播速度。而剪切波的速度依赖于组织弹性，从组织弹性模量的估算，就可间接反映出该区域组织的弹性程度[2]。
胎盘功能、形态、位置的监测是围产医学的一项重要课题，胎盘功能是否正常，对胎儿的发育与安危具有极为极为不利的影响[3]。现阶段，胎盘功能、成熟度主要是通过超声图像进行初步评估，但是常规超声检查不能对组织弹性方面进行评价。而ARFI技术评价组织的弹性，对妊高症、胎儿宫内发育迟缓等胎盘病变的初步诊断具有价值。
本次试验研究针对不同孕周、不同胎盘位置、不同取样深度的胎盘进行ARFI检测，结果显示ARFI指数与孕周相关性分析，不同孕周之间没有明显差异性；胎盘前壁、后壁检查显示，ARFI指数分别是（0.77±0.08）与（0.79±0.19），二者之间相对比差异性不明显。但是对于不同取样深度的ARFI检查显示，ARFI指数结果分别是（0.77±0.08）与（0.78±0.07），二者相互比较具有显著性差异。造成这种结果可能与声传播的衰减有关，声波传播得越远，吸收的声波越多，衰减越多。相关文献研究的取样深度也与本次研究结果相似，丁红等[4]进行了ARFI评价慢性肝纤维化的研究，取样深度为距探头4～5cm，张大等[5]进行了非酒精性脂肪性肝病肝纤维化的ARFI值研究，取样深度为距肝包膜1～3cm，即距探头2～4cm。根据相关文献研究结果及我们研究认为测量胎盘的ARFI值时，取样深度应距探头4cm以内比较合适，当胎盘位于后壁时，可嘱孕妇侧卧，尽量将取样深度控制在4cm以内。由此说明，不同孕周、不同胎盘位置对ARFI技术检查结果没有明显影响，而不同取样深度对检查结果具有不同程度的影响，取样深度应该尽量控制在距探头4cm以内。
ARFI技术作为实时超声弹性成像技术，可以精确无创的定量胎盘实质的弹性程度，不同孕周、不同位置及不同取样深度的ARFI指数无显著差异。本研究发现，不足之处：本研究只是对正常胎盘组织进行初步研究，对于有疾病的胎盘，例如妊高症的胎盘等还有待今后进一步的研究。
参考文献：
[1]蒋贤辉，胡婷，张竹君，等.ARFI 技术在定量分析糖尿病肾病中的临床应用[J].中国中西医结合肾病杂志，2013，14（3）：227-228.
[2]张新力，李猛，冯卉，等.声触诊组织成像量化技术无创评价慢性肝病肝纤维化程度的初步临床研究[J].中华超声影像学杂志，2010，19（1）：12-15.
[3]白桦，高静，李灿宇.重度子痫前期患者脐动脉血流与胎盘病理改变的相关性研究[J].中国妇幼保健，2011，26（12）：2278-2279.
关键词：慢性萎缩性胃炎；胃镜活检；活检钳；取材深度
胃癌在临床上的发病率较高，是我国导致死亡率居前三的恶性肿瘤之一[1]。慢性萎缩性胃炎是目前国际上公认的癌前病变类型，对该病的诊断主要通过内镜检查联合病理检查，其中病理检查是慢性萎缩性胃炎诊断的金标准[2]。胃粘膜活检标本的取材深度对于准确诊断慢性萎缩性胃炎具有非常重要的作用，活检钳的性能好坏能直接影响取材深度。目前临床上关于不同类型的活检钳的取材深度的相关研究较少，因此本文就慢性萎缩性胃炎患者接受胃镜活检时采用两种活检钳的取材深度进行分析与对比，旨在为提高患者的诊断准确性提供科学根据，具体报告总结如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取本院2010年9月-2012年9月期间收治的慢性萎缩性胃炎患者共100例，其中男性57例，女性43例，患者年龄为42-72岁，平均年龄57.0岁。所有患者均通过内镜检查与病理活检确诊，在选取样本的过程中已排除符合以下标准的患者：1）消化道溃疡或肿瘤；2）近1年内接受过胃部手术；3）长期酗酒史；4）心、肝、肺、肾功能障碍；5）食道静脉曲张。所有患者在接受本文研究前均签署知情同意书，本院伦理委员会对本次研究已批准。随机将患者均分为2组，对比两组患者的年龄、性别等基本资料，无显著性差异，具有可比性。
1.2 检查方法 对于A组患者采用有针胃钳进行取样，B组患者采用无针胃钳进行取样。首先对两组患者均按照相关规定进行常规胃镜检查，再使用活检钳取胃体下部大弯、胃窦大小弯以及胃角体侧组织各一块，每次操作时医生应尽量保持手法一致，将不同部位取得的活检样本分类保存。将样本浸入10%福尔马林溶液中，并送入病理实验室检查。
1.3 评价标准 将本文所有患者的最终病理诊断结果作为标准，与两组患者获得的标本进行对比，以计算诊断的符合率。每例患者共取样4块，以4块中≥1块样本取材深度达到粘膜肌层作为取材深度满意的标准[3]。
1.4 统计学方法 本文所有数据使用SPSS 16.0软件进行分析与计算，计数资料采用%表示，组间比较采用X?检验，以P
2 结果
2.1 取样满意率 对比两组患者的取材深度满意率可得，A组与B组的取材深度基本一致，差异性无统计学意义（P>0.05），详细数据见表1。
2.2 检查符合率 比较两组患者采样后的病理检查结果与最终病理检查结果，差异性无统计学意义（P
3 讨论
内镜活检取样是诊断各类胃肠道疾病的重要措施，慢性萎缩性胃炎是目前公认的胃癌的癌前病变，因此需对其采取胃镜联合内镜活检，便于医生选择适宜的方式进行治疗。内镜活检取材深度不够可能导致患者的诊断一致性降低，影响医生的判断[4]。活检钳的种类较多，其自身大小、结构、材料等均具有差异性，对取材深度具有明显的影响。目前我国常用的活检钳主要可分为有针型与无针型两种，关于上述两种活检钳的取材深度的相关报道相对较少。
根据本文研究结果显示，采用有针胃钳进行活检的A组患者与采用无针胃钳进行活检的B组患者，其取样深度满意率差异性无统计学意义（P>0.05）。而对比两组患者的样本检查结果与最终诊断结果，符合率无显著性差异（P>0.05）。由此可见，采用有针胃钳与无针胃钳的取材深度基本一致。综上所述，对于慢性萎缩性胃炎患者采取有针胃钳或无针胃钳进行活检取样，均能达到满意的效果。鉴于有针胃钳在移放组织的过程中可能改变标本方向，进而影响切片效果，因此本文建议，在能使用无针胃钳的情况下，对于慢性萎缩性胃炎患者尽量采用无针胃钳取样，以保证操作的严谨性。
参考文献
[1]李泉，刘萱，谭晓叶，等.比较两种活检钳在慢性胃炎诊断中的临床价值[J].中华消化内镜杂志，2009，6（2）：400-401.
[2]Schafer W，Holis-Perry KM，Mondragon RM，et al.An observer-blinded，prospective，randomized comparison of forceps for endoscopic esophageal biopsy[J].Gashointest endosc Mag，2012，5（5）：199-202.
中图分类号：S572；S153.6+21 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）19-4601-04
近年来，随着现代烟草农业建设的推进，对分散种植的烟田进行综合整治，在全国范围内建立了一大批现代烟草农业基地单元。由于对原来自然形成的土壤进行翻压和客土填埋，导致土壤物理结构、土壤化学成分和土壤生态环境都发生了较大的变化，在一定程度上限制了土壤肥力的提高。有机质含量是反映土壤肥力水平的一个重要指标，它不仅是土壤的有机养分库，而且是保持土壤团粒结构、改善土壤水分、通气条件和微生物活性的重要组分。调查植烟土壤有机质含量及其空间变异特征，可以为整治区域土壤培育方向和合理施肥提供科学依据，因而成为现代烟草农业基地建设首要解决的问题之一。
采用地统计学方法可以比较准确地了解土壤养分的空间分布特征及变异规律，对农业生产中的土壤改良、精准施肥以及农产品的高产优质和高效生产都具有重要意义[1]。目前，地理信息系统（GIS）技术与地统计学方法在农业生产中尤其是在精准施肥等方面得到了越来越广泛的应用[2-6]。本研究采用GIS技术与地统计学相结合的方法，研究恩施州清江源现代烟草农业科技园（以下简称清江源）、恩施市城郊现代烟草农业基地单元（以下简称城郊）和利川市柏杨现代烟草农业基地单元（以下简称柏杨）土地整治区烟田土壤有机质含量及其空间变异特征，并进行有机质肥力等级评价，以期为整治区域土壤培育方向和合理施肥提供依据。
1 材料与方法
1.1 研究地区概况
1.3 数据分析
用“平均值±3倍标准差”方法去除异常值，利用SPSS 13.0软件对土壤有机质含量进行描述性统计分析；采用Cochran[8]和姜城等[9]的方法对取样数量进行估计；用地统计学软件GS+ 7.0进行半方差函数计算和模型拟合，对土壤有机质含量空间变异的影响因素进行分析，具体参考张淑娟等[10]和李强等[11]的方法；在ArcGIS 9.3平台上制作有机质含量空间分布图。
2 结果与分析
2.1 整治区植烟土壤有机质含量描述性统计分析
2.2 整治区植烟土壤合理取样数量分析
根据Cochran[8]关于区域纯随机取样数量的计算公式，计算出2个置信水平3个不同相对误差下每个研究区域所需的取样数量（表2）。可以看出，置信水平越低，所需要的取样数量就越少；在一定置信水平条件下，区域土壤有机质变异越大，达到相同精度所需要的取样数量就越多；在相同精度下可允许相对误差越大，所需要的取样数量就越少。例如在95%置信水平和5%相对误差条件下，如果针对土壤有机质含量进行取样分析，城郊土壤需要采集121个土样，清江源土壤需要采集86个土样，而柏杨土壤只要采集42个土样就足够了。由此可以看出，在本试验中，柏杨实际采样数量基本达到95%置信水平和5%相对误差条件，而清江源和城郊则分别相差15个和63个。
相对于土壤氮、磷、钾等养分来说，土壤有机质含量是相对稳定的土壤属性，其空间变异通常也相对较小，因此在实际工作中，由于常常需要对土壤氮、磷、钾等养分同时进行分析，需要加大样品采集密度，此时可以通过适当减少土壤有机质样品分析数量的方法，以降低样品分析成本。
2.3 整治区植烟土壤有机质含量半方差分析
半方差函数是描述土壤性质空间变异的一个函数，反映不同距离观测值之间的变化。模型的选择取决于变异函数理论模型的拟合参数，
一般认为，块金值（C0）表示由随机部分引起的空间异质性，基台值（C0+C）表示系统内总的变异。块金系数C0/（C0+C）表示由随机因素所引起的异质性占总的空间异质性的程度[15，16]。按照区域化变量空间相关程度的分级标准，块金系数小于25%说明变量具有强烈的空间自相关性，块金系数为25%～75%说明变量具有中等空间自相关性，大于75%说明变量的空间自相关性较弱[17]。根据陈延良等[18]和于婧[19]的分析，土壤养分空间变异主要是由于成土母质、土壤类型、气候及生物活动（包括人类耕种措施）等因素所致，而半方差函数中的参数从不同的角度揭示了土壤性状产生差异的主导因素及其变异程度。在本研究中，城郊土壤有机质具有中等空间自相关性，说明土壤有机质含量在该区域内的空间变异是由成土母质、土壤类型等结构性因素和人类活动等人为因素共同决定的。
最大相关距离（变程）反映出属性因子空间自相关范围的大小，它与观测尺度以及在取样尺度上影响土壤属性的各种生态过程、人为因素、自然条件等都有关[20]。表3结果表明，城郊土壤有机质含量的变程较大，在500 m以上，说明其变异以大块状变异为主，即有机质含量在较大的范围内存在着空间自相关性。
2.4 整治区植烟土壤有机质空间分布及等级评价
土壤有机质的空间分布图是土壤有机质空间异质性的具体表现，是土壤在不同区域的物理、化学和生物学过程相互作用的结果[21]。图2表示清江源、城郊和柏杨区域土壤有机质空间分布规律。从图2可以看出，清江源土壤有机质出现3个等级，且不同等级分布比较零散；城郊土壤只有2个等级，西部土壤有机质含量较高，而东部区域土壤有机质含量较低；柏杨土壤有机质含量也是2个级别，但低值等级所占比例较小，整体分布比较均匀。
表4表示清江源、城郊和柏杨区域土壤有机质含量等级及其所占比例。82.3%的清江源土壤、88.2%的城郊土壤和100%的柏杨土壤有机质含量均属于偏低和低等级。城郊土壤有机质偏低等级（10～20 g/kg）所占的比例分别比清江源和柏杨低33.8%和46.3%，而低等级（6～10 g/kg）分别比清江源和柏杨增加2.65倍和2.30倍。整体而言，清江源、城郊和柏杨土壤有机质含量都较低，城郊最低，其次是柏杨，清江源最高。因此，在各区域进行推荐施肥时应增施或多施有机肥。
3 结论
3个区域土壤有机质含量均较低，其中城郊最低，分别比清江源和柏杨低36.4%和28.7%。不同区域土壤有机质含量变异系数为18.8%～33.2%。
恩施城郊土壤实际采样数量不能满足在95%置信水平和5%相对误差条件下的空间变异性研究，其次是清江源，而柏杨实际采样数量比较合理。
恩施城郊土壤有机质含量的半方差理论变异函数对实际的拟合最好，且F检验达到极显著水平。
恩施城郊土壤有机质偏低等级（10～20 g/kg）所占的比例分别比清江源和柏杨低33.8%和46.3%，而低等级（6～10 g/kg）所占比例分别比清江源和柏杨增加2.65倍和2.30倍。
参考文献：
[1] 潘成忠，上官周平.土壤空间变异性研究评述[J].生态环境，2003，12（3）：371-375.
[2] 刘 杨，孙志梅，杨 军，等.京东板栗主产区土壤氮磷钾的空间变异[J].应用生态学报，2010，21（4）：901-907.
[3] 张宏伟，魏忠义，王秋兵.沈阳城市土壤全钾和碱解氮的空间变异性[J].应用生态学报，2008，19（7）：1517-1521.
[4] JIANG H L，LIU G S， WANG R， et al. Delineating site-specific quality-based management zones for a tobacco field [J]. Soil Science，2011，176（4）：206-212.
[5] ZHU Y L， LIU H B， JIANG X L. Investigation of the spatial variability of nitrogen and phosphorus in purple soils in Jiangjing City，Sichuan， China [J]. Environment Science，2004， 25（1）：138-144.
[6] 朱益玲，刘洪斌，谢德体，等.江津紫色土壤养分空间变异性研究——地统计学方法[J].西南农业大学学报，2002，24（3）：207-210.
[7] 鲍士旦.土壤农化分析[M].第三版.北京：中国农业出版社，2000.
[8] COCHRAN W G. Sampling Techniques [M]. 3rd Edition. Hoboken， NJ： John Wiley & Sons， Inc.，1977.
[9] 姜 城，杨俐苹，金继运，等.土壤养分变异与合理取样数量[J]. 植物营养与肥料学报，2001，7（3）：262-270.
[10] 张淑娟，何 勇，方 慧.基于GPS和GIS的田间土壤特性空间变异性的研究[J].农业工程学报，2003，19（2）：39-44.
[11] 李 强，周冀衡，杨荣生，等.曲靖植烟土壤养分空间变异及土壤肥力适宜性评价[J].应用生态学报，2011，22（4）：950-956.
[12] 苏荣瑞，金卫斌，艾天成，等.基于GIS的湖北省江陵县土壤养分空间变异研究[J].长江大学学报（自然科学版——农学卷），2007，4（3）：13-17.
[13] 张 敏，贺鹏飞，陈伟强.基于GIS和地统计学的土壤养分空间变异分析[J].东北农业大学学报，2010，41（3）：53-58.
[14] 秦占飞，常庆瑞.县域土壤养分空间变异分析——以蒲城县为例[J].干旱地区农业研究，2012，30（1）：30-35.
[15] 王存国，韩士杰，张军辉，等.长白山阔叶红松林表层土壤水分空间异质性的地统计学分析[J].应用生态学报，2010，21（4）：849-855.
[16] 王淑英，胡克林，路 苹，等.北京平谷区土壤有效磷的空间变异特征及其环境风险评价[J]. 中国农业科学，2008，41（1）：129-137.
[17] CAMBARDELLA C A， MOORMAN T B， NOVAK J M， et al. Field-scale variability of soil properties in central Iowa soils[J]. Soil Science Society of America Journal，1994，58：1501-1511.
[18] 陈延良，雷国平.松嫩平原南部土壤养分空间变异规律分析及其等级评价[J].扬州大学学报（农业与生命科学版），2010， 31（2）：43-47.
[19] 于 婧.基于GIS和地统计学方法的土壤养分空间变异及应用研究[D].武汉：华中农业大学，2007.
【关键词】 血常规检验； 误差； 原因
doi：10.14033/ki.cfmr.2017.14.033 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2017）14-0060-03
血常规检验是血液检验的基本方法，是对血液细胞：红细胞、白细胞、血小板进行检验，通过患者的血液变化情况来判断患者的身体状况，其检测指标一般包括三种血液细胞和血红蛋白[1]。血常规检验的准确性对于指导医生准确判断患者的病情，并根据实际情况制定合理的治疗方案极为必要。本研究以笔者所在医院患者为研究对象，探究血常规检验的常见误差原因，以期为血常规检验准确性提供科学指导。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2015年4月-2016年4在笔者所在医院接受治疗的71例患者为研究对象，其中糖尿病患者15例，高血压患者11例，妇科疾病患者10例，心脑血管疾病患者23例，其他疾病患者12例。男38例，女33例；患者年龄18～59岁，平均（36.58±4.12）岁。
1.2 方法
所有患者均于入院时对患者分别采用静脉采血和末梢采血两种方式采集3 ml血液进行检验，使用深圳迈瑞BS420全自动生化分析仪对所有血液样本进行检验，相应的检验试剂盒由深圳迈瑞生物科技有限公司提供。采集完血液样本后将其送交检验。（1）分别在取样即刻、2 h后、4 h后进行检测；（2）分别检测血红蛋白吸管、微量加样器、稀释器不同采样方式下采集的血液样本；（3）分别检测在常温下保存的血液样本和4 ℃冰箱中保存的血液样本。
1.3 观察指标
观察比较不同时间、不同取样方式、不同保存方式下血液样本的检验结果。检验指标包括：红细胞（RBC）、白细胞（WBC）、血小板（PLT）、血红蛋白（HGB）。
1.4 统计学处理
所得数据使用SPSS 21.0统计学软件处理， 计量资料以（x±s）表示，采用t/F检验，计数资料以率（%）表示，采用字2检验，P
2 结果
2.1 不同时间点血常规检测结果比较
不同时间点对患者的血液进行检验，患者的各项血液检测结果差异有统计学意义（P
2.2 不同采样方式血常规检测结果比较
研究发现微量加样器和稀释器两种取样方式采集的血压样本检验结果比较差异无统计学意义（P>0.05），但是血t蛋白吸管取样方式采集的血液样本检测结果与微量加样器、稀释器采集血液样本的检测结果比较差异有统计学意义（P
2.3 不同采血位置血液样本检测结果比较差异
静脉采血的血液样本各指标检验结果与末梢采血血液检验各指标检验结果比较差异有统计学意义（P
2.4 不同保存方式下血液样本检验结果比较差异
8 ℃～28 ℃环境下保存的血液样本各项指标检测结果为：RBC：（4.31±0.75）×1012/L；WBC：（8.06±0.47）×109/L；PLT：（301.21±25.26）×109/L；HGB：（117.56±4.87） g/L。冰箱内保存的血液样本各项指标检测结果为：RBC：（4.31±0.75）×1012/L；
WBC：（5.21±0.58）×109/L；PLT：（211.34±24.12）×109/L、HGB：（117.56±4.87）g/L。两种保存方式下的血液检测结果在WBC和PLT两项指标方面比较差异均有统计学意义（P
3 讨论
血常规检验的准确性对于确定患者的疾病类型、病情程度至关重要[2]。但是在实际操作过程中血常规检测往往会受到各种因素的影响导致出现检验误差。近年来医学工作者逐渐开始认识到血常规检验准确性的重要性，开始关注对血常规检验结果影响因素进行分析，相关研究不断增多[3-5]。有研究指出血液样本的放置时间、采集方式、采集位置、保存方式都会对检验结果造成影响[6]。
本研究对笔者所在医院71例患者的血液样本进行研究，研究发现随着血液样本放置时间的延长，其检测结果也相应的发生变化，RBC、PLT、WBC血液细胞水平明细升高，而HGB水平则明显下降；在冰箱内保存的血液样本与常温下保存的血液样本进行比较法发现PLT、WBC水平比较，差异有统计学意义（P
血液样本很容易受外界环境影响而与空气中的微生物发生反应，常温环境下空气中的微生物增多，因此如果将采集后的血液样本置于常温环境下血液成分很容易发生改变，RBC、PLT、WBC等血液细胞水平及HGB水平都会发生相应的改变；随着血液样本放置时间的延长其发生的变化越大[7]。因此采集的血液样本要尽快进行检验，如不能尽快检验应尽量将其存放于冰箱内，减少其与空气中微生物发生反应的几率。
此外血液采集方式、采集位置也会对检测结果造成影响，采用血红蛋白吸管采集血液会对检测结果造成误差，其主要原因在于血浆内的很多有效成分附着于吸管壁上使各项检测指标下降。末梢采血和静脉采血是临床上主要采用的两种采血部位，其中指尖末梢的血管一般较细，并不能准确反应患者的实际血液状况，因此会导致检测误差[8]。
本研究通过对71例患者进行实际临床研究发现血液采集方式、采集位置、保存方式、放置时间都会对检测结果造成影响，这一研究结果与以上分析一致。
综上所述，末梢采血、血红蛋白吸管采集血液样本、样本放置时间过长、常温下保存都会导致检验误差，在临床上应尽量采取相应措施避免误差的发生。
参考文献
[1]郭雯.血常规检验临床观察分析[J].医学理论与实践，2014，27（16）：2207，2240.
[2]文家远.临床血常规检测的影响因素及控制对策初探[J].中国现代医生，2012，50（13）：150-151.
[3]李华，罗军，傅钦珊，等.10946名企业员工血常规结果分析[J].中外医学研究，2014，12（13）：66-67.
[4]杨永怀.血常规检验中误差原因分析及解决对策[J].齐齐哈尔医学院学报，2016，37（26）：3296-3297.
[5]汪学武.血常规检验过程中的误差原因调查分析[J].内蒙古中医药，2013，32（24）：88-89.
[6]高梅，张凌峰，付永航.不同采血方法进行血常规检验在临床中的价值比较[J].中国医学创新，2014，11（24）：46-48.
[7]姜丽娜.血常规检验的常见误差原因研究[J].中国医药指南，2014，12（12）：204-205.
【关键词】样本 抽样 U分布 T分布 正态分布 置信度 置信区间 样本均值
1 在测试中引入统计学的概念
自从2007年毕业以来，本人一直从事新产品测试工作。刚开始测试样本数量一般是1台，且用“通过”或“不通过”作为测试的结论。后来发现1台样本随机性太强，很难代表新研发产品的设计品质，所以样本数量增加到多台。这样一来测试中经常发现下列几种状况：一、多个测试结果结论不统一，有的结果在规格内，有的则在规格外；二、所测多个样机的电压值均在规格内，但普遍靠近规格上限或下限；三、对同一台样机多次测试，所得结果有的在规格内，有的在规格外；针对这些测试结果，简单用“通过”或“不通过”来评估该设计显然是不充分的，有必要引入其他的描述对整体的设计品质做评估，来准确判定设计的质量。
经过各种借鉴和学习，最终我们引入统计学方法对测试所得的多组数据做处理，并利用“样本均值”“置信度”“置信区间”等概念对样本作全面的评估。
2 正态分布
2.1 CPK 的广泛应用
常用的统计学方法有多种，U分布、T分布、Z分布等。因为U分布是多种分布的理论基础，也是应用最广的分布，所以开始我们采用cpk作为设计质量判断的指数。Cpk（Complex process capability index） 全称是制程能力指数，一般用来反映生产过程性能的允许最大变化范围与过程的正常偏差的比值。也有公司用它来表征产品设计的质量。在此不做论证其适用性，仅对实用过程做说明。
Cpk=min[ ]
其中USL，LSL分别为规格上限和下限； 为取样数据平均值； 为取样数据标准差；对cpk数值对应的设计质量分析见下表1。
2.2 CPK的不足
以上计算过程简单，结论明确，可操作性强。但实际应用于项目中后发现根据取样数据所得cpk值偏低，并不能准确反映设计情况。追究原因可能源于以下几点：
（1）所得样本数据存在异常点，即由于非设计因素影响使得测试结果出现偏差；而在统计分析中没有排除这些点；（2）样本数据分布形态不符合正态分布；（3）最重要的一点，样本数据量过小，不符合用cpk分析设计质量的要求。因为相关资料中介绍cpk时有建议取样数据最少要在120个以上，而在实际的研发试样中，样机总数量很少超过15台，远达不到要求。（4）没有考虑随机因素的影响。
3 T分布
3.1 T分布介绍
基于以上原因，我们决定采用T分布来进行数据分析，并加入了“预测符合度”的考量对分析所得区间做调整。现将T分布介绍如下。T分布以U分布为理论基础，是一簇曲线其形态变化与样品数量n有关。样品数量越小，t分布曲线越低平，样品数量越大，t分布曲线越接近标准正态分布曲线，当样品数量大于120个时，T分布曲线和标准正态分布曲线无限接近（图1所示）。简单说来，每一种样品数量都对应着T分布的的一条曲线。这样就使得样品分布与T曲线的符合度高，就解决了样品数量过小的问题（事实上当样品数量小于30个时，使用T分布是合适的）。
另外，T分布中考虑了置信度，即考虑了在抽样对总体参数做出估计时，由于样本的随机性，其结论总是不确定的。因此置信度是一种概率的陈述方法，也就是数理统计中的区间估计法，即估计值与总体参数在一定允许的误差范围以内，其相应的概率有多大。
再者，考虑到设计本身所固有的可变性（与制造过程的可变性无关），引入了预测符合度的概念，用以对T分布统计计算所得区间范围做调整。
基于以上分析，当置信度为95%，而预测符合度为90%时，最大的预期数值为5.44v，这个数据是在产品的规格范围内的（4.5V-5.5V），然而，这一分布并不像预期的那样以5V为分布中心，二是已4.77V为分布中心，这一偏差导致了预测的最小值4.42V超出了产品的规格范围。导致这一情况的因素很多，可能是样本不能证明产品的性能，或者也可能是需要更多的样本量来减小样本均值的置信区间。
4 结语
以上算法结合了T分布的算法和累计的经验，在多个项目中运用并验证过，能较准确的评价样机的性能特征，能作为设计后续事宜的可靠参考，并对后续的设计改进以指导，所以在公司内得到了广泛的应用。后续的改进主要集中在如何筛除异常取样值，这一过程还在思考中。
参考文献：
[1] 贾俊平.统计学基础[M].中国人名大学出版社，2010（4）1.
【关键词】 龋齿；氟化物，外用；链球菌，口腔；投药，局部；儿童
【中图分类号】 R 179 R 780.1 【文献标识码】 A 【文章编号】 1000-9817(2009)03-0245-02
针对高患龋风险儿童，应采取综合措施防止新生龋。尤其对于5～6岁替牙期儿童，由于新生恒牙正在萌出，而乳牙龋已经存在，更要采取预防措施，以抑制致龋菌在口腔内的生长［1-2］。氟化氨银(Ag(NH3)2F，SDF)应用于儿童防龋效果得到广泛肯定，不断有实验报道其有促进再矿化及防龋效果；但对于氟化氨银的防龋机制理论还需要进一步探讨。唾液中致龋菌水平与龋失补牙数呈正相关，而通过对致龋菌的检测，可预测患龋风险、评估防龋效果。本实验在探讨氟化氨银预防治疗乳牙龋效果的同时，研究其对口腔中变形链球菌的影响。
1 对象与方法
1.1 对象 2007年3月17日-9月17日，由郑州大学口腔医院组织的针对郑州市区儿童口腔卫生检查中，随机抽取年龄6岁、龋失补指数dmft>4［3］的儿童40名(男童22名，女童18名)。要求患者无严重系统性疾病，无牙髓炎及根尖周炎，第一恒磨牙已完全萌出且未做过窝沟封闭。经郑州大学伦理委员会同意和家长在知情书签字后作为研究对象。
1.2 方法
1.2.1 实验分组 将40名儿童随机分成4组：10人为实验组A，对全部乳牙龋表面涂布38%SDF干预；10人为实验组B，对第一恒磨牙窝沟涂布窝沟封闭剂干预；10人为实验组C，使用窝沟封闭剂和SDF联合干预对全部乳牙龋表面抹布38%SDF，同时对第一恒磨牙涂布窝沟封闭剂；10人作为对照组不进行任何干预。
1.2.2 取样时间与方法 采用1997年WHO制定的口腔健康调查基本方法，使用一次性检查器械，检查由同一名口腔医生担任。于每天9：00-10：00取样，用无菌口杯取口腔内非刺激性全唾液标本，用移液器取0.1 mL唾液置于装有0.9 mL林格氏液的无菌1.5 mL离心管中，带回实验室进行培养。
将无菌离心管中的唾液样本于0.5 h内经充分震荡60 s后，用林格氏液连续倍比稀释，获得从10-1～10-5的唾液细菌稀释液。变形链球菌接种液稀释浓度为10-4，取0.05 mL接种于直径为7.5 cm的含轻唾培养基的平皿。接种液滴于平板中央，用灭菌L型玻璃棒均匀涂布后装入厌氧发生罐，置于培养箱培养3 d。
通过菌落形态学特点和直接菌落涂片后革兰染色，显微镜下观察，初步判断在上述初步鉴定的基础上通过生化反应，鉴定变形链球菌。对培养基平皿上已经确定的菌落进行计数，计算每毫升菌落数(CFU/mL)，将细菌计数采用对数转换为Log10CFU。第1次(基线)取样后，对各组儿童分别采用相应的干预治疗措施(见实验分组)，干预后1周，第2次取样；干预后4周，第3次取样；干预后8周，第4次取样。
1.3 统计学分析 细菌计数资料实验数据用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析，采用重复测量的方差分析。
2 结果
实验组A经涂布38%SDF 1周、4周、8周后，口腔内变形链球菌数量与基线之间差异有统计学意义(P＜0.05)；实验组B经涂布窝沟封闭剂1周、4周、8周后，口腔内变形链球菌数量与基线差异无统计学意义(P＞0.05)；实验组C经涂布38%SDF和窝沟封闭剂1周、4周、8周后，口腔内变形链球菌数量与基线差异有统计学意义(P＜0.01)。
4种不同方法处理后变形链球菌计数差异有统计学意义(P＜0.05)。两两比较显示，氟化氨银组与对照组间差异有统计学意义(P＜0.05)，联合干预组与对照间差异有统计学意义(P＜0.05)，窝沟封闭组与对照组间差异无统计学意义(P＞0.05)，窝沟封闭组、氟化氨银组和联合干预组之间差异均有统计学意义(P值均＜0.05)，氟化氨银组与联合干预组间差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。
3 讨论
氟化氨银是由日本学者山贺礼一等最先研究并介绍的抑龋药物，局部应用SDF的临床实验结果显示其具有较强的防龋抑龋作用，可有效预防儿童龋病和抑制根面龋的发展，同时具有促进再矿化的作用［4-6］。国内近年也有部分研究证实氟化氨银的抑龋效果，并对其作用机制进行了有益的探讨［7-8］。综合国内外的研究，主要在于其防龋效果的观察，及对其作用于牙本质表面再矿化特性的研究［9］。本研究探索了局部应用38%Ag(NH3))2)F对替牙期高龋儿童龋病的控制，同时通过与窝沟封闭对照，观察口腔内变形链球菌的改变情况。
本研究结果显示，实验组A单独使用38%Ag(NH3))2)F涂布乳牙表面1周后、4周后、8周后，儿童口腔内变形链球菌与治疗前差异有统计学意义，即对于高患龋儿童涂布38%Ag(NH3))2)F后，可以抑制口腔内变形链球菌的生长。在涂布38%Ag(NH3))2)F 1周后与4周后、1周后与8周后、4周后与8周后，口腔内变形链球菌之间差异均无统计学意义，说明38%Ag(NH3))2)F可以在8周内持续发挥其抑菌作用，抑菌效果没有明显下降。这些与国外对氟化氨银抑菌性的体外研究结果［10-11］相符，证明38%Ag(NH3))2)F对于变形链球菌短期具有抑制作用，但是否涂布38%Ag(NH3))2)F后具有6个月以上的长期抑菌效果、对于其他口腔致病菌是否也有抑制作用，以及是否会产生耐氟菌株等，还需要做进一步研究。
本研究结果还显示，实验组B单独对已萌出的第一恒磨牙窝沟封闭，治疗前口腔内变形链球菌和治疗1周、4周、8周后差异均无统计学意义，说明单独使用窝沟封闭剂不能抑制变形链球菌生长，与Carlsson等［12-13］的研究结果相符。提示针对替牙期儿童仅采用窝沟封闭并不能减少口腔内其他牙齿的患龋风险，必须采用针对整个口腔的预防保健措施。
实验组C在对乳牙表面涂布38%Ag(NH3))2)F的同时对已萌出的第一恒磨牙进行窝沟封闭，1周、4周、8周后儿童口腔内变形链球菌与治疗前差异有统计学意义，即对于高龋儿童采取窝沟封闭剂与38%Ag(NH3))2)F联合应用，可以抑制口腔内变形链球菌的生长。提示38%Ag(NH3))2)F和窝沟封闭剂同时使用可以降低儿童的患龋风险。在替牙期，针对混合牙剂分别对乳牙涂布氟化氨银、对新生恒磨牙进行窝沟封闭是行之有效的。
龋病与细菌、宿主、食物等诸多因素有关，因此应当采取综合的预防措施预防龋病。在替牙期，一方面针对细菌通过氟化氨银抑制口腔唾液内变形链球菌的生长；另一方面针对宿主和食物因素积极采取口腔健康教育和窝沟封闭相结合等综合措施，能有效地降低新生恒牙的患龋率。氟化氨银的防龋效果，除抑制变形链球菌以外，对其他致龋菌的抑制作用也有文献提及，另外其促进矿化与再矿化的作用也是其防龋的主要机制。
4 参考文献
［1］ HOSZEK A, STRUZYCKA I. Chlorhexidine-containing glass ionomer cement. A clinical investigation on the fissure caries inhibiting effect in first permanent molars. Swed Dent J, 2005,29(3):89-96.
［2］ STEINER M, HELFENSTEIN U. Dental predictors of high caries in crementin children. Dent Res, 1992,71(12):1 923-1 933.
［3］ 石四箴，主编.儿童口腔医学.2版.北京：人民卫生出版社，2003：71.
［4］ LLODRA JC, RODRIGUEZ A, FERRER B, et al. Efficacy of silver diamine fluoride for caries reduction in primary teeth and first permanent molars of school children: 36-month clinical trial. J Dent Res, 2005,84(8):721-724.
［5］ CHU CH, LO ECM, LIN HC, et al. Effectiveness of silver diamine fluoride and sodium fluoride varnish in arresting dentin caries in Chinese pre-school children. J Dent Res, 2002,81(11):767-770.
［6］ LO ECM, SCHWARZ E, WONG MCM, et al. Arresting dentine caries in Chinese preschool children. Inter J Paed Dent, 1998,8(4):253-260.
［7］ 李玉晶，仇新全，李建英，等.氟化双氨银溶液防龋抑菌作用的研究.中华口腔科杂志，1984，19(2)：97-100.
［8］ 李玉晶，李建英，杨玉琴，等.氟化双氨银溶液抑制牙本质龋机制的探讨.北京口腔医学，1997，5(4)：151-152.
［9］ CHU CH, LO ECM. Microhardness of dentine in primary teeth after topical fluoride applications. J Dent, 2008,36(6):387-391.
［10］KNIGHT GM, McINTYRE JM. An in vitro model to measure the effect of a silver fluoride and potassium iodide treatment on the permeability of demineralized dentine to streptococcus mutans. Aust Dent J, 2005,50(4):242-245.
［11］KNIGHT GM, McINTYRE JM, CRAIG GG, et al. Differences between normal and demineralized dentine pretreated with silver fluoride and potassium iodide after an in vitro challenge by streptococcus mutans. Aust Dent J, 2007,52(1):16-21.
［12］CARLSSON A, JONSSON Y. Pit and fissure sealing and mutans streptococci levels in saliva. Am J Dent, 1992,5(5):280-282.
方法：选取在我院门诊及住院患者46例为研究对象，使用UF-100全自动尿沉渣分析仪对上述患者送检胸腹水标本中的白细胞和红细胞数进行检测，并与同期采取手工法检测结果相对比。
结果：UF-100UF-100全自动尿沉渣分析仪和手工法两种方法对46例胸腹水标本中红细胞和白细胞数的检测结果对比上无显著性差异和统计学意义（P>0.05）。
结论：UF-100全自动尿沉渣分析仪在胸腹水细胞计数检测有明显的临床推广及应用价值。
关键词：胸腹水UF-100全自动尿沉渣分析仪细胞计数
【中图分类号】R4【文献标识码】A【文章编号】1671-8801（2013）11-0064-02
胸腹水细胞计数的常规检查一般都采取手工法进行检测，由于手工法检测步骤繁多复杂，人为误差较大，不同检测者获得检测结果不一，重复性差[2，3]，因此使得实验室之间存在较弱的可比性，这对实验室质量评价的建立和完善会产生负面影响，同时检查者结果也会对临床医师做出的判断造成影响，不利于患者的治疗。因此，若是能保证整个检测过程全自动化，很大程度上能解决或避免以上问题。本文重点探讨和分析了使用UF-100全自动尿沉渣分析仪对46例胸腹水检测样本中的红细胞和白细胞计数的检测结果，并与手工检测法进行了对比，现将对比结果整理报道如下。
1材料与方法
1.1检测标本取样。选取46例胸腹水标本均来自于在我院门诊及住院患者的送检标本，其中男28例，女18例；年龄17-78岁；46例患者，消化科、呼吸科、心脏科以及其他分部为12例、18例、6例以及10例。标本取样后立即送往相关实验室检验。
1.2仪器。UF-100全自动尿沉渣分析仪，检测中使用的试剂均为Sysmex医用电子有限公司提供。
1.3检测方法。对上述选取的46例取样送检标本进行标记，并分别采取UF-100全自动尿沉渣分析仪和光学显微镜对样本中的细胞计数进行分析和检测；若检测过程中发现有核细胞在10×106/L以上，则应用离心沉淀法将检验标本中所有的核细胞收集并给予瑞氏染色后，再行细胞分类。上述检验过程中，UF-100的检测步骤均依照UF-100全自动尿沉渣分析仪的操作说明书进行，而采取光学显
微镜检测手工计数法依据《全国临床检验操作规程》中规定流程进行，使用UF-100全自动尿沉渣分析仪的操作人员和采取光学显微镜手工法计数的人员都为实验专业检测人员，采取双盲式判读结果。
1.4统计学方法。对上述两种数据进行汇总处理，使用统计学软件SPSS19.0对上述数据进行分析和处理，两组间细胞计数结果采取t检验，以P
2结果
通过采取UF-100全自动尿沉渣分析仪对上述46例胸腹水送检标本进行检验发现，样本中红细胞、白细胞以及上皮细胞的计数依次为（154.8±125.5）×106/L、（378.2±103.1）×106/L和（78.2±14.1）×106/L；采取光学显微镜人工计数法对上述46例胸腹水送检标本进行检验发现，样本中红细胞、白细胞以及上皮细胞的计数依次为（149.1±105.3）×106/L、（385.2±104.3）×106/L和（66.1±14.4）×106/L，两组检测在上述三项检测指标上进行对比，发现二者检测结果均无显著性差异和统计学意义（P>0.05）。详细对比见下表1。
3讨论
UF100的工作原理是采用流式细胞和电阻抗的原理，利用细胞染色后，通过细胞的荧光强度、前向散射光强度及电阻抗的大小来区别尿中有形成分类型[5，6]。仪器根据白细胞的特点将荧光强度高和散射光高的细胞归为白细胞。
UF100与计数板法计数胸腔积液中白细胞有良好的相关性，说明了仪器和手工的规范检验具有较高的可比性。在白细胞计数小于5000个/μl时，线形良好，与金大鸣[7]报道的0～4 600个/μl时r=0.999相近。UF100计数白细胞的CV比计数板法计数的CV小。UF100在WBC>40个/μl时，CV
UF100具有设计精密，加样恒定准确，检测快捷，处理标本的方式清洁卫生等优点。白细胞在UF100散点图上分布于高荧光强度区域，活的白细胞有一定的体积和密度，具有高前向散射光强度和低荧光强度，死亡或被破坏的白细胞体积和密度都有所改变，分布在散点图中的低散射光强度和高荧光强度区域，因此可以根据胸腔积液白细胞散点图初步判断是急性感染还是慢性感染。
然而，UF100也有其不足之处，我们分析了UF100与计数板法结果相差较大的标本，发现3份胸腔积液标本中因含有大量间皮细胞残骸而引起白细胞假性增多。
UF-100全自动尿沉渣分析仪采取的原理主要有两种，一种为流式细胞原理，另外一种为电阻抗原理，它通过借助上述两种原理对取样检测样本中含有的各种有形成分的Fsc（前向散射光强度）、Fscw（前向散射光脉冲宽度）、F1（荧光强度）、F1w（荧光脉冲强度）以及Imp（电阻抗）大小进行测定，并对标本中各种有形组成成分进行识别和计数，如本文研究中的红细胞、白细胞以及上皮细胞等[1-4]。在自动检测的过程中，标本通过自动混合均匀，来大大降低因采取离心沉淀法计算体积而出现的误差，且也在很大程度降低了细胞成分附壁，沉淀过程中出现变形等因素的影响，因此测定的结果较为客观、可靠性高。这就是说UF-100全自动尿沉渣分析仪对送检标本中红细胞、白细胞以及上皮细胞的检测结果在相当大范围内计数较为准确，可作出定量报告[2-4]。本文研究表明，在使用UF-100全自动尿沉渣分析仪和光学显微镜人工检验法对上述选取的46例胸腹水检验标本进行分析发现，两种检验方法在红细胞、白细胞、上皮细胞三种检验结果对比上均无显著性差异和统计学意义（P>0.05），而两者在白细胞检验数据有一定的差别，可很有可能与送检胸腹水样本中的特殊性有关；与新鲜的尿液相对比而言，取样胸腹水的标本在体内停留时间长，这段时间内取样物中的白细胞可能会出现溶解、聚集以及变形等现象。
综上所述，UF-100全自动尿沉渣分析仪在胸腹水细胞计数检测与人工计数法在各项检测数据上无太大差异性，定量分析的良好检查方法，可作为常规的胸腔积液WBC分析工具，但是有的标本还需要镜检计数来纠正补充，以使结果更加准确。UF-100全自动尿沉渣分析仪较人工计数法具有效率高、速度快以及重复性好等优点，因此UF-100全自动尿沉渣分析仪在胸腹水细胞检测中有明显的临床推广及应用价值。
参考文献
[1]吕中，全李爽，李昊淼.应用UF一100全自动尿沉渣分析仪检测浆膜腔积液的作用和意义[J].实用医学杂志，2010（2）：308-309
[2]何银华，颜宇飞，蔡峥，金立钢.Sysmex XE-2100全自动血液分析仪计数胸腹水有核细胞的评价[J].检验医学，2011（4）：117-118
[3]牛忆军.姚祖德.赫.全自动尿沉渣分析仪和显微镜检查对比分析[J].检验医学，2011（4）：1564-1565
[4]于海涛，李伟，杨丽华，程宁，姜丽丽.全自动尿沉渣分析仪检测结果的比较分析[J].国际检验医学杂志，2011（10）：228-229
[5]李雅嫦，邱方城，严礼华，等.UF100全自动尿沉渣分析仪临床应用及影响因素分析[J].微循环学杂志，2005，15（4）：145-146
【关键词】一氧化氮；龈沟液；牙周炎
一氧化氮（nitric oxide，NO）是一种毒性强，不稳定，易扩散，化学性质活泼，半衰期极短的自由基[1-2]，是一种特殊的多功能的信号分子和效应分子在机体内可充当信使、介质和细胞功能调节因子，对多种器官、系统的功能具有重要的调节作用，参与众多的生理病理过程。随着NO在唾液中的检出，其在口腔疾病中作用的研究正逐渐成为口腔研究领域的热点之一。内源性NO以L-精氨酸为底物，由一氧化氮合酶（nitric oxide syntheses，NOS）催化合成，可在体内广泛存在，研究表明，NO可以参与牙周微循环的调节，并且在牙周炎患者与牙周健康者的唾液、龈沟液及牙龈组织中NO的含量有明显区别[3]。
本实验通过检测不同严重程度牙周炎患者龈沟液中NO的含量，观察NO的表达与牙周炎发生发展之间的关系。
1资料与方法
1.1仪器与材料一氧化氮试剂盒（南京建成生物工程研究所）；721型可见光光度计（上海精密科学仪器有限公司）；高速冷冻离心机（湖南仪器仪表厂）；可调式移液器（型号：YYQ-1000P，北京明力普瑞科技有限公司）
1.2研究对象及分组从我院口腔科门诊就诊患者中随机选择慢性牙周炎患者30例作为研究对象，其中男33例，女27例。纳入标准：①1年内未进行过任何牙周治疗。②临床检查和X线片诊断为全口多数牙牙周袋形成，牙槽骨吸收。③每位患者全口余留牙≥20个。④6个月内未服用过抗生素或免疫抑制剂。⑤全身健康，无免疫缺陷病、内分泌等系统性疾病。⑥女性患者不在妊娠、哺乳期。对研究对象进行牙周探诊，根据附着丧失（clinical attachment loss，CAL）程度分别分为轻、中、重度组。轻度组：至少15个位点附着丧失≤4mm；中度组：至少15个位点附着丧失在3-5mm之间；重度组：至少15个位点附着丧失≥5mm[4]。另选牙周健康的本院职工10例作为正常对照组，其中男13例，女15例。所有受试者均知情同意，自愿参加本研究。
1.3实验方法根据牙周探诊记录，选择实验组牙周炎患者口内两个以上不同象限2-4颗病变最严重牙位和对照组牙周健康者4颗第一磨牙作为取样牙，均分别在牙齿颊、舌侧的近、远中点取样。去除取样牙龈上菌斑及牙石，受试者清水漱口后，隔湿取样牙，轻轻吹干牙面，1min后，将已称重的2mm×8mm Whatman滤纸条轻轻插入龈沟或牙周袋内至遇有轻微阻力时止，留置30s后取出，迅速放入Eppendorf管中。将每颗牙的4条滤纸条作为一份样本置入同一Eppendorf管中。弃去带血或明显被唾液污染的样本。根据取样前、后滤纸条重量差换算出GCF体积，定量后将样本密封、-20℃冻存、待检。取样后记录CAL、牙周袋探诊深度（pocketprobing depth，PPD）和出血指数（bleeding index，BI）。
1.4NO测定将冻存样本常温下解冻，每管加入PBS液（0.01mol/L，pH7.4）300μl，室温振荡1h，4℃，10000r/min离心10min，弃去滤纸条，上清液4℃保存。取上清液100μl按NO试剂盒说明通过硝酸还原酶法检测GCF样本中NO水平，每样本均设复管，空白对照为100μl双蒸水。各样本分别于721型分光光度计550nm波长、0.5cm光径比色测定光密度，根据试剂盒提供公式计算GCF样本中NO浓度，单位为μmol/L。
1.5统计学处理各指标以位点牙为单位，实验数据以均数±标准差（χ±s）表示，采用SPSS11.0软件包对数据进行Student t-test检验。
2结果
2.1研究对象及取样牙位一般情况本组研究对象共40人，男28人、女12人。其中轻、中、重度组10人，平均年龄分别为43.9±2.6、42.5±2.2、43.6±1.8岁；对照组10人，平均年龄43.1±2.6岁，实验与对照组年龄的差异无统计学意义（P>0.05）。四组取样牙BI、PPD、CAL的差异均具有统计学意义（P
3讨论
NO是一种特殊的多功能的信号分子和效应分子在机体内可充当信使、介质和细胞功能调节因子，对多种器官、系统的功能具有重要的调节作用，参与众多的生理病理过程。
研究显示，NO信号通路除可以在心血管系统、神经系统等发挥效用外，还可与机体的免疫功能特别是机体的非特异性宿主防御反应有关。NO介导了LPS、TNF、IL-1等细胞因子的病理作用，调节白细胞与EC粘附，抑制T细胞增殖，提高NK细胞活性等，这些均显示了NO与机体免疫功能密切相关[5]。而LPS、TNF、IL-1均参与了牙周病的发生发展过程。国内外已有学者[3-7]在牙周病患者的唾液及龈沟液中检测出了NO，说明NO参与了牙周病的进程。本实验在不同程度的牙周炎患者的龈沟液中均检测出了NO且其含量要高于相对正常对照组，也再一次验证了这一结论。
龈沟液从牙龈结缔组织通过沟内上皮和结合上皮渗入到龈沟中的液体，其主要成分与血清相似。包括补体-抗体系统的成分、各种电解质、蛋白质、葡萄糖、酶等，其他成分来自则可邻近牙周组织还有细菌及其他微生物[4]。由于其来自牙周组织，可与牙周病的严重程度和活动期有一定关系。
龈沟液中成分的变化可较准确地反映牙周组织的状态，对牙周炎活动期的诊断、预测疾病的发展等均具有重要意义。目前，各类研究中多采集唾液中的NO来研究其与牙周病的关系，而分析龈沟液中NO含量变化的文献仍较少见。通过本研究通过采集不同程度牙周炎患者的龈沟液，采用硝酸还原酶法检测NO含量发现，在正常对照组及各实验组中均存在有NO，但实验组龈沟液中NO的含量要远远高于正常对照组，且随着牙周炎程度的加重，NO的含量也在增加。本结果与国内学者葛颂、龚斌[6-7]的研究结果一致，说明NO参与了牙周炎的发生与发展，也为进一步研究NO在牙周炎中的作用机制奠定了实验基础。
参考文献
[1]Anggard E.Nitric Oxide：mediator，murderer and medicine.Lancet，1994，343（8907）：1199-1206.
[2]Lowenstein CJ，Snyder SH.Nitric oxide，a novel biologic messenger [J].Cell，1992，70：705-707.
[3]Vanessa G.S.Reher，Elton G.Zenóbio，Fernando O.Costa，et al.Nitric oxide levels in saliva increase with severity of chronic periodontitis[J].Journal of Oral Science，2007，49，（4）：271-276.
[4]曹采方.牙周病学[M].第2版.北京：人民卫生出版社，2000.11.120.
[5]Pacher P，Beckman JS，Liaudet L.Nitric oxide and peroxynitrite in health and disease [J].Physiol Rev，2007，87（1）：315-424.
