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关键词：科技企业孵化器；评价指标；综合评价
中图分类号：F276 文献标识码：A 文章编号：1003－7217(2009)04－0104－04
一、引言
科技企业孵化器(以下简称孵化器)是培育和扶植高新技术中小企业的服务机构。孵化器的发展需要拥有一个健全的硬软件环境，亟需建立一个最优的资源结构，建立一个高效的运营环境。建立一个科学、规范和制度化的评价指标体系，引导、规范科技企业孵化器的健康发展是十分必要的。国内在绩效评价方面的研究不少，如张礼建等构造了科技企业孵化器孵化绩效评价指标体系；晏敬东等人针对科技企业孵化器管理绩效建立了评价指标体系；刘宁晖、王小敏也基于灰色系统理论，对科技企业孵化器管理绩效进行了评价；徐菱涓、刘宁晖针对我国科技企业孵化器绩效管理与评价之特殊性进行了研究。也包括针对科技企业孵化器孵化力影响因素的研究，主要是定性的研究，如罗公利，边伟民的我国科技企业孵化器孵化力影响因素研究。宋艳的我国科技企业孵化器运行的影响因素及对策。
但以上的研究没有考虑到孵化器自身的发展能力方面的指标，全面科学的研究应在科技企业孵化器运营绩效方面的指标基础上，增加有关自身发展的因素。通过层次分析法分析调查数据，阐述各个指标的量化方法，建立一套有效的评价指标体系。通过该指标体系的建立，希望使科技企业孵化器的功能在科学的发展观下得到完善，从而能够对科技企业孵化器的发展起到推动作用，为决策部门提供可靠的信息以制定促进孵化器健康发展的政策。
二、科技企业孵化器评价指标体系建立原则与内容
在借鉴大量评价指标体系设计原则的基础上，结合孵化器自身的特点，得出科技企业孵化器评价指标体系的建立必须遵循导向性、科学性、可操作性、分类性、鼓励发展及结果评价和过程评价相结合、重点突出等7个原则。
指标是整个评价体系的核心，对指标的筛选和把握是建立指标体系的基础。通过阅读大量文献，借鉴前人指标体系的研究成果，在强调全面有效的基础上，第一阶段归纳出具有三个层次的指标体系，其中包括2个一级指标、5个二级指标、36个三级指标，指标内容如表1所示。
三、科技企业孵化器评价指标的筛选
通过归纳出具有三个层次的指标体系后，本文选择湖南省作为调查范围，针对全省的科技企业孵化器单位进行调查，主要是为指标的筛选提供实证数据。为了确定有效的指标，并由此指标内容形成第一阶段调查问卷。
通过问卷设计进行调查，将各个指标对于孵化器企业的重要程度分为“很重要、比较重要、重要、不太重要、不重要”五个层次，用于测量调查对象对于其重要性程度的评价，即获取最终调查数据。
(一)数据来源与样本选取
目前，问卷调查对象是湖南省从事孵化器运营单位、政府管理人员和孵化器研究学者、专家。通过现场调研、电子邮件、传真、信件等方式共发放问卷19份，收回有效问卷11份，问卷回收率为57.9％。收回问卷的孵化器单位，均属于目前湖南省内影响较大、发展较具规模的孵化器单位。
(二)运用信息熵确定指标
在本研究阶段中，主要采用的数据处理方法为信息熵。调查问卷中获取的对于孵化器指标的评价，即可以看成是一类信息活动，其信息源为问卷调查结果的概率分布，通过信息论理论的量化处理，得到较为客观的评价，从而消除对评估对象认识上的不确定性。
表2是本次评价指标体系中任选的两个指标，共有10位专家对其进行了评价，打分如表2所示：
可以得到：
HC=0.8×log0.8+0.1×log0.1+0，1×log0.1=0.921928
HD=0.2×log0.2+0.2×log0.2+0.3×log0.3+0.1×log0.1+0.2×log0.2=2.246439
对于指标c，专家的评价分布大都集中在“重要”这一等级，消除了大部分的不确定性，故而其熵值也很小。而对于指标D，专家评价分布很平均，对于这一指标的区分度较差，基本没有消除其不确定性，所以其熵值很大。对于D这样的指标，不确定性太大，不利于评价的公平性、客观性，故而不会选入我们的指标体系，而指标C集中性很好，可以入选该体系。
运用上面的信息论理论，对第一次调查问卷结果进行计算可得出每个指标的熵值。
通过对各三级指标按计算所得的熵值从低到高进行排序，并针对本次评价指标体系的设置构想，第一次筛选时，将熵值定为1.8及以下的指标，一共选取21个；第二次筛选时，考虑到在问卷结果中体现的指标重要性的偏向性情况，选取3个，即考虑到指标“孵化器基础设施完备程度”，有40％的调查对象认为其“很重要”，虽然在信息论理论分析的结果并不理想，但因为在专家的评判中重要的程度很高，所以入选本指标体系；对于指标“在孵企业创造的年销售收入”，有40％的调查对象认为其“比较重要”，40％的调查对象认为其“重要”，其重要性的偏向性较为明显，且在专家的评判中也处于重要位置，故也选人本指标体系；对于指标“孵化基地面积”，鉴于湖南省孵化器目前发展尚处于初级阶段的实际情况，在有关专家意见的基础上，其在现阶段以及可预见的短期未来内，是具有很大实际意义的，酌情人选本指标体系。最终，本指标体系一共选取指标24个，如表3所示：
四、科技企业孵化器评价指标体系确定权重
在以上指标筛选的工作基础上，确定一个由2个一级指标、5个二级指标、24个三级指标构成的科技企业孵化器评价指标体系，内容如表3所示。根据确定的指标内容形成了第二份问卷，让调查对象对各二级指标下的三级指标进行两两之间的相对重要性水平的对比，以此确定各个指标在指标体系中应有的权重。
问卷设计中，将两指标之间的相对重要性水平确定为“极端重要、强烈重要、明显重要、稍重要、同等重要、稍不重要、明显不重要、强烈不重要、极端不重要”九个水平，调查数据来源于专家调查所得，被调查专家通常为理论与实践界权威人士，对科技企业孵化器有深入的研究，他们通过理论推导以及实践经验选取最合理的选项，以此获取最终的调查数据。
(一)处理数据得到估计值
本次调查统计数据表现为离散型分布，使用矩法估计模型处理得到样本均值的估计值，作为两个指标的相对权重均值。
(二)运用层次分析法确定权重
指标体系的建立过程是将上述处理过的数据运
用层次分析法进行处理，得出每个指标相对于这个体系的相对重要程度。
根据指标之间的隶属关系与相互之间的联系，把指标划分为三个层次，形成一个多层次的结构模型，分别为目标层(即整体指标体系)、一级指标层、二级指标层、三级指标层。建立的层次结构如图1：
最上层就是研究要达到的整体指标体系，一级指标层(A)、二级指标层(B)、三级指标层(C)所包含的具体指标见表3。
建立了递阶层次结构后，就可以逐层逐项进行两两比较，利用评分办法来比较它们的优劣，并根据一定的比率标度将判断定量化，形成比较判断矩阵。
全部计算结果列示如表4：
从表4中可以看出，C3、C4没有通过一致性检验，在统计学方法中通过对数据的合理调整可以使得结果通过简单，但在本项目中，由于数据面来源广泛、正确性要求高，因此不能对数据进行随意的调整。因此，本研究保持了原有的数据及结果。在本研究中，8个矩阵中仅有2个明显没有通过检验，即75％的结果通过了检验，数据的处理结果还较满意。
完成了层次的单排序之后，要进行层次总排序。利用层次单排序的计算结果，确定递阶层次结构中的最下层(方案层)中每一元素(方案)在总目标(最上层元素)中的权重。
通过层次分析法的处理运算，获取了整个研究体系中不同指标的相对权重。本研究共选取了24个三级指标，按其重要性权重排列如表5：
基于表5建立了指标体系的评价内容，最为重要的应该是员工素质结构以及优惠政策落实。
五、结束语
本研究采用了信息论中的信息熵对第一份指标筛选问卷进行处理，获得了“员工素质结构”、“中介机构数量”等24个评价指标；在第二份指标权重设计问卷当中，项目组采用了概率论中的点估计法综合了当前的问卷数据，得到了修正后的综合数据以用于最终指标权重的计算。在权重计算的过程当中，本研究使用了统计学中的层次分析法，获得了指标的相对重要性程度。
以湖南省为数据调查范围，可以发现研究的结论强化了当前科技企业孵化器仍然处于初级发展阶段的结论。湖南科技企业孵化器在此基础上应该加强此体系建设，根据指标的重要程度给予相应的加强，同时孵化器管理部门也应在此指标体系的参考下，制定相应的政策，予以支持和促进。研究结果同时也反映了目前国内科技企业孵化器最重视的指标。按重要性程度排列的前十位指标多数为孵化器环境评价指标，其中尤以软件环境为各大孵化器所重视。因此，必须要加大对科技企业孵化器环境建设的力度(尤其是软件配置环境的建设)，同时积极提供政策性的服务和引入专业化的中介服务机构，这样才能使科技孵化企业从根本上提供多维的企业孵化服务。
参考文献：
[1]张礼建，郑荣娟，程乐，科技企业孵化器孵化绩效评价指标体系构造[J]，重庆大学学报(自然科学版)，2005，(3)：148－151。
[2]晏敬东，简利君，胡树华科技企业孵化器管理绩效的评价指标体系设计[J]，科学学与科学管理，2004，(6)：44－46。
[3]刘宁晖，王小敏，基于灰色系统理论的科技企业孵化器管理绩效评价[J]，科学学与科学技术管,2007，(12)：20－22。
[4]徐菱涓，刘宁晖，我国科技企业孵化器绩效管理与评价之特殊性探析[J]，中国科技论坛，2008，(2)：32－34。
[5]罗公利，边伟民，我国科技企业孵化器孵化力影响因素研究[J]，高新技术产业化，2008，(6)：38－47。
[关键词] 孵化器 价值链模型 竞争力 因子分析法
竞争力来源于竞争优势，迈克尔・波特在研究企业的竞争优势中认为，竞争优势归根到底来源于企业为客户创造的超过其成本的价值。企业正是通过比其竞争对手更廉价或者更出色地开展这些重要的战略活动来赢得竞争优势的。当前的价值链分析提供了寻找竞争优势的基本思想和分析框架，即通过寻找关键增值环节并优化价值链以控制成本、提高企业或产业的运行效率。清华大学的林强、姜彦福认为：“…孵化器是执行孵化机制的社会经济组织。这种运作机制的初级形态是为被孵企业提供一些硬件设施和优惠政策等；中级形态是为被孵企业提供一些与创业有关的中介、培训和管理服务等；高级形态是形成孵化器自身的商业运作模式和企业文化，使得孵化器和被孵企业能够形成良性的互动成长….。”并提出我国孵化器的未来发展“在运作机制上要建立严格的现代企业制度，使企业孵化器真正成为市场的主体。”而价值链理论正是为这种经济组织提升自身服务增值能力提供了一个有效的理论工具。孵化器作为一种新型的服务型经济组织，从它的价值链角度分析其竞争力是适合的。
一、孵化器的价值链分析
波特认为，“每一个企业都是在设计、生产、销售、交货和辅助其产品的过程中进行种种活动的集合体。所有这些活动可以用一个价值链来表明”。企业的价值创造是通过一系列活动实现的，这些活动可分为基本活动与辅助活动两类。
孵化器的基本活动是个孵化器形成其价值的直接活动，包括行政服务；提供咨询、顾问等中级增值服务；提供投融资平台、基金管理、风险投资等高级增值服务，是一串各个环节相扣的增值服务过程。
行政服务是开展房屋租赁、设备共享服务、证照办理等有价工作，是孵化器的基本工作；孵化器为在孵企业提供的技术咨询、市场咨询、政策法律咨询、调研与项目开发、项目评估与建议、商业计划顾问、政策优惠与办理、市场营销开拓等是为在孵企业提供中级增值服务，对初创企业的成长中克服技术风险、市场开拓风险是极为有利的；孵化器组建基金管理公司、风险基金等，为在孵企业在基金投资项目开发、项目的评估与建议、基金管理与处分、企业管理顾问等方面，提供了其高级增值服务，推进在孵初创企业快速成长与扩张。显然，孵化器的服务过程也就是价值增值过程，是其基本活动的价值链形成过程。
孵化器的辅助活动包括基础设施结构、人力资源管理和社会网络管理，辅助活动虽然不直接参与价值的创造，但支持与影响孵化器的整个价值创造活动，因此其优劣不仅能直接影响孵化器的经营成本而且能间接影响孵化器的绩效。
孵化器要实现其正常运营，需要选择一个合适的科技研发环境、建设必要的孵化空间、配备必要的孵化器办公设备等起码的硬件环境；组建一支高素质、有企业管理经验的优秀管理团队，是孵化器正常运营的人力资源要素；孵化器与政府各部门、技术市场、资本市场、高校、科研机构等建立密切的关系，构建与维护战略伙伴关系的网络，是孵化器运营的基本软环境。上述三者是孵化器的基本资源，是孵化器对在孵企业实施孵化活动的辅助活动。
因此，孵化器价值链是行政服务、顾问咨询服务、基金管理及风险投资服务等基本活动,以及起辅助作用的各种活动的集合，其各个独立的增值服务环节组成了一个孵化初创企业的价值增值系统（见图）。
图 孵化器价值链模型
二、基于价值链的竞争力评价模型
从价值链形成过程来看，孵化器的价值增值过程是由提供增值服务的基本活动与辅助活动的有机结合共同实现的。其基础设施结构、人力资源和社会网络的开发与利用独立表现是没有意义的，只能通过增值服务的作用，将资源与团队智力资本有机结合，才能创造出绩效。
增值服务的作用是孵化，是真正意义上的价值增值活动。在孵化过程中，孵化器的绩效由价值增值过程的结果来体现，绩效的高低显现出竞争优势的高低，表征为竞争力的强弱。依据价值链模型，孵化器的资源和人力资本开发与利用升级的价值体现为自我增值，增值服务活动升级的价值体现为两类：一是综合能力，表征服务过程的水平；二是就业增量、毕业企业和创造财富，表征服务的结果。
由于孵化器的绩效是孵化器的运行结果，根据国家科技部的统计报表，表征孵化器绩效大小的主要衡量指标有：
对于综合能力指标由于涉及较多参数，计算方法复杂，在国家科技部的统计指标中没有统计，但是我们认为这是一个考察孵化器运行绩效的非常重要的指标，必须纳入指标体系一并衡量。
从竞争力的计量角度来看，鉴于评价指标体系的主客观性以及评价指标中不可避免地存在一定程度的相关性，可以采用多元统计中的因子分析法对孵化器竞争力进行综合评价。因子分析能将具有错综复杂关系的指标综合为数量较少的几个不相关的主因子，以再现原始指标与因子之间的相互关系；同时，根据孵化器价值链模型还可以对指标进行分类，通过降维处理把多项指标转化为少数几项综合指标。
参考文献：
[1]赵玉海:我国科技企业孵化器的现状与发展取向.中国科技统计网站.2005.12.14
[2]迈克尔・波特.竞争优势（中译本）[M].北京：华厦出版社，2005，3
[3]林强姜彦福:中国科技企业孵化器的发展及新趋势[J].科学学研究，2002（2）
[关键词]公共文化服务；评价指标；经验与启示
[DOI]10.13939/ki.zgsc.2016.38.134
1 引 言
对于公共文化服务的概念，实践界和学术界有较多的界定。一种类型是狭义上的公共文化服务，含义界定是围绕着公共文化服务提供的主体、提供的内容和主要目的展开的。另一种则是广义上的公共文化服务，将政府对文化领域提供的文化管理内容也包含在内，即文化政策服务（包括文化相关法律、法规、政策等）和文化市场监管服务。本研究中的公共文化服务是指狭义上的公共文化服务，简要讲就是公共部门为满足公共文化需求而提供的各类文化产品和服务的总称。具体来说公共文化服务是为了满足社会成员的文化方面的公共性需求，旨在提高公民文化生活水平和文化素养，由政府或其他准公共部门提供或委托提供的，与文化有关的公共产品和公共服务。
2 国外公共文化服务体系评价指标的经验
2.1 新加坡的公共文化服务体系评价指标
新加坡提倡的是政治管制与经济自由相结合，在政府治理上受西方政治体制影响深远，同时在文化价值上又受到东方文化的影响。新加坡在公共文化服务方面常常可以见到以商业化的手法进行建设。
新加坡信息通信艺术部制定的《2004―2008新加坡文化数据摘要》分为五个部分：A.文化和艺术场所和活动，B.文化和艺术活动参与；C.艺术教育和学校艺术课程参与；D.文化和艺术的资金支持；E.文化和艺术领域的经济贡献。这里的“资金支持”包括慈善捐助和政府财政拨款两大块；“经济贡献”包括文化和艺术领域的从业人员数，提供的工作岗位数，以及文化和艺术给经济活动带来的附加值。而艺术教育也在数据统计体系中排在了第三的地位，成为公共文化服务中极为重要的一部分。
以文化和艺术活动参与为例，这一指标中有一项具体展示了不同阶层民众参与文化活动的数据。将参与文化活动的民众按年龄划分为15～19岁、20～34岁、25～49岁、50～64岁四个年龄段；按职业划分为：PMETs、秘书销售与服务业、制造业交通与清洁工人、学生、家庭主妇和其他六种；按收入划分为：8000美元以上、4001～8000美元、2001～4000美元、2000美元以下。这样细致的划分能从指标数据中反映更多的信息：参与文化活动的民众的年龄情况如何、薪金水平如何以及教育程度如何等。
2.2 英国的公共文化服务体系评价指标
英国公共文化服务指标体系具有普适性与唯一性。普适性是指该指标体系在全国范围内适用，唯一性是指在一定的时间段内在整个国家范围内地方政府绩效情况的评价都是唯一的。
以2008年4月至2011年3月之间英国的公共文化服务指标体系为例，其间用于考察中央政府和地方政府绩效的重要工具是“国家指标体系”。该指标是根据政府综合开支审查而做出的，数量为198个，是中央政府考核地方政府及地方合作伙伴的绩效的唯一指标。其中所包括的文化服务指标有4个：A、参加体育及主动娱乐的成年人；B、使用公共图书馆；C、参观博物馆和美术馆；D、参与艺术。
以使用公共图书馆这一指标为例，该指标评价的是地方公共图书馆的使用水平，指标的定义为当地区域的成年人中，在最近12个月内至少一次使用公共图书馆服务的人所占的比例。使用公共图书馆的内容具体包括四个方面。第一，参观固定的公共图书馆或者流动图书馆，使用其提供的图书馆服务。第二，使用电脑访问在线图书馆资源或者服务。第三，以电话或者电子邮件等方式请求以及收到图书馆的服务。第四，得到馆外的主动服务，如家庭投递或者在图书馆建筑之外的图书馆活动等。公共图书馆之所以备选入到指标中来，在于它充实了个人的生活、提高了社区的凝聚力、提升了教育水平、增强了人们的幸福感。该指标旨在鼓励人们对公共文化活动的参与和享受。
2.3 日本的公共文化服务体系评价指标
在日本，同样有公共文化服务体系的评价指标。以美术馆公共文化服务为例，政府构建了美术馆公共文化服务绩效评估标准。该标准设定的指标包括四个方面：投入指标、产出指标、成效指标和影响指标。投入指标指的是一段时间内美术馆机构运行方面所需的资金投入量；产出指标是指一段时间内美术馆机构的以下具体统计：包括入馆的人数、新到馆的人数、社会弱势群体到馆的比例、外国客人到馆人数、公民利用率、在馆内参观的时间、志愿者人数、网站累计点击次数和举办展览的次数等；成效指标则是从美术馆文化服务对社会及大众产生的效果和影响去评价，具体包括以下指标：参观满意度、志愿者满意度、关心该公共文化服务机构发展的居民比例等；影响指标是指以大众公认的价值观为参考标准，对公共文化服务机构所实施的计划在一定时期过后产生的效果及影响进行绩效评估。
3 国外公共文化服务体系评价指标的启示
3.1 指标适用范围明确界定
对于单个指标来说，指标的定义及所统计的口径是明确界定的。比如：在英国公共文化服务指标体系中，对于美术馆、博物馆的定义及统计口径做出了明确的定义，范围清晰，保证了指标统计过程中的准确性。再如，同样是在英国公共文化服务指标体系中，使用公共图书馆指标中的主体是当地区域的成年人，这里的成年人则具体界定为16岁及以上，避免统计过程中出现误差。
3.2 评价的简单与直接
指标的设计、陈述与解释简单明了。比如，日本的美术馆公共文化服务产出指标是指一段时间内美术馆机构的具体统计：包括入馆的人数、新到馆的人数、社会弱势群体到馆的比例、外国客人到馆人数、公民利用率、在馆内参观的时间、志愿者人数、网站累计点击次数和举办展览的次数等。这类指标的特点是较少地使用晦涩的专业性强的词汇，使指标的含义能够被大多数民众直观地理解，提高民众的参与度。同时，指标多为直接性指标，较少复合指标，因此能够避免了复杂的计算，能够直接反映公共文化服务水平。
3.3 标准化与个性化相结合
标准化是公共文化服务指标体系的必要基础，同时也要与个性化相结合。例如，虽然英国公共文化服务指标评价的框架是全国通用的，但是为了兼顾地方的特殊性，也可以在指标的评判标准上做出妥协与分等级。在公共图书馆中，考虑到英国地方发展仍然存在不均衡的情况，就将评分标准划分为内伦敦、外伦敦、大都会区、单一政府和郡政府五种。体现了因地制宜，使指标的标准化与个性化相结合。
3.4 强调战略合作伙伴之间的合作
公共文化服务供给由多方构成，不仅包括政府还包括其他合作伙伴。如，英国的政府提供全部或者部分的资金支持，由独立的法人团体来实现文化的供给，独立的行业协会则出具监管规定，政府与社会是良性的互动合作关系。一定的竞争性与合作性保障了服务质量的提高与成本的节约，同时也促使政府不遗余力地促进战略合作伙伴之间的合作。
参考文献：
[1]胡税根，李倩.我国公共文化服务政策发展研究[J].华中师范大学学报：人文社会科学版，2015（3）：43-52.
[2]喻锋.绩效评价指标设计的价值理性与工具理性探析――基于中英公共文化服务评价的比较[J].甘肃行政学院学报，2015（1）：15-18.
[3]吴理财，洪明星，刘建.基本文化权益保障：内涵、经验与建议[J].桂海论丛，2015（2）：15-19.
关键词：大学生 创业 孵化器 评价指标 孵化绩效
中图分类号：G311 文献标识码：A 文章编号：1674-098X（2016）12（a）-0247-05
2013年，武汉市政府启动了旨在大力建设科技企业孵化器和促进大学生到科技企业孵化器创业、全方位扶持大学生创新创业的“青桐计划”，投入项目资金上千万元，并启动“科技企业孵化器千万平方米”的倍增工程。3年来，全市科技企业孵化器面积达920万平方米，大学生创业企业达2 000余家，创业特区达72个，大学生创业热情高涨，武汉已然成为大学生创新创业的热土。“青桐计划”实施不久，国家人社部、教育部等9个部门联合启动了“大学生创业引领计划”。面对世界经济不景气的形势，在大学生就业成为政府工作重点和社会关注焦点的情况下，已经先行一步的“青桐计划”就成为全国关注的热点[1]。
“青桐计划”在社会普遍关注之下，如何把“青桐计划”做得更务实、更有效，是我们应该进行冷静思考的内容。譬如，如何推进“青桐计划”的深入实施？如何优化大学生创业企业的规范指导？大学生创业企业入孵科技企业孵化器是否应建立有效的入孵筛选（进入）和成功毕业（退出）的机制？大学生企业孵化器的孵化绩效如何？如何对“青桐计划”孵化器的孵化绩效进行评价？等等。
1 大学生创业热之下的冷静思考
近年来，中国大学毕业生自主创业的比例逐年递增，大学毕业生创业的热潮已经悄然兴起。麦可思研究院《中国大学生就业报告》的数据显示，2015届大学毕业生的自主创业比例是3.0%，比2014届（2.9%）高出0.1个百分点，2015届高职高专毕业生自主创业的比例（3.9%）高于本科毕业生（2.1%）[2]。
2015届本科毕业生自主创业的主要风险因素为缺少资金（28%），其后是市场推广困难（26%）、缺乏企业管理经验（24%）。大学生初创企业的存活率很低，这在当下是一个普遍性问题，即使在浙江等有良好创业环境的省份，其成功率也只有5%左右。由于缺乏对行业的深刻认识，缺少对市场的驾驭能力，缺少技术研发经验，缺少人脉资源，缺少团队组建能力以及创业团队的知识和经验同质化等，大学毕业生创业存在很大的风险，而在经济下行期的风险更大。“综观中国大学生创业实情，成功率仅在1%左右，探究其根源，原始动力问题仍是关键，即大学生自身创业动机的不明晰、不坚定[3]。”
武汉市实施“青桐计划”3年的探索实践表明，大学生创业成功率低的问题已经开始困扰和影响着“青桐计划”的深入推进。
综上所述，在大学生创业热之下，就大学生孵化器的孵化绩效等问题进行冷静思考，要研究能够针对各类大学生创业孵化器进行评价的指标体系，帮助政府有关管理部门解决“青桐计划”存在的问题，为进一步推进“青桐计划”的实施提供决策依据。
2 建立“青桐计划”评价指标体系的必要性
“青桐计划”在执行过程中出现一些问题很正常，需要分析研究、加以调整或修正，以利于计划的深入推进和实施。
武汉市“青桐计划”促进大学生到孵化器创业、形成所谓大学生企业孵化器（以下简称“孵化器”）。
目前大体有4种运作模式：其一，已有的国家级或市级科技企业孵化器在其园内辟出“大学生创业苗圃”或“大学生创业特区”建成的孵化器；其二，高校在其园校内辟出“大学生创业特区”建成的孵化器；其三，各区与高校合作建设的“大学生创业园”或“大学生创新创业基地”；其四，社会机构用其不少于500 m2的办公区域建成的孵化器（见图1）。
这4种模式虽然运作主体不一、孵化举措各异、力度大小也有差别，但都存在缺乏孵化绩效评价的问题，导致许多孵化器出现管理不规范、指导不明确、孵化不到位、绩效不明显等问题。而要评价孵化绩效，必然涉及到大学生创业企业入孵筛选（进入）和成功毕业（退出）机制及对孵化器评价指标问题。因此，解决好这些问题，有必要创建和试行大学生创业企业及其孵化器评价指标体系。这不仅有利于优化大学生创业企业的规范指导，促进动态管理，而且有利于提高大学生创业企业孵化器的孵化绩效和地方财政资金的使用效率，还有利于为“青桐计划”可持续发展，并且为管理部门提供决策依据。
科技部公布的《国家级科技企业孵化器评价指标体系（试行）》主要针对的对象为国家级科技企业孵化器各级科技企业孵化器，而对其他科技企业孵化器只具有一些指导和参考意义（见表1、表2、表3）。
该指标体系对国家级孵化器综合评分的公式如下：
Zj=YijSiWiTi
其中，Yij表示j国家级孵化器第i个指标的数值得分，Si为第i项指标的权重，Wi为第i项指标的二级指标的权重，Ti榈i项指标的一级指标的权重[4]。
一级指标由服务能力、孵化绩效、社会贡献构成。
而从“青桐计划”实施3年以来的管理实践看，若简单套用科技部版的一级指标的“服务能力”对大学生创业孵化器来进行评价，大学生孵化器的“孵化绩效”和“社会贡献”及其三级指标的得分都将大大低于国家级孵化器的水平。
在“社会贡献”下面的“吸纳就业、成功企业”二级指标，其下面的三级指标均无法套用评价大学生创业孵化器的孵化绩效。
在“孵化绩效”的二级指标中，“研发效率、获奖情况”的三级指标也无法在大学生创业孵化器绩效评价中使用。
“青桐计划”孵化器是一种有特定创业对象的孵化器，在建设和管理上要有别于一般的科技孵化器。因此，政府管理部门亟待创建一个能针对大学生孵化器绩效进行评价的指标体系，评价大学生企业孵化器的孵化绩效，并且通过试行实践来逐步完善这一大学生孵化器绩效评价指标体系[5]。
3 大学生创业企业评价指标体系建议模型
3.1 大学生创业企业评价指标体系
创建大学生创业企业评价指标体系旨在规范指导大学生创业企业入孵孵化器，并顺利孵化成功，对于未能毕业的企业则退出孵化器，规范大学生企业从入孵到毕业的评价标准，以推动大学生创业企业健康发展。创建评价指标体系有利于深入实施“青桐计划”，优化对大学生创业企业的规范指导，促进动态管理，帮助大学生创业企业入孵孵化器并在孵化器顺利毕业，促进大学生创新创业健康和可持续发展（见表4）。
该评价指标体系以《关于印发的通知》（武科政〔2012〕24号）并结合“青桐计划”实施3年来的管理实践而创建[6]。
该评价指标体系体现了规范指导和服务扶持的原则。对于暂不具备条件、不能入孵或毕业的企业，给予一定准备期或延长期，并由孵化器制定专项计划进行精准服务扶持。
3.2 评价组织实施
以大学生创业企业为对象，由具备资质的第三方评估机构按照规定、标准和程序，定期组织专家进行评价，并评价结果，作为考核其入孵或毕业的重要依据。
实现动态管理之后，大学生创业企业就要按照评价指标体系的有关要求，按期如实上报有关材料。各孵化器则依据职责，指导、监督和协助大学生创业企业做好评价申报工作[7]。
3.3 评价结果及其应用
有了大学生创业企业评价指标体系，大学生创业企业符合入孵条件的，由孵化器及时吸纳入孵；符合毕业条件的，按规定程序报批认定。对那些经孵化毕业的大学生创业企业，在安排相关科技计划项目和表彰时，应予以优先考虑。
对于不按规定提供评价资料、不予评价认定、提供虚假评价资料的企业，可根据评价结果纳入到相关的征信系统管理中去。
4 大学生企业孵化器评价指标体系建议模型
4.1 大学生企业孵化器评价指标体系
以武汉市《市人民政府关于实施“青桐”计划鼓励大学生到科技企业孵化器创业的意见》（武政规〔2013〕14号）及其《实施导则》为政策依据，并以《国家级科技企业孵化器评价指标体系（试行）》等相关文件为理论依据，建立大学生企业孵化器评价指标体系（见表5）。
建立大学生企业孵化器评价指标体系有利于加强和规范孵化器管理，引导和促进其提高对大学生创业企业和创业人才的孵化服务能力、绩效水平和社会贡献率。同时，有利于克服政府管理工作中的“路径依赖”思维惯性，对大学生创业的支持更加精准，推进“青桐计划”深入实施，促进大学生创新创业的健康发展。
4.2 建立评价指标体系的原则
（1）政策服务原则。现阶段，武汉市政府为促进大学生创新创业，出台了一系列扶持政策。因此，有必要将孵化器为入孵的大学生创业企业争取政府政策扶持的工作情况作为评价孵化器的重要内容。
（2）动态管理原则。评价指标及其权重系数等根据形势发展需要进行确定或调整。
（3）绩效导向原则。加大孵化绩效和社会贡献评价权重，引导孵化器履职尽责、贴心服务。
4.3 评价组织实施
（1）以孵化器为对象，由具备资质的第三方评估机构按照规定、标准和程序，定期组织专家进行评价，并评价结果，作为考核孵化器的重要依据。
（2）各孵化器按照评价指标体系的有关要求，按期如实上报有关材料。
（3）市科技行政管理部门依据职责，指导、监督和协助全市孵化器做好数据统计、报告、评价等工作。
4.4 评价结果及其应用
（1）孵化器评价结果分为优秀（A）、良好（B）、合格（C）和不合格（D）四个等级。
（2）对评价结果为优秀的孵化器，在安排相关科技计划项目和表彰时，予以优先考虑。
（3）对不按规定提供评价资料或提供虚假评价资料的孵化器，视为不合格。后者还将被纳入征信系统管理。
（4）对第一次评价为不合格的孵化器，责令其提交整改承诺书；对连续两次评价为不合格的孵化器，取消其孵化器称号及享受有关政策的资格，并两年内不受理其重新申报为孵化器的申请。
5 结语
试行大学生创业企业评价和大学生企业孵化器评价指标体系，可以用以对3年来实施的“青桐计划”进行一个全面评估。试行该指标体系还有利于指导大学生创业的深入实施，化对大学生创业企业的规范指导，促进动态管理，帮助大学生创业企业入孵孵化器并在孵化器顺利毕业，帮助孵化器提高对大学生创业企业的孵化能力、绩效水平和社会贡献率。同时，可以有效地改善政府的管理工作，使大学生创新创业进入常态化的发展轨道。
“为者常成，行者常至。”通过在“青桐计划”中先试行该指标体系，将能够起到良好的试验和示范作用。
参考文献
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[4] 中华人民共和国科技部火炬中心.科技部火炬中心关于印发国家级科技企业孵化器评价指标体系（试行）的通知[EB/OL].科技部火炬中心，http：///2013-7-19.
[5] 武汉市科学技术局.关于下达2014年“青桐计划”大学生技术创新项目的通知[EB/OL].武汉市科技局，http：///2015-8-10.
[关键词]审计 收费 价格竞争
无论是在西方，还是在中国，审计服务向来是注册会计师行业的主营业务，因此审计服务价格的高低会直接影响到会计师事务所拥有的经济资源。审计定价过低将导致事务所经济资源短缺，这不仅限制事务所聘请高素质的审计人才，而且也限制事务所投入各个具体审计项目的经济资源。在资源有限的情况下，注册会计师只有通过降低审计证据的质量和减少审计证据的搜集数量来降低直接成本。但审计证据的不足可能会大大降低会计师发现会计报表错误与舞弊的概率，从而使审计风险增加。由此看来，较低的审计定价可能会降低审计服务的质量。然而，作为一种重要的“公共产品”生产活动，审计却不同于一般的产品或服务生产过程，审计质量的高低，往往直接影响到其产品――审计报告质量的高低，进而在资本市场中对投资者决策进行引导，最终影响到社会资源的流向与配置。当前，我国审计收费作为一种价格体系，具有其独特的定价模式及特征。笔者希望通过对我国审计定价体制的深入探析，为我国审计行业服务质量的提升及资本市场资源配置体系的优化做出一定的贡献。
一、我国现行审计市场定价的主要特征
(一)审计收费缺乏公认的定价标准
在西方国家，公认的审计收费定价标准是审计项目所需要的审计工时。一般说来，公司规模越大、业务越复杂精细、审计风险越高的项目所需的审计工时也越多，因此审计定价也理应越高。然而，在我国现行审计服务市场中，却并没有一个相对统一的定价标准，有的事务所按被审公司资产规模的大小确定审计价格，有的则按被审公司营业收入的多少来计算，而更多的则是在与客户反复的讨价还价博弈过程中确定审计服务价格。审计定价标准的不统一．会加重整个审计市场运行的不规范程度，直接引致许多违规或非法的行为。譬如说，许多上市公司与事务所私下商定的审计费用支付标准与审计结果直接挂钩，审计结果对上市公司越有利，则支付的审计费用越高，反之则越低。这样的价格机制会导致自利的事务所为实现更多的经济收益，直接或间接地与被审公司合作，共同进行盈余操纵等非法活动，从而实现所谓的“共赢”。事实上，这种情况下最终伤害的就是普通股民的利益，这与“投资者至上”的现代资本市场精神是明显违背的。
(二)审计收费标准总体偏低
与审计市场较为成熟的英美发达国家相比，我国审计行业收费标准明显偏低，例如上海市财政部门规定：注册会计师收费标准为150元／小时，主任会计师则为250元／小时。相比之下，在排除价格指数影响后，英国等外国特许会计师财务报表审计的收费标准则远高于这一收费标准。就审计项目本身而言，审计服务价格的偏低，无疑会对我国注册会计师审计的独立性及行业的发展产生不利的影响。首先，过低的收费使事务所的抗风险能力大大减弱。注册会计师行业是一个高风险的行业，它的收费中包括了一部分风险补偿，并建立一定的风险基金。在注册会计师执业过程中，风险和资产应该是同步、均衡积累的。如果发生风险积累和资产积累的不平衡，则一旦出现风险损失，就会给事务所造成不可挽回的巨大损失甚至倒闭；其次，较低的收费可能会导致审计质量的下降。由于收费过低，事务所为维持其生存，就必须缩短审计时间以求多做项目，由于没有足够的人力及经费去调查取证或进行其他风险控制行为，就会造成注册会计师被迫降低风险控制成本，这不仅使审计质量大打折扣，而且还进一步增加了审计风险，由此形成恶性循环。总而言之，我国低廉的审计服务价格难以支持注册会计师收集充分、适当的审计证据，由此我们就不难理解为什么我国上市公司审计失败事件屡屡浮出水面的现实了。
(三)审计收费价格竞争趋于恶性化
为提高市场占有率而夸大业务量、压低收费价格以及搞业务回扣等不正当竞争行为在审计行业内已经是公开的秘密。夏冬林等的研究显示，我国审计收费水平很低，2000年和2001年审计收费占资产比例均值分别为0.0366％和0.0412％，其中对规模越大的客户，事务所对其争夺越为激烈，相比较规模较小的客户而言，所收取的审计服务价格就相对越低。笔者认为，因恶性竞争所导致的低廉的审计服务价格，必将加大审计行业的风险，并严重影响审计服务的质量。譬如有的事务所为取得审计业务，在多种审计定价标准中采用明显较低的审计报价方案，这样的结果是一方面使得报价合理的事务所退出市场，另一方面也是最严重的后果就是低廉的审计收费所必然带来的低劣的审计服务质量，这就是“劣币驱除良币”效应在审计市场中的典型体现。另一方面，审计收费恶性竞争导致的直接后果就是事务所依赖于客户，在执行审计过程中屈从于客户的压力，使其独立性受到严重损害，从而造成一些违规或非法现象的发生。
二、对我国审计收费现状根源的剖析
(一)当前对审计服务价格的监管存在缺陷
《中华人民共和国注册会计师法》和《独立审计准则》都建议事务所按有关标准进行收费，并禁止根据审计结论进行弹性定价的不确定性收费行为。然而，由于在缺乏统一的法定审计服务定价标准的同时，相关主管部门对审计价格行为的监管落实也不严，这使得我国会计师行业审计定价方式五花八门，同时还伴随着大量的不确定性收费现象的发生，这些事实都在严重影响着事务所的独立性，最终的后果就是加剧了我国上市公司财务报表审计结论公允性欠佳的现状。除此之外，监管不严的又一表现就是上市公司审计收费信息披露不规范，财政部和中注协等相关部门并没有很好的发挥其价格监督的作用。
(二)高质量的审计服务需求不足
传统审计理论认为，在任何审计市场制度安排下，审计服务的最终需求都米自于报表使用者即投资者、债权人及管理层等利益相关方。但目前在我国，审|十市场却并不需要高质量的审计服务，其原因在于：就欠成熟的中国资本市场而言，以短线投机为目的n9散0对高质量审计报告的需求动力明显不足；另一方面，由于在上市公司中国有资产所有权占大多数，必然会使国有产权缺位以及公司治理结构欠完善，这些产权制度痼疾的出现，加上当前审汁市场是由政府一手培育和发展的市场，这使得上市公司大股东代表对高质量审计服务的需求也严重缺乏，所以审计服务需求动力就仅仅是由政策等因素形成的被动需求。多数公司仅是出于满足法规或政策的需要而聘请审计师，价格的高低几乎是其选择事务所的唯一标准。在此环境下，事务所也只能以低价来招揽业务，以求在激烈的审汁服务市场中分得一杯羹。
(三)审计法制体系不健全
目前．由于我国注册会计师民事赔偿责任制度尚不健全，审
汁师即使发生严重的审计失败，也没有经济赔偿压力，因此，会H师事务所没有收集足够的审计证据以控制审汁风险的内在动力，另一方面，由于审计服务这种特殊商品的质量本身难以判断，在低收费的情况下，也可以取得高收费情况下“一样”的商品。因此事务所在进行定价决策时便很少考虑提高审计质量和防范审汁风险所需要的审汁成本。尤其是在价格竞争激烈的审训‘市场环境下，因为没有相应的法规去严格约束事务所的行为，所以事务所很可能会减少必要审汁程序以节约审计成本。由此，在我国目前会计师及事务所的法律风险、民事赔偿责任风险近乎为零的环境下，审计收费的恶性竞争难以避免。
(四)审计市场集中度偏低
1j街我围地方事务所的数量增长非常快，而审计服务的购买方吼Jj市公司的数量却始终跟不上事务所的业务需求增长速度，因此审|十市场明显处于买方市场；另外，我国的事务所基本上都是中小所，这些事务所数量众多且素质参差不齐，这使得我国审计市场份额趋于分散，有资料表明，从04、05年的审计市场集中度来看，国内前10大事务所的市场占有率仅为30％，而美国1955年到1988年问前lO大事务所的市场占有率却高达80％以上，m此可以推断，我国的审计市场竞争十分激烈，出现恶性的价格战也就不足为奇了。
三、规范审计收费定价标准的相应配套措施
我国现阶段必须对事务所的审计服务价格确定机制予以一定的规范，应采取一系列配套措施以抑制上市公司用审计收费威肋会计师的独立性的行为，进而保证审计服务的质量：
(一)由财政部、中注协等联合制定审计服务定价的最低标准，并对事务所的收费情况进行适当的跟踪及监控。如前文所述，在我国高质量的审计服务需求不足，这导致低价招揽业务及回扣等现象十分严重，事务所甚至不惜以对审计意见的原则性让步作为行业竞争的手段，因此，在一定程度上事务所的恶性竞价行为可被视为其独立性降低的标志之一。通过相关监管部门列审计服务定价制定行业最低标准，不仅使事务所能够获得与其所付出成本相匹配的收益，还在一定程度上提高了审汁师的独立性，进而提升整个审计行业的社会公信度。此外，相关部门通过对审计行业收费行为的日常监管及检查活动，还可以深入了解行业的真实定价水平，使得审计收费不再是各所内部的秘密，这反过来又为制定合理的审计服务价格标准提供充分的数据基础和实证支持。
(二)制定以审计成本为基础的审计定价标准。当前，制定合理的价格底线是相关部门对审计服务价格进行有效监管的有效途径之一。在必要的审计成本基础上进行加成的审计定价策略，可令事务所达到合理的盈利目标，使其不再为了生存而在日常审计活动中简化必要的审计程序和削减必要的审计成本，这样就可以保证审计服务的质量，同时还可以有力的保障事务所的独立性不受影响。鉴于审计这种特殊活动主要消耗的是人力而非物力，由此天然地，社会必要劳动时间理应作为审计定价的参照标准，相应地，民问审计主管部门便可制定以工作量为基础的审计收费标准。通过制定这种统一的定价标准，必将在一定程度上解决目前审计服务价格体系混乱的问题，从而促使我国审计行业收费行为逐步走向规范化。
(三)积极构造“寡占型”审计市场结构。目前在我国会计师事务所为数众多(约4800家)，但多数规模较小。面剥低水平的恶性竞争，为求得生存，绝大多数小型所难免会采取低价招徕客户的定价策略；并在审计过程中屈从于客户的压力，以牺牲独立性为代价，不顾审计质量而与被审单位共谋，出具虚假的审I十报告，以达到保持现有客户和寻找新市场的日的。而通过国内事务所的大规模合并或联合，培育“寡占型”的审计市场结构，一方面可使这些事务所在占有充分市场份额的基础上，具备足够的实力和底气与客户进行审计价格的谈判，从而避免中小所之问低水平恶性竞争现象的重演，扭转审计方在审计市场中的弱势地位；另外，伴随着审计市场的放开．国际大型会计公司如“四大”对我国本土的审计行业已造成了巨大的冲击，面对这些“百年老店”的强势登陆，我国中小事务所无论在声誉、审计技术还是经验等方面都显得那么脆弱无力．为争夺市场，除了打价格牌之外他们别无选择，而价格战所带来的恶果就是造成审计质量及整个审计市场公信力的降低。因此，我国的会计师事务所必须走合并联合的道路，扩大规模，争取更太的市场空间。总之，培育“寡占型”的审计市场结构，不仅有利于审计匝量的提高，而且有利于增强我国本土审计行业与国际大型会计公司进行抗衡和竞争的能力，而不仅仅是“恶性竞价”的能力。
(四)对恶性价格竞争行为进行处罚。《反不正当竞争法》明确规定： “经营者以排挤竞争对手为目的，低于成本的价格销售商品，属于不正当竞争行为”。由此看来，事务所以超低价招揽业务的行为也属不正当竞争行为，相关部门应对那些不遵循职业道德而超低价收费的事务所加大处罚力度，除追究其行政责任外，还要追究其民事乃至刑事责任，为我国审计市场价格体系的良性发育提供强大的法制保障。
参考文献
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2016年4月，考察安徽、视察凤阳，重温改革之路。因中国农村改革发源地“小岗村”而闻名的凤阳县，再次迈出具有开创意义的一步――凤阳县人民法院和县工商联以县非公有制企业商事调解工作站为平台，在全国率先引入国家科技支撑计划支持的应收账款债权凭证（合同）流转系统，借助现代信息技术，开出全国首张人民法院盖章确认的“抵付型应收账款债权凭证（合同）”，记载债权总额为800万元，支持当事人债权流转抵销债务，成功化解多起企业“三角”和“多角”务纠纷，形成重要创新影响力。
应收账款债权凭证（合同）流转，系国家科技支撑计划“基于债权流转的新一代电子支付服务体系研发及应用示范项目”，是化解政府及企业债务，减少诉讼的有效途径。该项目由科技部立项，国务院发展研究中心金融所指导，中国科学技术大学、合肥工业大学及安徽海汇金融投资集团产学研联合创新。实践中，主要由地方政府组建市或县区级的国有独资应收账款债权管理公司，协同银行、保险等专业机构，将企业静态的应收、应付账款，通过科技和增信方式，转换为应收账款债权凭证（合同）记载的集融资、融货、流转、交易和抵付等多功能为一体的动态可流转应收账款。
与保理相比，应收账款债权凭证（合同）流转重在做实初始债权债务关系；与质押贷款相比，更加注重流转功能；与清理“三角债”相比，完全市场化运作，没有行政性质的强制清理，不需要初始资金注入，不放大风险；与政府融资相比，直接盘活企业应收账款，将更多资金注入实体经济，并在一定程度上缓解政府债务集中兑付压力，最终实现逐步化解。目前，津皖浙晋已分别组建了天津渤龙、浙江余姚等8家国资应收账款债权管理公司，42家中外资银行参与，业务规模300多亿元，未发生一例风险，有效解决企业融资难融资贵，形成了完整的业务网络和风险控制体系，受到商务部、财政部、中国人民银行、银监会、证监会、保监会等部委重视和支持。中国人民银行指出，这种模式对于解决中小企业融资难、化解三角债、降低流通成本、化解地方政府债务、推动信用体系建设将起到积极作用，支持扩大范围。
在司法领域，已有凤阳县人民法院、合肥市瑶海区人民法院制定《关于应收账款债权凭证（合同）流转抵销债权债务化解矛盾纠纷减少诉讼破解执行难的实施方案（试行）》，化解债权债务纠纷240余起，标的额6亿多元，成功将大量商事纠纷化解在诉前。其中，凤阳县法院支持开具的首批783张合计800万元凭证（合同），已累计流转2979次，化解债权债务纠纷金额2993万元，最终通过抵付工程款、餐饮费、消费款等实现债权债务闭环抵销499万元，剩余301万元在凭证（合同）期限内继续流转，解决了当事人双方的实际问题。
中考前学习方法.讲究质量：糊糊涂涂做三套，不如明明白白做一套，要讲质量，求效果。对于老师精心组合的题、自己平时害怕的题、容易出错的题要精做、用多种方法做，全方位地“透视”；其余题目一般化地做；有把握的题目、做过多遍的题目可以做。
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关键词：探究式教学；高三化学；教学设计
一、引言
高三是高中化学学习的重要阶段，起着归纳、总结、综合、应用中学化学知识的重要作用。高三复习课的主要任务是巩固学生的基础知识与基本技能，找出学生知识的盲点与不足进行补缺补漏，最大程度地提高学生分析问题和解决问题的能力。但是面对复习时间紧迫，教学任务繁重等困难，我们只有提高课堂效率才能从根本上解决问题。苏联心理学家鲁宾斯坦认为：人的思维过程始终始于“问题情境”。提问教学一直是教师经常采用的教学方式，在问与答的过程中实现师生之间的互动，这是一种有效的启发式教学法。
二、高三复习教学存在的主要问题
很多教师在高三教学实践活动中，时常感到学生在课堂上的学习效率不高，在一堂容量较大的复习课后，往往出现达不到预期目标的现象。这个现象的主要原因有两方面：一是教学方式的转变。在这几年的课改实践中，新课改的思想深入人心。教师们在新课授课中能较好地应用和实施新课程理念和新的教学方式。而到高三复习课上，一些老师又习惯性地走回老路，采用“满堂灌”的教学方式。这种教学方式不仅模糊了教师的职责了——教师是学生活动的组织者和引导者，忽略了学生在复习学习中的主体地位，更是学生学习效率低下的主要原因。二是教学内容的改变。一些教师上高三复习课时，喜欢将高一高二新课的知识点进行提炼总结，将内容进行压缩再重新讲授。这种复习模式虽然可以覆盖较全面的知识点，但容易让学生产生厌烦和小视的情绪，降低学生学习兴趣与主动性。
三、“问题探究式教学”在高三复习教学中的应用
将高三复习课的知识内容设计成几个有效的问题串，以课堂探究的形式让学生在探究中找出知识的薄弱环节，以此激发学生的学习热情，使其产生强烈的求知欲。再以几个深入性的问题为引导，加强学生对基本知识的理解与应用。对于教师而言，通过这种方式能准确把握学生存在的主要问题，在课后知识巩固上也能较有针对性地进行加强，以避免在已懂问题上花费过多精力，让学生从题海中走出来却又不错过提高自身水平的知识巩固，在减轻课业压力的同时又加强知识体系。在这种模式的复习教学下，问题设置的技巧性与有效性是其关键所在。下面笔者将结合课堂教学实践对这种教学模式进行探讨说明。
1.递进式。递进式问题设置是将整体教学内容表现为连续性的问题，环环相扣，层层剖析，步步深入。学生沿着教师设好的阶梯拾梯而上，思维一步一步地向纵深发展。随着问题的解决，完成整个教学任务，教师在其中只作必要的引导和指点。此种问题设置方式适用于较难理解的重要概念复习。例如：在复习鲁科《物质结构与性质》电负性与电离能时，我们可以设置以下几个问题。问题1：分别说出电离能与电负性的定义。问题2：比较第二周期C、N、O三种元素的电离能与电负性。问题3：甲硅烷（SiH4）的结构与甲烷相似。甲硅烷能与硝酸银发生如下反应：SiH4+8AgNO3+2H2O=8Ag+SiO2H4+8HNO3该反应中氢元素被氧化，由此可判断电负性：SiH问题4：如图1中，能正确表示与Si同周期部分元素的第三电离能（I3）与原子序数关系的是。
问题5：已知如下数据请写出HCN分子中N元素的化合价及说明判断依据。
在这几个问题中，我们从易到难有梯度地围绕电负性和电离能这两个重要概念进行问题设置。问题1、2属于基本概念记忆，学生能够较轻松地解决。而问题3、4、5的解决是建立在学生真正理解概念的基础上，并能对它进行灵活应用。电负性是表示两个不同原子形成化学键时吸引电子能力的相对强弱。SiH4在反应中氢元素被氧化，由此证明氢元素在化合物中显-1价，说明在氢元素比硅元素对共用电子对的吸引力更强，所以电负性：Si
2.矛盾式.从学生的心智状态出发，根据学生理解教材内容时可能产生的困惑，或是学生原有认知结构与新知识的矛盾，从而提出系列问题。此种问题设置方式适用于对学生进行综合思维训练，培养学生分析问题、解决问题能力的综合问题设置。例如我们在定量实验教学中为了让学生能够学会不断完善实验设计准确性和科学性可以设置如下问题：已知：为了测定工业纯碱中碳酸钠（含少量NaCl）的质量分数，某学生设计了实验装置如图2。准确称取盛有碱石灰的干燥管的质量W1，准确称取一定量纯碱W0并放入烧瓶中。从分液漏斗缓缓滴入稀硫酸，待不再发生气体后。称干燥管的总质量W2，设学生导出的计算公式为：
Na2CO3的质量分数=■×100%
问题1：W2-W1表示什么？
问题2：如果不计称量误差，该生的实验结果有无明显误差？如有，是偏大还是偏小？请简要说明，并提出补救措施。
通过分析计算公式，学生不难推测出W2-W1应为产生的二氧化碳气体的质量。设计者的意图是利用CO2~Na2CO3的关系，通过测定生成的二氧化碳气体的质量求算参加反应的碳酸钠质量，从而计算出混合物中碳酸钠的质量分数。但事实上，此实验装置图中干燥管前后质量差并不单纯是生成的二氧化碳气体质量，至此矛盾产生。抓住时机，老师引导学生通过讨论解决矛盾。（1）生成的CO2没有进行干燥其中混有H2O，被碱石灰一同吸收，使结果偏高；（2）空气中的CO2和H2O，会被碱石灰吸收，使结果偏高；（3）装置中残留的CO2，无法被碱石灰吸收，使结果偏低。为排除以上影响因素，学生不难对实验装置图进行改造和完善，得出了严密的定量实验装置图3。在这个解决矛盾的过程中，学生认识到定量实验设计的严密性与准确性是其解题的关键所在，同时也提高了分析问题解决问题的能力。矛盾的产生可以最大程度地激发学生探究问题的兴趣和求知的热情。因此这种问题设置方式对于高三化学复习也是十分有效的。
（1）吸收CO2中的H20；
（2）防止空气中的CO2和H20进入D装置；
（3）使装置中残留的CO2全部进入D。
高考化学是以新情景为依托，以解决问题为目标，综合考查学生获取化学信息的能力、分析和解决化学问题的能力以及化学实验与探究能力。命题重视理论联系实际，关注化学与科学技术、社会经济和生态环境的协调发展，以促进学生在知识与技能、过程与方法、情感态度价值观等方面的全面发展。在这种“问题化”的高三复习模式下，教师引导学生从认知需要出发，通过精心设计复习课的探究问题，把学生的思维带入问题情境中，让他们感觉学习是解决新问题的需要，产生一种积极探究问题的心理，大大激发学生的学习热情。学生在老师的引导探究下，能自主总结各知识点之间的联系，构建出知识网络，掌握知识迁移应用的方法，体会到化学学科在生产生活中的重要地位，从而实现提高高三复习课上课效率的目的。
参考文献：
[1]刘知新.化学教学论[M].第四版.北京：高等教育出版社，2009.
【关键词】 疱疹病毒4型,人;胃肿瘤;鼻咽肿瘤;dna甲基化;启动区(遗传学)
【摘要】 目的 研究分析青岛地区eb病毒(ebv)相关胃癌及鼻咽癌组织中ebv主要潜伏期编码基因启动子甲基化状态。方法 采用甲基化特异性pcr(msp)及亚硫酸氢盐基因组测序法(bgs)，分析32例ebv相关胃癌及20例ebv阳性鼻咽癌标本中编码ebv核抗原ebnas基因的启动子cp、wp、qp以及lmp1和lmp2a编码基因启动子的甲基化状态。结果 ebv相关胃癌及鼻咽癌肿瘤标本中ebv编码基因启动子的甲基化状态与肿瘤细胞的潜伏感染类型一致：cp和wp呈高甲基化状态，而qp未发生甲基化;2种ebv阳性肿瘤标本中lmp1和lmp2a编码基因启动子甲基化状态有所不同，两者在ebv相关胃癌组织甲基化程度明显高于其在ebv阳性的鼻咽癌(χ2=19.15、11.01，p<0.01)。结论 甲基化是调控ebv主要潜伏期基因启动子活动的重要机制之一。
【关键词】 疱疹病毒4型,人;胃肿瘤;鼻咽肿瘤;dna甲基化;启动区(遗传学)
the methylation status of the major ebv latency promoters in ebvagc and npc zhang xia, liu xia, jing yongzheng, et al (department of microbiology, qingdao university medical college, qingdao 266021, china); [abstract] objective to study and analyze the methylation status of major epsteinbarr virus (ebv) latency promoters in ebvassociated gastric carcinoma (ebvagc) and nasopharyngeal carcinoma (npc) in qingdao area. methods methylation status of specific cpg sites of cp, wp, qp, lmp1 promoter (lmp1p) and lmp2a promoter (lmp2ap) was systematically detected in 32 ebvagcs and 20 npcs by bisulfite genomic sequencing (bgs) and methylationspecific pcr (msp). results the methylation status of these promoters in ebvagc was consistent with npc. wp and cp were hypermethylated, whereas qp was unmethylated; the methylation status of lmp1p and lmp2ap in ebvagc was different from npc: the methylation rates of lmp1p and lmp2ap in ebvagc were significantly higher than those in npc (χ2=19.15,11.01;p<0.01). conclusion the methylation status of the ebv major latency promoters is one of important mechanisms in regulating the activities of these promoters.
[key words] herpesvirus 4, human; stomach neoplasms; nasopharyngeal neoplasms; dna methylation; promoter region (genetics)
eb病毒(ebv)属疱疹病毒科γ疱疹病毒亚科成员，95%以上健康成人携带ebv，与人类多种肿瘤如鼻咽癌、burkitt淋巴瘤、hodgkin病、胃癌等密切相关[12]。不同ebv相关肿瘤组织和ebv阳性细胞系中病毒基因的转录表达形式有所不同，在ebv潜伏感染细胞中，可表达的病毒基因有10多种，如ebv核抗原(ebna)1、2、3a、3b、3c和lp，潜伏膜蛋白(lmp)1、2a和2b，ebv编码的小rna(eber)1和2以及barf0的转录产物。根据ebv潜伏期基因表达形式不同分为潜伏ⅰ、ⅱ、ⅲ型3种潜伏类型。ebv相关胃癌和burkitt淋巴瘤组织均可以检测到潜伏期基因ebna1、ebers、lmp2a、barf0的转录表达，为潜伏ⅰ型。除了上述基因以外，在鼻咽癌组织、hodgkin病中还可检测到lmp1的表达者为ⅱ型潜伏。体外ebv永生化的b淋巴母细胞系(lcl)可检测到包括6种ebnas和3种lmps等在内的大部分ebv潜伏期基因的表达，称为ⅲ型潜伏。研究表明，ebv相关胃癌及鼻咽癌组织中病毒基因表现为限制性表达，推测ebv可能通过表观遗传机制调控病毒基因启动子，尤其是通过其甲基化状态来调控病毒基因的表达[3]。研究显示，ebv编码基因启动子序列中cpg位点甲基化可抑制相应基因的表达，但这些研究主要集中在淋巴细胞来源的ebv阳性肿瘤和细胞系。本实验选择上皮来源的ebv相关胃癌和ebv阳性鼻咽癌作为研究对象，检测其ebv主要潜伏期基因启动子甲基化状态，为深入探讨ebv相关肿瘤的发生机制及防治提供实验基础。
1 材料和方法
1.1 细胞系
ebv阳性akata、raji和b958细胞系由日本鸟取大学医学部生体情报学教室西连寺刚教授惠赠，分别为潜伏ⅰ型、潜伏ⅲ型burkitt淋巴瘤细胞系，ebv永生化的潜伏ⅲ型lcl细胞系用作该实验的对照细胞。上述细胞用含有体积分数0.10的胎牛血清、105 u /l青霉素和100 mg /l链霉素的rpmi 1640营养液，于37 ℃、体积分数0.05的co2培养箱中培养。
1.2 肿瘤标本
新鲜胃癌组织和石蜡包埋鼻咽癌组织取自青岛大学医学院附属医院﹑蓬莱市人民医院和烟台毓璜顶医院。采用原位杂交检测石蜡组织切片中ebv编码的小分子非多聚腺苷酸eber1的转录[4]，筛选出32例ebv阳性胃癌和20例ebv阳性鼻咽癌标本。
1.3 dna提取
采用酚氯仿异戊醇抽提法常规提取新鲜胃癌组织dna，采用qiaamp dna ffpe试剂盒提取石蜡包埋鼻咽癌组织dna，具体操作步骤按试剂盒(qiaamp tissue kit, qiagen, hilden, germany)说明进行。
1.4 dna处理
取30 μl上述提取的组织dna (2～5 μg)，加33 μl新鲜配制3 mol/l的naoh溶液混匀变性，置37 ℃水浴15 min;将新鲜配制的亚硫酸盐溶液(2.4 mol/l 亚硫酸钠，ph 5.0～5.2;0.5 mmol/l 氢醌与3 mol/l naoh的混合液)333 μl加入变性dna中进行修饰，55 ℃避光孵育4 h。修饰后的dna脱盐纯化处理按照dna纯化试剂盒(qiagen, hilden, germany)说明操作步骤进行;脱盐纯化的dna溶于50 μl te缓冲液中，室温下静置5 min。再加入3 mol/l的naoh 5.56 μl，37 ℃水浴15 min，使其脱磺化基团。将纯化后dna溶解于100 μl te缓冲液中，-20 ℃保存备用[5]。
1.5 甲基化特异性pcr(msp)
以亚硫酸氢盐修饰的组织dna作为模板进行msp，甲基化特异性引物、未甲基化特异性引物以及msp产物大小见表1，其中wp和cp特异性引物参考文献[56]设计，qp、lmp1 和 lmp2a启动子特异性引物采用methprimer软件进行在线设计。 pcr反应体积为25 μl，包括dna模板2 μl，1.25 u热启动酶takara，1.5 mmol/l mgcl2，0.2 nmol/l dntp 和0.6 mmol/l引物。反应条件：95 ℃预变性5～10 min;然后95 ℃变性30 s，最适温度退火30 s，72 ℃延伸1 min，共38个循环;最后72 ℃延伸10 min。扩增产物置20 g/l的琼脂糖凝胶上电泳，紫外线凝胶成像系统记录分析结果。ebv阳性akata、raji和b958细胞系dna 作阳性对照，ebv阴性ramos细胞dna作阴性对照。
1.6 亚硫酸盐基因测序
为进一步检测lmp1和lmp2a启动子区域cpg位点具体甲基化状态，并验证msp结果，参考文献设计引物行亚硫酸盐基因组测序(bgs)[78]，该引物序列位于msp引物序列外侧，见表2。pcr反应体积为25 μl，包括亚硫酸氢钠修饰的dna模板2 μl，1 u热启动dna聚合酶takara，1.5 mmol/l mgcl2，0.2 nmol/l dntp和0.6 mmol/l 引物。反应条件：95 ℃预变性5 min;然后95 ℃变性30 s，最适温度退火30 s，72 ℃延伸1 min，共38个循环;最后72 ℃延伸10 min。扩增产物置20 g/l的琼脂糖凝胶上电泳，紫外线凝胶成像系统观察结果后送测序。表1 甲基化特异性pcr引物启引物类型核酸序列表2 bgs测序引物引物类型核酸序列b958对应序列退火温度
1.6 统计学分析
采用ppms 1.5[9]统计软件进行统计学分析,计数资料的比较采用校正χ2检验及χ2检验。
2 结 果
2.1 cp、wp及qp甲基化检测
msp检测结果显示，b958细胞中未检测到cp的甲基化，raji细胞中cp高甲基化，但在akata细胞系中同时检测到甲基化和未甲基化的cp。raji和akata细胞系中wp呈高甲基化，但在b958细胞系中则呈部分未甲基化现象;3种细胞系中均未检测到qp的甲基化。本实验检测的52例ebv阳性肿瘤组织均表现为cp和wp高甲基化状态，而qp呈低甲基化状态。msp检测3种细胞系和部分ebv阳性标本wp、cp及qp甲基化状态的电泳结果见图1～3。
2.2 lmp1基因启动子甲基化检测
msp检测结果显示，32例ebv相关胃癌组织中lmp1启动子均呈高甲基化状态;20例鼻咽癌标本检测到3种msp结果类型，其中包括m型9例(45%)、u型6例(30%)，m+u型5例(25%)，结果见表3。图4为msp检测2种ebv阳性细胞系和部分ebv阳性标本lmp1启动子甲基化状态的电泳结果。bgs检测结果显示：b958和akata细胞系lmp1编码基因启动子区的25个cpg位点均没有发生甲基化;ebv阳性肿瘤组织的检测结果与msp结果基本一致，除n43外，其余标本该区域25个cpg位点呈甲基化状态。见表4。
2.3 lmp2a基因启动子甲基化检测
msp检测结果表明，在84.38% (27/32)ebv相关胃癌和40%(8/20)的鼻咽癌标本中，lmp2a编码基因启动子表现为高甲基化，结果见表3和图5。bgs检测的结果显示，b958和akata细胞系lmp2a编码基因中启动子区的20个cpg位点均没有发生甲基化;ebv阳性肿瘤组织的检测结果与
q7、q31、y13a 为ebv阳性胃癌标本，n31、n43为ebv阳性鼻咽癌标本，akata、raji、b958为ebv阳性细胞系。m代表采用甲基化特异性引物m1/m2的pcr结果，u为采用甲基化特异性u1/u2引物的pcr结果。表3 msp检测ebv编码基因启动子甲基化状态启动子类型甲基化类型ebvagc(例)ebv阳性npc(例)
msp检测结果基本一致。见表4。bgs测序结果证实，5例msp结果呈u+m的ebv阳性肿瘤标本(q215、da53、da78、da93和n36)中，lmp2a启动子区域cpg位点呈部分甲基化。在3例ebv阳性胃癌标本(da53、da78和da93)中，lmp2a编码基因部分cpg位点存在2种不同的甲基化形式，即甲基化(c)与未甲基化(t)同时存在(图6)。
2.4 lmp1和lmp2a基因启动子在ebv阳性胃癌和鼻咽癌中的甲基化率
ebv阳性胃癌组织中lmp1和lmp2a基因启动子甲基化阳性率明显高于鼻咽癌组织，差异有显著性(χ2=19.15、11.01，p<0.01)。见表5。表4 bgs检测lmp1和lmp2a编码基因启动子cpg位点甲基化状态msp结q31、da53和da78为ebv阳性胃癌标本，n33、n39、n36均为ebv阳性鼻咽癌标本。
图5 msp检测lmp2a编码基因启动子甲基化电泳结果
图中序列276对应表4中的cpg位点是14，287对应的cpg位点是15，310、313、315对应的cpg位点分别是16、17、18。如图所见位点14、15存在两种波峰，提示c与t同时存在;位点16、17、18仅一种波峰，即c。表5 ebv阳性胃癌和鼻咽癌中lmp1p和lmp2ap甲基化率的比较组 别nlmp1p阳性(例)阴性(例)甲基化率
3 讨 论
基因表达调控区域的dna序列发生化学修饰可影响基因表达，dna甲基化是最重要的修饰形式之一。本实验证实，ebv相关胃癌和ebv阳性鼻咽癌组织中，病毒基因表达调控区dna的甲基化与ebv潜伏期基因的表达密切相关。
编码ebv核抗原ebnas的启动子包括wp、cp和qp，其中wp和cp为ebnas的共同转录启动子，可转录合成全部6种ebnas mrna，而qp为ebna1的专有启动子，选择性转录合成ebna1 mrna。ebnas在ebv相关胃癌及鼻咽癌组织中表达类型相同，仅ebna1表达，其表达受cp、wp和qp等3种启动子调控[10]。实验证实，wp和cp引物序列所含cpg位点的甲基化状态可很好地反映启动子的甲基化状态[56]。本研究msp检测结果显示，在ebv相关胃癌及鼻咽癌组织中wp和cp表现为高甲基化，而qp则未发生甲基化，表明潜伏ⅰ和ⅱ型ebv阳性肿瘤组织中ebna1的表达由未甲基化的qp启动[1112]。由此可见，启动子区域cpg位点甲基化状态与ebv基因表达密切相关，并呈反向关系，即dna甲基化一般抑制基因表达;而非甲基化一般与基因的活化相关。
通常认为在潜伏ⅲ型细胞系中，ebnas的表达受wp/cp调控，而qp处于沉默状态。本实验结果显示，在b958细胞系中wp、cp和qp均呈低甲基化状态，表明ebna1的表达由三者共同调控，其他ebnas的表达则由wp/cp调控。研究证实，raji细胞所有ⅲ型潜伏基因均表达，理论上6种ebnas mrna的转录表达是由wp/cp启动，但本研究显示raji细胞系中wp和cp呈高甲基化状态，提示ebna1的表达受qp调控，其他ebnas的表达不受wp/cp调控，推测raji细胞系中ebnas的表达存在其他调控机制。研究显示，ebv阳性bl细胞系在体外培养时易发生表型改变，如ebv核抗原表达的改变，早期传代病毒基因表达呈高度限制性，仅ebna1表达;随着传代次数的增多晚期至少表达9种不同的病毒蛋白(ebna1、2、3a、3b、3c，lp，lmp1、2a、2b)[1314]。我们的结果也显示，akata细胞系cp区域有少量cpg位点未发生甲基化，而且akata细胞系lmp1和lmp2a编码基因启动子的甲基化状态也反映出其在体外培养过程中发生了表型改变。推测体外细胞培养条件与人体内环境明显不同，缺乏免疫监视，对细胞系的研究可反映但不能代表原始肿瘤组织中ebv主要潜伏期编码基因启动子的甲基化状态，因此有必要对原始肿瘤组织标本进行研究。
bgs检测lmp1和lmp2a启动子区域cpg位点甲基化结果表明，2种上皮来源的ebv阳性肿瘤组织中存在病毒基因启动子不完全甲基化现象。1996年，robertson等[14]在对ebv阳性burkitt淋巴瘤和hodgkin病肿瘤组织中cp甲基化状态进行研究时就发现存在不完全甲基化现象。我们的前期研究结果也证实，lmp1和lmp2a在ebv阳性胃癌组织中表达不同，其中lmp1不表达，而lmp2a仅在部分标本中表达[15]。fahraeus等[16]采用免疫印迹法检测到lmps在约71%鼻咽癌组织(标本来源中国)中表达。本研究结果显示，2种ebv阳性肿瘤组织中lmp1和lmp2a编码基因启动子的甲基化状态有所不同，在ebv相关胃癌标本所有的lmp1基因启动子和绝大部分(27/32)lmp2a编码基因启动子呈高甲基化状态;而在鼻咽癌组织中，lmp1和lmp2a编码基因的甲基化程度明显下降，高甲基化率分别为45%和40%，表明ebv相关基因调控区域dna甲基化状态是基因表达的重要调节机制之一。bgs检测结果所示的部分ebv阳性胃癌组织标本中部分cpg位点u与m同时存在，我们推测其原因有两种：一是等位基因甲基化情况不一致;二是病毒基因组dna甲基化状态不同(病毒部分dna甲基化而另一部分dna未甲基化)。
总之，ebv阳性胃癌及鼻咽癌组织中，ebv主要潜伏期编码基因启动子区域cpg位点甲基化状态与其表达呈负相关，ebv基因的高甲基化状态有助于其逃避免疫活性个体的免疫系统的监视，并长期存在宿主细胞内，其在肿瘤的发生、发展中的具体作用机制有待于进一步研究。
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